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哈氏噬纤维菌CHU0344蛋白和CHU0099蛋白的生物学功能研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
縮略词第12-13页
第一章 前言第13-22页
   ·研究纤维素降解的意义第13页
   ·纤维素的结构特征第13-15页
   ·降解纤维素的微生物第15-16页
     ·降解纤维素的真菌第15页
     ·降解纤维素的细菌第15-16页
     ·降解纤维素的放线菌第16页
   ·纤维素的生物降解机制第16-19页
     ·游离的纤维素酶系协同降解机制第16-17页
     ·厌氧细菌的降解机制——纤维小体第17-18页
     ·第三种纤维素降解机制第18-19页
   ·哈氏噬纤维菌的研究背景第19-20页
   ·细胞复苏促进因子第20-21页
   ·本论文主要工作第21-22页
第二章 CHU_0344融合蛋白的表达和天然蛋白纯化第22-37页
   ·材料与方法第22-29页
     ·菌株及质粒第22页
     ·主要试剂和工具酶第22-23页
     ·主要仪器第23页
     ·培养基第23页
     ·C.hutchinsonii的培养第23-24页
     ·C.hutchinsonii的胞外分泌蛋白的提取第24页
     ·C.hutchinsonii的周质空间蛋白的提取第24页
     ·CHU_0344蛋白的质谱鉴定第24-25页
     ·CHU_0344蛋白的序列分析第25页
     ·CHU_0344融合蛋白的表达及纯化第25-28页
     ·CHU_0344天然蛋白的纯化第28-29页
   ·实验结果第29-36页
     ·C.hutchinsonii的胞外分泌蛋白的提取第29页
     ·C.hutchinsonii的周质空间蛋白的提取第29-30页
     ·CHU_0344蛋白的序列分析第30-32页
     ·CHU_0344融合蛋白表达载体的构建第32-34页
     ·CHU_0344融合蛋白的纯化第34页
     ·CHU_0344天然蛋白的纯化第34-36页
   ·本章小结第36-37页
第三章 CHU_0344蛋白的生物学功能研究第37-58页
   ·材料与方法第37-46页
     ·菌株及质粒第37页
     ·主要试剂和工具酶第37页
     ·主要仪器第37页
     ·培养基第37页
     ·蛋白质的分离和纯化第37页
     ·CHU_0344蛋白多克隆抗体的制备第37-38页
     ·Western blot第38页
     ·CHU_0344蛋白在哈氏噬纤维菌上的定位实验第38-39页
     ·CHU_0344蛋白对纤维素粉结合能力的测定第39页
     ·CHU_0344蛋白的非还原SDS-PAGE检测和Native-PAGE检测第39-40页
     ·利用HPLC对CHU_0344天然蛋白分子量的检测第40-41页
     ·CHU_0344天然蛋白可能结合核酸的猜测第41页
     ·CHU_0344蛋白自由巯基的测定第41-42页
     ·CHU_0344蛋白的醌蛋白脱氢酶的酶活测定第42-44页
     ·CHU_0344 mutant生长曲线及平板单菌落个数统计第44-45页
     ·CHU_0344 mutant在贫瘠培养基上运动能力的变化检测第45-46页
   ·实验结果第46-57页
     ·CHU_0344蛋白多克隆抗体的制备检测第46页
     ·CHU_0344蛋白在哈氏噬纤维菌上的定位实验第46-47页
     ·CHU_0344蛋白对纤维素粉结合能力的测定第47-48页
     ·CHU_0344蛋白的非还原SDS-PAGE检测和Native-PAGE检测第48-49页
     ·利用HPLC对CHU_0344天然蛋白分子量的检测第49-50页
     ·CHU_0344天然蛋白可能结合核酸的猜测第50-52页
     ·CHU_0344蛋白自由巯基的测定第52-53页
     ·CHU_0344蛋白的醌蛋白脱氢酶的酶活测定第53-54页
     ·CHU_0344 mutant生长曲线及平板单菌落个数统计第54-56页
     ·CHU_0344 mutant在贫瘠培养基上运动能力的变化检测第56-57页
   ·本章小结第57-58页
第四章 CHU_0099蛋白的表达纯化和生物学功能研究第58-76页
   ·材料与方法第58-63页
     ·菌株及质粒第58页
     ·主要试剂和工具酶第58页
     ·主要仪器第58页
     ·培养基第58页
     ·CHU0099蛋白的序列分析_第58页
     ·CHU_0099融合蛋白的表达及纯化第58页
     ·CHU_0099敲除菌株的构建第58-61页
     ·C.hutchinsonii中CHU_0099基因过表达菌株的构建第61-62页
     ·CHU_0099 mutant生长曲线的测定第62页
     ·CHU_0099 mutant和过表达菌株不同稀释浓度下单菌落个数统计第62-63页
     ·CHU_0099 mutant在PY2平板上单菌落扩散能力的变化检测第63页
     ·CHU_0099蛋白对C.hutchinsonii衰老细胞复苏能力的检测第63页
     ·CHU_0099蛋白对CHU_0099 mutant衰老细胞复苏能力的检测第63页
   ·实验结果第63-75页
     ·CHU_0099蛋白序列的生物信息学分析第64-66页
     ·CHU_0099融合蛋白的表达及纯化第66-67页
     ·CHU_0099敲除菌株的构建第67-68页
     ·C.hutchinsonii中CHU_0099基因过表达菌株的构建第68页
     ·CHU_0099 mutant生长曲线的测定第68-69页
     ·CHU_0099 mutant和过表达菌株不同稀释浓度下单菌落个数统计第69-70页
     ·CHU_0099 mutant在PY2平板上单菌落扩散能力的检测第70-71页
     ·CHU_0099蛋白对C.hutchinsonii野生型和CHU_0099 mutant衰老细胞复苏能力的检测第71-75页
   ·本章小结第75-76页
全文总结第76-78页
参考文献第78-83页
致谢第83-84页
学位论文评阅及答辩情况表第84页

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