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膜翅目昆虫螺原体的研究及我国部分螺原体遗传多样性分析

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-15页
文献综述 昆虫螺原体的研究第15-34页
 一、螺原体的发现及研究概况第15-16页
 二、螺原体的的基本特性、分类及鉴定第16-18页
 三、昆虫螺原体的生物多样性第18-24页
  1. 昆虫螺原体的物种多样性第18-22页
  2. 宿主多样性第22-23页
  3. 地理分布多样性第23-24页
 四、昆虫与螺原体的关系第24-26页
  1. 致病性昆虫螺原体第24-25页
  2. 性比螺原体第25页
  3. 共生螺原体第25-26页
 五、我国螺原体的研究概况第26-28页
 参考文献第28-34页
第一章 昆虫螺原体的分离、培养及生物学特性研究第34-51页
 前言第34-36页
 1 材料和方法第36-39页
   ·昆虫的采集、保存及鉴定第36页
   ·昆虫螺原体的分离、纯化及保存第36-37页
   ·螺原体的形态及运动性观察第37页
   ·螺原体的滤过性研究第37页
   ·螺原体生长特性的研究第37-38页
   ·螺原体生理特性研究第38-39页
   ·相关螺原体菌株致病性的研究第39页
 2 结果与分析第39-46页
   ·昆虫样品的采集、保存及鉴定第39-40页
   ·昆虫螺原体的分离、纯化及保存第40页
   ·分离菌株的滤过性、运动性及形态观察第40-43页
   ·螺原体的生长特性第43-45页
   ·螺原体的生理特性第45-46页
   ·螺原体的致病性研究第46页
 3 讨论第46-49页
 参考文献第49-51页
第二章 膜翅目昆虫螺原体多基因系统发育分析第51-66页
 前言第51-52页
 1 材料与方法第52-55页
   ·供试菌株第52页
   ·螺原体基因组DNA的提取第52-53页
   ·目的基因片段的PCR扩增与电泳分离第53-54页
   ·目的片段的测序第54页
   ·系统发育分析第54-55页
 2 结果与分析第55-58页
   ·螺原体基因组DNA的提取第55页
   ·目的基因片段的PCR扩增和测序第55-57页
   ·目的基因片段的比对第57页
   ·系统发育分析第57-58页
 3 讨论第58-64页
 参考文献第64-66页
第三章 膜翅目昆虫螺原体血清学分析及间接ELISA方法的建立第66-89页
 第一节 膜翅目昆虫螺原体血清学分析第66-73页
  前言第66-67页
  1 材料与方法第67-68页
   ·供试菌株及相关抗体第67页
   ·螺原体菌株ZHUF0901、MF0905抗原的制备第67页
   ·螺原体菌株ZHUF0901、MF0905抗血清的制备第67页
   ·血清学试验第67-68页
  2 结果与分析第68-73页
   ·生长抑制试验第68-69页
   ·代谢抑制试验第69-71页
   ·菌体变形试验第71-73页
 第二节 蜜蜂螺原体间接ELISA方法的建立第73-87页
  前言第73-74页
  1 材料与方法第74-78页
   ·供试菌株及所用试剂和仪器第74-75页
   ·抗原的制备第75-76页
   ·考马斯亮蓝法测定抗原蛋白含量第76页
   ·蜜蜂螺原体S. melliferum间接ELISA体系的建立第76-78页
   ·螺原体菌株的检测第78页
  2、结果与分析第78-85页
   ·抗原蛋白含量的测定第78-79页
   ·抗原抗体最适浓度的选择第79-80页
   ·抗体效价的确定第80页
   ·包被条件的选择第80-81页
   ·封闭液的选择第81-82页
   ·血清作用时间的选择第82-83页
   ·二抗作用时间的选择第83页
   ·敏感性实验第83页
   ·特异性实验第83-84页
   ·间接ELISA检测结果第84-85页
  3、讨论第85-87页
 参考文献第87-89页
第四章 我国螺原体的遗传多样性分析第89-99页
 前言第89-90页
 1 材料和方法第90-92页
   ·供试菌株第90页
   ·螺原体基因组DNA的提取第90页
   ·引物筛选、RAPD扩增及检测第90-91页
   ·数据统计及处理第91-92页
 2 结果和分析第92-94页
   ·螺原体基因组DNA的提取第92页
   ·引物筛选第92页
   ·RAPD扩增结果第92-93页
   ·螺原体个体间的相似性及聚类分析第93-94页
   ·螺原体种间差异第94页
   ·螺原体种内差异第94页
 3 讨论第94-97页
 参考文献第97-99页
综合讨论第99-104页
参考文献第104-106页
全文总结第106-109页
附录:RAPD多样性扩增图谱第109-115页
攻读硕士期间发表的学术论文第115-117页
致谢第117页

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