| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一部分：文献综述 | 第13-45页 |
| 第一章 哺乳动物卵子减数分裂调控的分子机制 | 第13-27页 |
| ·第一次减数分裂双线期的阻滞与恢复 | 第14-19页 |
| ·双线期的阻滞 | 第14-17页 |
| ·双线期阻滞的恢复 | 第17-19页 |
| ·M-I 期的阻滞与恢复 | 第19-21页 |
| ·SAC | 第19-21页 |
| ·Mos/MAPK 通路 | 第21页 |
| ·ROS | 第21页 |
| ·M-II 期的阻滞与退出 | 第21-24页 |
| ·CSF | 第21页 |
| ·Cyclin B 的动态平衡系统 | 第21-22页 |
| ·APC/C 介导的蛋白酶体降解系统 | 第22-23页 |
| ·Mos/MEK/MAPK 通路 | 第23-24页 |
| ·纺锤体组装系统 | 第24页 |
| ·ROS | 第24页 |
| ·减数分裂细胞周期阻滞在M-III 期 | 第24-27页 |
| 第二章 细胞周期抑制蛋白P21 的研究进展 | 第27-45页 |
| ·P21 蛋白的发现与命名 | 第28页 |
| ·P21 蛋白质的结构 | 第28-29页 |
| ·P21 的生物学功能 | 第29-33页 |
| ·P21 在细胞周期调控中的作用 | 第29-31页 |
| ·P21 在细胞凋亡中的作用 | 第31-32页 |
| ·P21 在DNA 损伤修复中的作用 | 第32页 |
| ·P21 在细胞衰老和老化中的作用 | 第32-33页 |
| ·P21 在iPS 细胞重编程中的作用 | 第33页 |
| ·P21 的表达调控 | 第33-42页 |
| ·P21 的转录调控 | 第33-37页 |
| ·p21 m RNA 转录后的调控 | 第37-40页 |
| ·P21 蛋白翻译后的调控 | 第40-42页 |
| ·P21 在卵子成熟过程中作用的研究进展 | 第42-45页 |
| ·P21 在卵母细胞成熟与胚胎发育过程中的表达研究进展 | 第42页 |
| ·P21 在卵子成熟过程中作用的研究进展 | 第42-45页 |
| 第二部分：试验研究 | 第45-86页 |
| 第三章 牛卵母细胞体外成熟减数分裂核进程的研究 | 第45-59页 |
| ·材料和方法 | 第45-49页 |
| ·仪器设备 | 第45-46页 |
| ·主要试剂及培养液的配制 | 第46页 |
| ·试验材料 | 第46页 |
| ·牛卵母细胞的收集 | 第46-47页 |
| ·牛卵母细胞的体外成熟培养 | 第47页 |
| ·颗粒细胞的原代培养及饲养层的制备 | 第47页 |
| ·牛卵母细胞的孤雌激活及体外培养 | 第47页 |
| ·牛卵母细胞地衣红染色 | 第47-48页 |
| ·牛卵母细胞GV 期到M-II 期核进程的时间分析 | 第48页 |
| ·牛卵母细胞孤雌激活后减数分裂到有丝分裂核进程的时间分析 | 第48页 |
| ·卵母细胞染色体扩散方法 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-56页 |
| ·牛卵GV 期到M-II 期染色体形态学变化的观察 | 第49-52页 |
| ·牛卵GV 期到M-II 期核进程的时间分析 | 第52-53页 |
| ·牛卵减数分裂到有丝分裂转换过程中染色体形态学观察 | 第53-54页 |
| ·不同的化学激活剂对第二极体的排出和原核形成的影响 | 第54-55页 |
| ·牛卵减数分裂到有丝分裂转换期间核进程的时间分析 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第四章 p21 基因的克隆及其真核表达载体构建 | 第59-71页 |
| ·材料与方法 | 第59-62页 |
| ·仪器设备 | 第59-60页 |
| ·材料和试剂 | 第60页 |
| ·PCR 扩增p21 基因及序列鉴定 | 第60-61页 |
| ·P21 真核表达载体构建 | 第61页 |
| ·pVenus-P21 转染Hela 细胞 | 第61-62页 |
| ·RT-PCR 鉴定pVenus-P21 在Hela 细胞表达情况 | 第62页 |
| ·体外转录及cRNA 显微注射 | 第62页 |
| ·结果与分析 | 第62-69页 |
| ·牛p21 基因扩增及序列分析 | 第62-63页 |
| ·pVenus-P21 真核表达载体鉴定 | 第63-64页 |
| ·荧光显微镜观察重组质粒pVenus-P21 在Hela 细胞中的表达与定位 | 第64-65页 |
| 4 2.4 RT-PCR 鉴定重组质粒pVenus-P21 的表达 | 第65页 |
| ·体外转录产物分析 | 第65-67页 |
| ·荧光显微镜下观察P21-Venus 融合蛋白在牛卵内的表达及定位 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 第五章 P21 蛋白在牛卵成熟过程中作用的初步研究 | 第71-86页 |
| ·材料与方法 | 第71-74页 |
| ·仪器设备 | 第71-72页 |
| ·材料和试剂 | 第72页 |
| ·牛卵母细胞的体外成熟及胚胎培养 | 第72页 |
| ·不同组织中p21 m RNA 定量表达检测 | 第72-73页 |
| ·牛卵体外成熟与胚胎发育不同阶段p21 m RNA 定量表达检测 | 第73页 |
| ·牛卵母细胞体外成熟各时期P21 蛋白免疫荧光染色 | 第73页 |
| ·GV 期超表达与干扰P21 | 第73-74页 |
| ·M-II 期超表达与干扰P21 | 第74页 |
| ·数据统计 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-82页 |
| ·在m RNA 水平上检测不同组织中p21 的表达 | 第74-75页 |
| ·在m RNA 水平定量分析牛卵体外成熟与胚胎发育不同时期p21 的表达 | 第75-76页 |
| ·在m RNA 水平定量分析牛卵体外成熟不同时期几个基因的表达 | 第76-78页 |
| ·牛卵母细胞P21 蛋白免疫荧光染色检测 | 第78-79页 |
| ·P21 对牛卵进入M-I 的影响 | 第79-81页 |
| ·P21 对牛卵M-II 退出的影响 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-85页 |
| ·小结 | 第85-86页 |
| 结论 | 第86页 |
| 本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-99页 |
| 缩略词 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 作者简介 | 第102页 |
