抗对虾白斑综合症病毒特异性卵黄抗体的制备及其保护作用的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩写词 | 第8-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 1 对虾白斑综合症和卵黄抗体的研究进展 | 第14-46页 |
| ·对虾白斑综合症病毒(WSSV) | 第14-23页 |
| ·WSSV命名 | 第14页 |
| ·WSSV的宿主范围 | 第14-15页 |
| ·对虾白斑综合症病症及组织病理学 | 第15页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的形态特征及可能的感染过程 | 第15-16页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的分子生物学研究现状 | 第16-17页 |
| ·对虾白斑综合症病毒结构蛋白的研究 | 第17-18页 |
| ·对虾的WSSV的诊断和检测方法 | 第18-19页 |
| ·对虾的免疫机制及虾病的防治概况 | 第19-23页 |
| ·IgY的研究进展 | 第23-34页 |
| ·IgY的结构及功能 | 第24-25页 |
| ·IgY的性质 | 第25-26页 |
| ·IgY分离纯化方法的研究进展 | 第26-27页 |
| ·DNA免疫的IgY的研究进展 | 第27-28页 |
| ·IgY的作用机理 | 第28-31页 |
| ·IgY应用的研究进展 | 第31-33页 |
| ·问题与展望 | 第33-34页 |
| ·本论文的研究意义和主要工作 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-46页 |
| 2 DNA疫苗的构建及其免疫原性的检测 | 第46-74页 |
| ·前言 | 第46页 |
| ·实验材料与设备 | 第46-48页 |
| ·仪器 | 第46-47页 |
| ·病毒、菌种、细胞及质粒 | 第47页 |
| ·主要试剂与酶 | 第47页 |
| ·溶液配制 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-58页 |
| ·WSSV病毒的分离及其基因组DNA的提取 | 第48-49页 |
| ·引物的合成 | 第49-53页 |
| ·目的基因的钓取 | 第53-54页 |
| ·目的基因在pMD-T载体中的克隆 | 第54-55页 |
| ·pGEX-6p-1原核表达载体的构建 | 第55-56页 |
| ·pCI真核表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·Western Blotting检测 | 第57页 |
| ·间接免疫荧光法检测 | 第57-58页 |
| ·实验结果与分析 | 第58-69页 |
| ·WSSV病毒透射电镜分析 | 第58页 |
| ·WSSV病毒基因的PCR鉴定及测序结果 | 第58-59页 |
| ·目的基因的钓取 | 第59-61页 |
| ·pMD18-T重组质粒的构建及鉴定 | 第61-63页 |
| ·表达载体重组质粒的酶切鉴定 | 第63-66页 |
| ·重组质粒测序结果 | 第66页 |
| ·pGEX-6p-1重组质粒在原核细胞中的表达 | 第66-68页 |
| ·pCI重组质粒在真核细胞中的表达 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 3 制备抗WSSV特异性卵黄抗体 | 第74-97页 |
| ·前言 | 第74-75页 |
| ·实验材料及设备 | 第75-77页 |
| ·仪器 | 第75页 |
| ·实验动物 | 第75页 |
| ·病毒 | 第75页 |
| ·主要试剂 | 第75-76页 |
| ·溶液配制 | 第76-77页 |
| ·实验方法 | 第77-83页 |
| ·CpG ODNs佐剂的设计与合成 | 第77-78页 |
| ·抗原的制备 | 第78页 |
| ·蛋鸡的免疫 | 第78-79页 |
| ·IgY的分离、纯化 | 第79-81页 |
| ·分离纯化各阶段IgY的变化 | 第81-82页 |
| ·间接ELISA法检测特异性IgY抗体效价 | 第82页 |
| ·IgY含量的测定 | 第82-83页 |
| ·结果分析 | 第83-91页 |
| ·CpG ODNs佐剂的作用 | 第83-84页 |
| ·不同抗原对抗体活性的影响 | 第84-85页 |
| ·抗体活性随免疫时间的变化 | 第85-87页 |
| ·IgY的SDS-PAGE | 第87-88页 |
| ·IgY蛋白粉及卵黄粉的形态 | 第88页 |
| ·IgY含量的测定 | 第88-91页 |
| ·讨论 | 第91-93页 |
| ·小结 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 4 实验动物体内攻毒保护实验 | 第97-112页 |
| ·前言 | 第97页 |
| ·实验材料及设备 | 第97-99页 |
| ·试剂 | 第97-98页 |
| ·仪器 | 第98页 |
| ·溶液配置 | 第98页 |
| ·实验动物 | 第98-99页 |
| ·病毒 | 第99页 |
| ·实验方法 | 第99-100页 |
| ·投喂饲料的制备 | 第99页 |
| ·IgY含量的测定 | 第99-100页 |
| ·中和实验 | 第100页 |
| ·口服实验 | 第100页 |
| ·浸泡实验 | 第100页 |
| ·结果分析 | 第100-106页 |
| ·投喂饲料的制备 | 第100-101页 |
| ·饲料IgY含量的测定 | 第101-102页 |
| ·IgY对WSSV的中和效果 | 第102-104页 |
| ·口服保护效果 | 第104-106页 |
| ·浸泡保护效果 | 第106页 |
| ·讨论 | 第106-109页 |
| ·小结 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-112页 |
| 5 结论与展望 | 第112-114页 |
| ·结论 | 第112页 |
| ·展望 | 第112-114页 |
| 创新点摘要 | 第114-115页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 作者简介 | 第118-119页 |
