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鸡枞菌多糖的免疫调节作用及其注射液的研制

摘要第1-7页
Abstract第7-18页
第一章 文献综述第18-35页
 1 真菌多糖免疫调节作用及机制研究进展第18-26页
   ·促进免疫器官发育第18-19页
   ·促进体液免疫功能第19-20页
   ·增强T细胞免疫功能第20-21页
   ·增强单核吞噬细胞功能第21-22页
   ·提高红细胞免疫功能第22页
   ·促进细胞因子产生第22-23页
   ·影响淋巴细胞信号转导第23-25页
     ·影响淋巴细胞钙离子转导第23-24页
     ·调节cAMP、cGMP活性第24-25页
     ·调节巨噬细胞的一氧化氮含量第25页
   ·真菌多糖作为免疫增强剂应用前景展望第25-26页
 2 兽用免疫增强剂研究进展第26-31页
   ·免疫增强剂分类第26-27页
   ·新型兽用免疫佐剂第27-30页
     ·免疫刺激复合物佐剂第27页
     ·脂质体佐剂第27-28页
     ·细胞因子类佐剂第28-29页
     ·胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸佐剂第29页
     ·天然产物佐剂第29-30页
   ·免疫增强剂存在的问题及展望第30-31页
 3 鸡枞菌研究进展第31-33页
   ·鸡枞菌生态特点与分布第31页
   ·鸡枞菌分类和形态学鉴定第31-32页
   ·鸡枞菌生物学活性物质研究第32-33页
   ·鸡枞菌的开发前景第33页
 4 选题依据和意义第33-35页
第二章 鸡枞菌多糖分离纯化工艺研究第35-45页
 1 试验材料第35页
   ·主要药品与试剂第35页
   ·主要仪器第35页
 2 方法第35-38页
   ·鸡枞菌粗多糖提取工艺的单因素研究第35-36页
     ·温度对粗多糖得率的影响第35-36页
     ·液料比对粗多糖得率的影响第36页
     ·提取时间对粗多糖得率的影响第36页
     ·提取次数对粗多糖得率的影响第36页
   ·鸡枞菌粗多糖的提取工艺正交试验第36页
   ·超声波法与热水浸提法的粗多糖提取率比较试验第36-37页
   ·试验用精制多糖制备第37-38页
     ·冻融法除蛋白第37页
     ·Sevage法除蛋白第37页
     ·H_2O_2脱色第37页
     ·透析法去除小分子杂质第37页
     ·多糖定性试验第37页
     ·鸡枞菌多糖的糖含量测定第37-38页
 3 结果第38-42页
   ·单因素对粗多糖含量的影响第38-39页
   ·粗多糖提取工艺参数的正交试验结果第39-40页
   ·超声波法与热水浸提法提取粗多糖效果比较第40-41页
   ·精制多糖制备第41-42页
     ·定性试验第41页
     ·糖含量测定第41-42页
 4 讨论与小结第42-45页
   ·多糖提取工艺优化第42-43页
   ·多糖纯化工艺第43-44页
   ·小结第44-45页
第三章 鸡枞菌多糖对小鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响第45-63页
 1 试验材料第45-46页
   ·主要药品与试剂第45页
   ·试验动物第45页
   ·主要仪器第45-46页
 2 方法第46-48页
   ·鸡枞菌多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响第46页
     ·脾淋巴细胞分离第46页
     ·TAP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响第46页
   ·不同时间TAP对脾淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IFN-Γ的影响第46-47页
     ·TAP对脾淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IFN-γ的影响第46页
     ·TAP协同ConA对脾淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IFN-γ的影响第46-47页
   ·TAP对体外培养小鼠T淋巴细胞CD3~+%及CD4~+/CD8~+的影响第47页
   ·TAP对脾淋巴细胞IL-4、IL-2、IFN-r MRNA表达的影响第47-48页
     ·脾淋巴细胞总mRNA提取第47页
     ·半定量RT-PCR法检测IL-4、IL-2、IFN-γ mRNA表达第47-48页
   ·数据分析第48页
 3 结果第48-60页
   ·TAP对脾淋巴细胞增殖的影响第48-49页
   ·TAP对脾淋巴细胞分泌IL-4、IFN-r、IL-2的影响第49-54页
     ·TAP单独使用时对脾淋巴细胞分泌IL-4、IFN-γγ、IL-2的影响第49-52页
     ·TAP协同ConA对脾淋巴细胞分泌IL-4、IFN-γ、IL-2的影响第52-54页
   ·TAP协同CONA对体外培养T淋巴细胞亚群的影响第54-56页
   ·体外培养脾淋巴细胞总RNA提取第56页
   ·TAP对体外培养淋巴细胞IL-4、IFN-Γ、IL-2 MRNA表达的影响第56-60页
 4 讨论与小结第60-63页
   ·TAP对脾淋巴细胞增殖的影响第60页
   ·TAP对T淋巴细胞分类的影响第60-61页
   ·TAP对细胞因子及其MRNA表达的影响第61-62页
   ·小结第62-63页
第四章 鸡枞菌多糖在体内对小鼠免疫功能的影响第63-80页
 1 试验材料第63-64页
   ·主要药品与试剂第63-64页
   ·主要仪器第64页
   ·试验动物第64页
 2 方法第64-66页
   ·鸡枞菌多糖(TAP)对正常小鼠免疫功能的影响第64-65页
     ·TAP对正常小鼠溶血素及免疫器官指数的影响第64-65页
     ·TAP对正常小鼠巨噬细胞功能的影响第65页
   ·TAP对免疫抑制小鼠免疫功能的影响第65-66页
     ·小鼠免疫抑制模型制备第65页
     ·腹腔巨噬细胞功能及免疫器官指数检测第65页
     ·外周血CD3~+、CD4~+和CD8~+T淋巴细胞亚群检测第65页
     ·外周血溶血素及细胞因子IL-2,IL-4和IFN-γγ含量检测第65-66页
     ·脾淋巴细胞增殖试验第66页
     ·TAP对脾脏和胸腺组织病理学变化的影响第66页
   ·数据统计分析第66页
 3 结果第66-76页
   ·TAP对正常小鼠免疫功能的影响第66-68页
     ·TAP对溶血素及免疫器官指数的影响第66-67页
     ·TAP对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响第67-68页
   ·TAP对免疫抑制小鼠免疫功能的影响第68-76页
     ·TAP对腹腔巨噬细胞功能和免疫器官指数的影响第68-69页
     ·鸡枞菌多糖对免疫抑制小鼠T淋巴细胞亚群的影响第69-71页
     ·TAP对免疫抑制小鼠血清溶血素和细胞因子的影响第71-72页
     ·鸡枞菌多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞的增殖的影响第72-73页
     ·TAP对免疫抑制小鼠脾脏和胸腺组织病理学变化的影响第73-76页
 4 讨论与小结第76-80页
   ·免疫抑制模型制作第76页
   ·TAP对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响第76-77页
   ·TAP对小鼠血清溶血素的影响第77页
   ·TAP对小鼠免疫器官的影响第77页
   ·TAP对免疫抑制小鼠淋巴细胞增殖的影响第77-78页
   ·TAP对免疫抑制小鼠淋巴细胞分类及细胞因子的影响第78-79页
   ·小结第79-80页
第五章 鸡枞菌多糖注射液的制备、质量控制及稳定性试验第80-90页
 1 试验材料第80页
   ·主要药品与试剂第80页
   ·主要仪器第80页
   ·试验动物第80页
 2 方法第80-82页
   ·TAP注射液的制备第80页
   ·质量检查第80-82页
     ·鞣质检查第80页
     ·pH值检查第80-81页
     ·无菌检查第81页
     ·热原试验第81页
     ·澄明度检查第81页
     ·TAP注射液含糖量测定第81-82页
     ·费林试剂法测定TAP注射液单糖含量第82页
   ·稳定性试验第82页
     ·强光对TAP注射液的影响第82页
     ·高温对TAP注射液产品的影响第82页
     ·经典恒温法初步估算TAP注射液有效期第82页
 3 结果第82-87页
   ·TAP质量检查第82-84页
     ·鞣质检查第82-83页
     ·pH值检查第83页
     ·无菌检查第83页
     ·热原实验第83-84页
     ·澄明度检测第84页
     ·TAP注射液含糖量和单糖含量测定结果第84页
   ·稳定性试验第84-87页
     ·强光对TAP注射液的影响第84-85页
     ·高温对TAP注射液的影响第85页
     ·加速试验结果第85-87页
 4 讨论与小结第87-90页
   ·TAP注射液的制备工艺第87页
   ·TAP注射液的质量控制第87-88页
   ·TAP注射液有效期第88-89页
   ·小结第89-90页
第六章 鸡枞菌多糖注射液安全性试验第90-98页
 1 试验材料第90页
   ·主要药品第90页
   ·试验动物第90页
   ·主要仪器第90页
 2 方法第90-93页
   ·急性毒性试验第90-91页
   ·亚慢性毒性试验第91页
   ·局部刺激试验第91-92页
     ·眼部刺激试验第91页
     ·肌肉刺激试验第91-92页
   ·过敏反应试验第92页
   ·溶血试验第92-93页
 3 结果第93-96页
   ·急性毒性试验第93页
   ·亚慢性毒性试验第93-95页
   ·局部刺激试验结果第95页
     ·眼部刺激试验结果第95页
     ·肌肉刺激试验结果第95页
   ·过敏试验结果第95页
   ·溶血试验结果第95-96页
 4. 讨论与小结第96-98页
   ·急、亚慢性毒性试验第96页
   ·局部刺激试验第96页
   ·过敏试验第96-97页
   ·溶血试验第97页
   ·小结第97-98页
第七章 鸡枞菌多糖作为免疫佐剂对疫苗免疫效果的影响第98-111页
 1 试验材料第98页
   ·主要药品与试剂第98页
   ·主要仪器第98页
   ·试验动物第98页
 2 方法第98-101页
   ·TAP对猪口蹄疫灭活苗免疫效果的影响第99页
     ·动物分组与处理第99页
     ·正向间接血凝试验检测口蹄疫抗体效价第99页
     ·TAP对免疫仔猪外周血白细胞的影响第99页
   ·TAP对鸡新城疫弱毒苗免疫效果的影响第99-101页
     ·动物分组与处理第100页
     ·1%鸡红细胞悬液制备第100页
     ·血凝(HA)试验测定抗原效价第100页
     ·4单位凝集价抗原校正第100-101页
     ·血凝抑制(HI)试验检测新城疫抗体效价第101页
     ·免疫器官指数检测第101页
   ·数据分析第101页
 3 结果第101-106页
   ·TAP对口蹄疫油佐剂灭活苗免疫效果的影响第101-103页
   ·TAP对免疫仔猪外周血白细胞的影响第103-105页
   ·TAP对鸡新城疫弱毒苗免疫效果的影响第105-106页
   ·TAP对鸡免疫器官指数的影响第106页
 4 讨论与小结第106-111页
   ·TAP对灭活苗和弱毒苗免疫后抗体效价的影响第106-108页
   ·TAP对免疫仔猪血液生理指标的影响第108-109页
   ·TAP对免疫鸡体重及免疫器官的影响第109页
   ·小结第109-111页
参考文献第111-124页
致谢第124-125页
攻读学位期间发表论文第125页

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