摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
图表目录 | 第9-11页 |
本论文常用中英文缩写词 | 第11-12页 |
文献综述 | 第12-17页 |
引言 | 第17-19页 |
1 材料与方法 | 第19-30页 |
·实验菌株 | 第19页 |
·工程菌与质粒 | 第19页 |
·酶类与主要试剂(盒) | 第19页 |
·实验动物 | 第19页 |
·主要培养基与溶液的配制 | 第19-22页 |
·Baird-Parker 培养基 | 第19页 |
·LB 培养基 | 第19页 |
·琼脂糖凝胶电泳所需溶液 | 第19-20页 |
·制备感受态细胞所需溶液 | 第20页 |
·蛋白电泳检测所需溶液 | 第20-21页 |
·蛋白诱导表达及提纯所需溶液 | 第21页 |
·ELISA 实验所需溶液 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·乳源金葡菌合肥分离株 SE 基因的 PCR 检测 | 第22-24页 |
·细菌基因组 DNA 提取 | 第22-23页 |
·引物设计 | 第23-24页 |
·SE 基因 PCR 扩增条件的优化 | 第24页 |
·原核表达重组质粒的构建与鉴定 | 第24-27页 |
·SEA 与 SEG 基因的 PCR 扩增 | 第24页 |
·PCR 产物回收纯化与 pMAL-c4X 质粒抽提 | 第24-25页 |
·PCR 产物与质粒的双酶切 | 第25页 |
·连接与转化 | 第25-26页 |
·重组表达质粒的鉴定 | 第26-27页 |
·重组融合蛋白的表达与纯化 | 第27-28页 |
·重组融合蛋白的诱导表达与鉴定 | 第27页 |
·表达产物的性质分析 | 第27-28页 |
·重组融合蛋白的大量表达 | 第28页 |
·重组融合蛋白的纯化 | 第28页 |
·SEA 与 SEG 蛋白抗体的制备 | 第28-30页 |
·免疫原制备 | 第28-29页 |
·实验兔免疫 | 第29页 |
·间接 ELISA 法检测抗体水平 | 第29页 |
·免疫琼脂扩散沉淀试验检测抗体水平 | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-42页 |
·乳源金葡菌合肥分离株 SE 基因携带率 | 第30-35页 |
·乳源金葡菌合肥分离株 SE 基因型的分析 | 第35-36页 |
·重组表达质粒的鉴定 | 第36-39页 |
·SEA 与 SEG 基因的 PCR 扩增 | 第36-37页 |
·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第37-39页 |
·重组融合蛋白的诱导表达、鉴定与纯化 | 第39-40页 |
·重组融合蛋白表达性质的分析 | 第40页 |
·SEA 与 SEG 蛋白抗体的的效价 | 第40-42页 |
3 讨论 | 第42-44页 |
·金葡菌不同分离株 SE 基因型差异的分析 | 第42页 |
·信号肽对 SE 蛋白原核表达的影响 | 第42-43页 |
·制备 SEA 和 SEG 蛋白特异性抗体的意义 | 第43-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录 | 第51-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |