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嗜酸性喜温硫杆菌基因无痕敲除方法的建立及soxYZ敲除株的性状分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
縮略语第10-11页
绪论第11-35页
   ·生物湿法冶金技术简介第11-12页
   ·浸矿微生物简介第12-13页
     ·浸矿微生物第12页
     ·嗜酸性喜温硫杆菌在生物浸出中的作用第12-13页
   ·嗜酸性喜温硫杆菌的生理特性第13页
   ·嗜酸性喜温硫杆菌遗传操作体系的研究进展第13-20页
     ·克隆载体的研究第13-17页
     ·基因转移方法的研究第17-19页
     ·基因敲除方法的研究第19-20页
   ·细菌基因敲除策略的研究进展第20-28页
     ·Rec重组技术第21-24页
     ·RecET重组技术第24-25页
     ·Red重组技术第25-28页
   ·嗜酸性喜温硫杆菌硫氧化途径的研究简介第28-34页
   ·本论文的研究内容第34-35页
第二章 嗜酸性喜温硫杆菌基因无痕敲除方法的建立及硫氧化相关基因soxYZ(ORF2520-2521)的敲除第35-67页
   ·引言第35-37页
   ·材料和方法第37-47页
     ·菌株和质粒第37-38页
     ·培养基和培养条件第38-40页
     ·试剂和仪器第40-41页
     ·分子生物学相关操作技术第41-47页
   ·结果与讨论第47-66页
     ·含有I-SceI酶切位点的自杀型质粒载体pSDUDI的构建第47-51页
     ·同源重组的自杀型质粒pSDUDI-△soxYZ(ORF2520-2521)的构建第51-53页
     ·单交换子的筛选和验证第53-55页
     ·大范围核酸内切酶I-SceI表达质粒pSDU1-I-SceI的构建第55-57页
     ·敲除子的筛选和验证第57-63页
     ·讨论第63-66页
   ·本章小结第66-67页
第三章 A.caldus硫氧化相关基因soxYZ(ORF2520-2521)敲除株的性状初步分析第67-79页
   ·引言第67页
   ·材料和方法第67-71页
     ·菌株第67-68页
     ·培养基和培养条件第68页
     ·分子操作相关酶及试剂盒第68页
     ·仪器第68页
     ·分子生物学相关操作第68-70页
     ·A caldus生长曲线测定第70-71页
   ·结果与讨论第71-78页
     ·Sox硫氧化基因簇的基因结构及相对应蛋白的序列比对结果第71-72页
     ·SoxYZ(Sox clusterⅡ)与上下游基因共转录分析第72-74页
     ·野生株和soxYZ(Sox clusterⅡ)敲除株以硫粉为硫源时生长比较第74-75页
     ·野生株和soxYZ(Sox clusterⅡ)敲除株以连四硫酸钾为硫源时生长比较第75-77页
     ·讨论第77-78页
   ·本章小结第78-79页
全文总结与展望第79-81页
参考文献第81-86页
致谢第86-87页
攻读学位期间学术成果第87-88页
学位论文评阅及答辩情况表第88页

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