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乳源金葡菌主要肠毒素基因的检测、表达及其抗体制备

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
图表目录第9-11页
本论文常用中英文缩写词第11-12页
文献综述第12-17页
引言第17-19页
1 材料与方法第19-30页
   ·实验菌株第19页
   ·工程菌与质粒第19页
   ·酶类与主要试剂(盒)第19页
   ·实验动物第19页
   ·主要培养基与溶液的配制第19-22页
     ·Baird-Parker 培养基第19页
     ·LB 培养基第19页
     ·琼脂糖凝胶电泳所需溶液第19-20页
     ·制备感受态细胞所需溶液第20页
     ·蛋白电泳检测所需溶液第20-21页
     ·蛋白诱导表达及提纯所需溶液第21页
     ·ELISA 实验所需溶液第21-22页
   ·主要仪器第22页
   ·乳源金葡菌合肥分离株 SE 基因的 PCR 检测第22-24页
     ·细菌基因组 DNA 提取第22-23页
     ·引物设计第23-24页
     ·SE 基因 PCR 扩增条件的优化第24页
   ·原核表达重组质粒的构建与鉴定第24-27页
     ·SEA 与 SEG 基因的 PCR 扩增第24页
     ·PCR 产物回收纯化与 pMAL-c4X 质粒抽提第24-25页
     ·PCR 产物与质粒的双酶切第25页
     ·连接与转化第25-26页
     ·重组表达质粒的鉴定第26-27页
   ·重组融合蛋白的表达与纯化第27-28页
     ·重组融合蛋白的诱导表达与鉴定第27页
     ·表达产物的性质分析第27-28页
     ·重组融合蛋白的大量表达第28页
     ·重组融合蛋白的纯化第28页
   ·SEA 与 SEG 蛋白抗体的制备第28-30页
     ·免疫原制备第28-29页
     ·实验兔免疫第29页
     ·间接 ELISA 法检测抗体水平第29页
     ·免疫琼脂扩散沉淀试验检测抗体水平第29-30页
2 结果与分析第30-42页
   ·乳源金葡菌合肥分离株 SE 基因携带率第30-35页
   ·乳源金葡菌合肥分离株 SE 基因型的分析第35-36页
   ·重组表达质粒的鉴定第36-39页
     ·SEA 与 SEG 基因的 PCR 扩增第36-37页
     ·重组表达质粒的构建与鉴定第37-39页
   ·重组融合蛋白的诱导表达、鉴定与纯化第39-40页
   ·重组融合蛋白表达性质的分析第40页
   ·SEA 与 SEG 蛋白抗体的的效价第40-42页
3 讨论第42-44页
   ·金葡菌不同分离株 SE 基因型差异的分析第42页
   ·信号肽对 SE 蛋白原核表达的影响第42-43页
   ·制备 SEA 和 SEG 蛋白特异性抗体的意义第43-44页
结论第44-45页
参考文献第45-51页
附录第51-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

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