摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
文献综述 昆虫螺原体的研究 | 第15-34页 |
一、螺原体的发现及研究概况 | 第15-16页 |
二、螺原体的的基本特性、分类及鉴定 | 第16-18页 |
三、昆虫螺原体的生物多样性 | 第18-24页 |
1. 昆虫螺原体的物种多样性 | 第18-22页 |
2. 宿主多样性 | 第22-23页 |
3. 地理分布多样性 | 第23-24页 |
四、昆虫与螺原体的关系 | 第24-26页 |
1. 致病性昆虫螺原体 | 第24-25页 |
2. 性比螺原体 | 第25页 |
3. 共生螺原体 | 第25-26页 |
五、我国螺原体的研究概况 | 第26-28页 |
参考文献 | 第28-34页 |
第一章 昆虫螺原体的分离、培养及生物学特性研究 | 第34-51页 |
前言 | 第34-36页 |
1 材料和方法 | 第36-39页 |
·昆虫的采集、保存及鉴定 | 第36页 |
·昆虫螺原体的分离、纯化及保存 | 第36-37页 |
·螺原体的形态及运动性观察 | 第37页 |
·螺原体的滤过性研究 | 第37页 |
·螺原体生长特性的研究 | 第37-38页 |
·螺原体生理特性研究 | 第38-39页 |
·相关螺原体菌株致病性的研究 | 第39页 |
2 结果与分析 | 第39-46页 |
·昆虫样品的采集、保存及鉴定 | 第39-40页 |
·昆虫螺原体的分离、纯化及保存 | 第40页 |
·分离菌株的滤过性、运动性及形态观察 | 第40-43页 |
·螺原体的生长特性 | 第43-45页 |
·螺原体的生理特性 | 第45-46页 |
·螺原体的致病性研究 | 第46页 |
3 讨论 | 第46-49页 |
参考文献 | 第49-51页 |
第二章 膜翅目昆虫螺原体多基因系统发育分析 | 第51-66页 |
前言 | 第51-52页 |
1 材料与方法 | 第52-55页 |
·供试菌株 | 第52页 |
·螺原体基因组DNA的提取 | 第52-53页 |
·目的基因片段的PCR扩增与电泳分离 | 第53-54页 |
·目的片段的测序 | 第54页 |
·系统发育分析 | 第54-55页 |
2 结果与分析 | 第55-58页 |
·螺原体基因组DNA的提取 | 第55页 |
·目的基因片段的PCR扩增和测序 | 第55-57页 |
·目的基因片段的比对 | 第57页 |
·系统发育分析 | 第57-58页 |
3 讨论 | 第58-64页 |
参考文献 | 第64-66页 |
第三章 膜翅目昆虫螺原体血清学分析及间接ELISA方法的建立 | 第66-89页 |
第一节 膜翅目昆虫螺原体血清学分析 | 第66-73页 |
前言 | 第66-67页 |
1 材料与方法 | 第67-68页 |
·供试菌株及相关抗体 | 第67页 |
·螺原体菌株ZHUF0901、MF0905抗原的制备 | 第67页 |
·螺原体菌株ZHUF0901、MF0905抗血清的制备 | 第67页 |
·血清学试验 | 第67-68页 |
2 结果与分析 | 第68-73页 |
·生长抑制试验 | 第68-69页 |
·代谢抑制试验 | 第69-71页 |
·菌体变形试验 | 第71-73页 |
第二节 蜜蜂螺原体间接ELISA方法的建立 | 第73-87页 |
前言 | 第73-74页 |
1 材料与方法 | 第74-78页 |
·供试菌株及所用试剂和仪器 | 第74-75页 |
·抗原的制备 | 第75-76页 |
·考马斯亮蓝法测定抗原蛋白含量 | 第76页 |
·蜜蜂螺原体S. melliferum间接ELISA体系的建立 | 第76-78页 |
·螺原体菌株的检测 | 第78页 |
2、结果与分析 | 第78-85页 |
·抗原蛋白含量的测定 | 第78-79页 |
·抗原抗体最适浓度的选择 | 第79-80页 |
·抗体效价的确定 | 第80页 |
·包被条件的选择 | 第80-81页 |
·封闭液的选择 | 第81-82页 |
·血清作用时间的选择 | 第82-83页 |
·二抗作用时间的选择 | 第83页 |
·敏感性实验 | 第83页 |
·特异性实验 | 第83-84页 |
·间接ELISA检测结果 | 第84-85页 |
3、讨论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-89页 |
第四章 我国螺原体的遗传多样性分析 | 第89-99页 |
前言 | 第89-90页 |
1 材料和方法 | 第90-92页 |
·供试菌株 | 第90页 |
·螺原体基因组DNA的提取 | 第90页 |
·引物筛选、RAPD扩增及检测 | 第90-91页 |
·数据统计及处理 | 第91-92页 |
2 结果和分析 | 第92-94页 |
·螺原体基因组DNA的提取 | 第92页 |
·引物筛选 | 第92页 |
·RAPD扩增结果 | 第92-93页 |
·螺原体个体间的相似性及聚类分析 | 第93-94页 |
·螺原体种间差异 | 第94页 |
·螺原体种内差异 | 第94页 |
3 讨论 | 第94-97页 |
参考文献 | 第97-99页 |
综合讨论 | 第99-104页 |
参考文献 | 第104-106页 |
全文总结 | 第106-109页 |
附录:RAPD多样性扩增图谱 | 第109-115页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第115-117页 |
致谢 | 第117页 |