| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| 1 文献综述 | 第13-20页 |
| ·葡萄卷叶病的田间症状和危害 | 第13-14页 |
| ·葡萄卷叶病毒的特征 | 第14-15页 |
| ·葡萄卷叶病毒的传播 | 第15-16页 |
| ·葡萄卷叶病毒检测技术 | 第16-18页 |
| ·葡萄卷叶病的防治 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-28页 |
| ·植物材料和试剂 | 第20页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20页 |
| ·研究方法 | 第20-28页 |
| ·葡萄卷叶病的田间调查 | 第20页 |
| ·DAS-ELISA | 第20-21页 |
| ·提取总RNA | 第21页 |
| ·总RNA 的纯度和完整性检测 | 第21页 |
| ·单一RT-PCR 体系的建立 | 第21-24页 |
| ·多重RT-PCR 体系的建立 | 第24页 |
| ·GLRaV-1，-3，-4 和-5 多重RT-PCR 体系的优化 | 第24-25页 |
| ·质粒DNA 的小量制备 | 第25页 |
| ·基因克隆与序列测定 | 第25-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-42页 |
| ·田间调查结果分析 | 第28页 |
| ·ELISA 和RT-PCR 检测结果 | 第28-30页 |
| ·总RNA 的纯度、含量和完整性检测 | 第30-32页 |
| ·总RNA 的纯度和含量 | 第30-31页 |
| ·总RNA 的完整性检测 | 第31-32页 |
| ·特异性和灵敏性试验 | 第32-33页 |
| ·多重PCR 反应体系的优化 | 第33-35页 |
| ·cDNA 模板用量的影响 | 第33-34页 |
| ·引物浓度的影响 | 第34页 |
| ·Mg~(2+)浓度的影响 | 第34页 |
| ·Taq DNA 聚合酶的影响 | 第34页 |
| ·退火温度的影响 | 第34-35页 |
| ·循环数的影响 | 第35页 |
| ·多重RT-PCR 优化体系的建立 | 第35-36页 |
| ·检测灵敏度测定 | 第36页 |
| ·田间样品的检测 | 第36-38页 |
| ·基因片段的克隆与序列分析 | 第38-42页 |
| ·GLRV-4 HSP70 基因片段的序列分析与比较 | 第38-39页 |
| ·GLRV-4 CP 基因片段的序列分析与比较 | 第39-40页 |
| ·GLRV-5 CP 基因片段的序列分析与比较 | 第40-42页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第42-44页 |
| ·关于 GLRaVs 调查与检测 | 第42页 |
| ·关于多重RT-PCR 反应 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 附 试验所用试剂配制 | 第50-52页 |
| 作者简历 | 第52页 |