| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 縮略语 | 第10-11页 |
| 绪论 | 第11-35页 |
| ·生物湿法冶金技术简介 | 第11-12页 |
| ·浸矿微生物简介 | 第12-13页 |
| ·浸矿微生物 | 第12页 |
| ·嗜酸性喜温硫杆菌在生物浸出中的作用 | 第12-13页 |
| ·嗜酸性喜温硫杆菌的生理特性 | 第13页 |
| ·嗜酸性喜温硫杆菌遗传操作体系的研究进展 | 第13-20页 |
| ·克隆载体的研究 | 第13-17页 |
| ·基因转移方法的研究 | 第17-19页 |
| ·基因敲除方法的研究 | 第19-20页 |
| ·细菌基因敲除策略的研究进展 | 第20-28页 |
| ·Rec重组技术 | 第21-24页 |
| ·RecET重组技术 | 第24-25页 |
| ·Red重组技术 | 第25-28页 |
| ·嗜酸性喜温硫杆菌硫氧化途径的研究简介 | 第28-34页 |
| ·本论文的研究内容 | 第34-35页 |
| 第二章 嗜酸性喜温硫杆菌基因无痕敲除方法的建立及硫氧化相关基因soxYZ(ORF2520-2521)的敲除 | 第35-67页 |
| ·引言 | 第35-37页 |
| ·材料和方法 | 第37-47页 |
| ·菌株和质粒 | 第37-38页 |
| ·培养基和培养条件 | 第38-40页 |
| ·试剂和仪器 | 第40-41页 |
| ·分子生物学相关操作技术 | 第41-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-66页 |
| ·含有I-SceI酶切位点的自杀型质粒载体pSDUDI的构建 | 第47-51页 |
| ·同源重组的自杀型质粒pSDUDI-△soxYZ(ORF2520-2521)的构建 | 第51-53页 |
| ·单交换子的筛选和验证 | 第53-55页 |
| ·大范围核酸内切酶I-SceI表达质粒pSDU1-I-SceI的构建 | 第55-57页 |
| ·敲除子的筛选和验证 | 第57-63页 |
| ·讨论 | 第63-66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| 第三章 A.caldus硫氧化相关基因soxYZ(ORF2520-2521)敲除株的性状初步分析 | 第67-79页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·材料和方法 | 第67-71页 |
| ·菌株 | 第67-68页 |
| ·培养基和培养条件 | 第68页 |
| ·分子操作相关酶及试剂盒 | 第68页 |
| ·仪器 | 第68页 |
| ·分子生物学相关操作 | 第68-70页 |
| ·A caldus生长曲线测定 | 第70-71页 |
| ·结果与讨论 | 第71-78页 |
| ·Sox硫氧化基因簇的基因结构及相对应蛋白的序列比对结果 | 第71-72页 |
| ·SoxYZ(Sox clusterⅡ)与上下游基因共转录分析 | 第72-74页 |
| ·野生株和soxYZ(Sox clusterⅡ)敲除株以硫粉为硫源时生长比较 | 第74-75页 |
| ·野生株和soxYZ(Sox clusterⅡ)敲除株以连四硫酸钾为硫源时生长比较 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·本章小结 | 第78-79页 |
| 全文总结与展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读学位期间学术成果 | 第87-88页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第88页 |