| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 縮略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-18页 |
| ·植物R基因介导的抗病机理 | 第13-14页 |
| ·SGT1在植物抗病反应中的作用 | 第14-15页 |
| ·SGT1基因结构及在抗病反应中的作用 | 第14页 |
| ·SGT1在抗病反应中的作用机制 | 第14-15页 |
| ·RAR1在植物抗病反应中的作用 | 第15-16页 |
| ·RAR1基因结构及在抗病反应中的作用 | 第15-16页 |
| ·RAR1在抗病反应中的作用机制 | 第16页 |
| ·SGT1与RAR1在植物抗病反应中的互作 | 第16-17页 |
| ·研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-28页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌株和质粒 | 第18页 |
| ·试剂与酶 | 第18-19页 |
| ·所用引物及其序列 | 第19页 |
| ·番木瓜SGT1、RAR1基因的克隆 | 第19-21页 |
| ·番木瓜叶片总RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第20页 |
| ·利用PCR扩增SGT1、RAR1基因全长 | 第20页 |
| ·目的片段AT克隆 | 第20-21页 |
| ·转化大肠杆菌及阳性克隆的筛选 | 第21页 |
| ·植物表达载体pBI121-SGT1-RAR1的构建 | 第21-23页 |
| ·重组表达载体pBI121-SGT1-RAR1工程农杆菌的构建 | 第23页 |
| ·花滴法转化拟南芥 | 第23-24页 |
| ·T1代转基因拟南芥的抗性筛选及PCR检测 | 第24页 |
| ·T1代转基因拟南芥的形态学差异分析 | 第24-25页 |
| ·T2代转基因拟南芥的抗性分析 | 第25-26页 |
| ·渗透胁迫的抗性分析 | 第25页 |
| ·抗氧化胁迫分析 | 第25页 |
| ·抗核盘菌分析 | 第25-26页 |
| ·T2代转基因拟南芥相关抗性基因的表达分析 | 第26-28页 |
| ·荧光实时定量PCR引物的设计 | 第26页 |
| ·拟南芥叶片RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第26页 |
| ·荧光定量PCR | 第26-27页 |
| ·荧光定量PCR结果分析 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-38页 |
| ·番木瓜SGT1、RAR1基因的克隆 | 第28-29页 |
| ·SGT1编码蛋白保守结构域分析 | 第28-29页 |
| ·RAR1编码蛋白保守结构域分析 | 第29页 |
| ·转基因pBI121-SGT1-RAR1拟南芥的获得 | 第29页 |
| ·超表达载体pBI121-SGT1-RAR1的构建 | 第29页 |
| ·T1代转基因pBI121-SGT1-RAR1拟南芥的获得 | 第29页 |
| ·T2代转基因拟南芥的形态学差异分析 | 第29-30页 |
| ·T2代转基因拟南芥的抗性分析 | 第30-35页 |
| ·渗透胁迫的抗性分析 | 第30-34页 |
| ·抗氧化胁迫分析 | 第34页 |
| ·抗核盘菌分析 | 第34-35页 |
| ·T2代转基因拟南芥相关抗性基因的表达分析 | 第35-38页 |
| 4 讨论 | 第38-43页 |
| ·番木瓜SGT1与RAR1基因的克隆及表达分析 | 第38-39页 |
| ·T2代转基因拟南芥的抗性分析 | 第39-41页 |
| ·T2代转基因拟南芥相关抗性基因的表达分析 | 第41-42页 |
| ·下一步工作及展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 附录1 常用溶液和培养基的配制 | 第50-51页 |
| 附录2 植物总RNA的提取 | 第51-52页 |
| 附录3 cDNA第一链的合成 | 第52页 |
| 附录4 胶回收DNA片段 | 第52-53页 |
| 附录5 乙醇沉淀(纯化) | 第53页 |
| 附录6 大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备及目的质粒的转化 | 第53-54页 |
| 附录7 质粒小量提取 | 第54-55页 |
| 附录8 农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第55页 |
| 附录9 冻融法转化GV3101感受态细胞 | 第55页 |
| 附录10 转基因拟南芥T1代种子的抗性筛选 | 第55-56页 |
| 附录11 拟南芥叶片DNA的提取 | 第56页 |
| 附录12 番木瓜SGTl基因序列 | 第56-57页 |
| 附录13 番木瓜RAR1基因序列 | 第57-58页 |
| 图版与说明 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
