| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-26页 |
| 1 开发可再生资源的必要性及其来源 | 第11-12页 |
| 2 世界生物柴油的发展现状 | 第12-15页 |
| ·世界生物柴油发展态势 | 第12-13页 |
| ·生物柴油的研究及应用现状 | 第13-14页 |
| ·生物柴油的发展前景 | 第14-15页 |
| 3 木本油料植物小桐子 | 第15-18页 |
| ·生态习性及分布 | 第16页 |
| ·小桐子制取生物柴油的特点及优势 | 第16-17页 |
| ·小桐子生物柴油产业化的发展及瓶颈问题 | 第17-18页 |
| 4 植物油脂生物合成及甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT) | 第18-23页 |
| ·植物油脂生物合成 | 第18-21页 |
| ·关于 GPAT 的研究进展 | 第21-23页 |
| 5 研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 6 主要研究内容及技术路线 | 第24-26页 |
| ·主要研究内容 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 小桐子甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)的克隆与序列分析 | 第26-60页 |
| 1 实验材料 | 第26页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·试剂和酶 | 第26页 |
| ·引物合成与测序 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-38页 |
| ·实验相关溶液的配制 | 第26-28页 |
| ·小桐子基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·总RNA提取及质量检测 | 第29-30页 |
| ·反转录合成cDNA | 第30-31页 |
| ·JcGPAT1的克隆 | 第31-34页 |
| ·JcGPAT2的克隆 | 第34-38页 |
| ·小桐子 GPAT 的序列分析 | 第38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-58页 |
| ·小桐子JcGPAT1全长cDNA序列的克隆 | 第38-40页 |
| ·小桐子JcGPAT2全长cDNA序列的克隆 | 第40-43页 |
| ·JcGPAT1的序列分析 | 第43-50页 |
| ·JcGPAT2的序列分析 | 第50-58页 |
| 4 小结与讨论 | 第58-60页 |
| 第三章 小桐子甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)的表达模式研究 | 第60-69页 |
| 1 实验材料 | 第60-61页 |
| ·植物材料 | 第60页 |
| ·试剂和酶 | 第60页 |
| ·引物合成与测序 | 第60-61页 |
| 2 实验方法 | 第61-65页 |
| ·实验相关溶液的配制 | 第61页 |
| ·荧光定量PCR分析JcGPAT1的表达模式 | 第61-63页 |
| ·半定量RT-PCR分析JcGPAT2的表达模式 | 第63-65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-68页 |
| ·小桐子JcGPAT1的表达模式分析 | 第65-67页 |
| ·小桐子JcGPAT2的表达分析 | 第67-68页 |
| 4 小结与讨论 | 第68-69页 |
| 第四章 酵母表达载体的构建及在酿酒酵母中的表达 | 第69-87页 |
| 1 实验材料 | 第69页 |
| ·菌株 | 第69页 |
| ·试剂和酶 | 第69页 |
| ·引物合成与测序 | 第69页 |
| 2 实验方法 | 第69-79页 |
| ·实验相关溶液的配制 | 第69-71页 |
| ·酵母表达载体的构建及酿酒酵母遗传转化 | 第71-75页 |
| ·转基因酿酒酵母转录水平的检测 | 第75-78页 |
| ·转基因酿酒酵母生长曲线测定 | 第78页 |
| ·转基因酿酒酵母油脂百分含量测定 | 第78-79页 |
| 3 结果与分析 | 第79-86页 |
| ·JcGPAT1、JcGPAT2的扩增 | 第79页 |
| ·JcGPAT1、JcGPAT2酿酒酵母表达载体构建 | 第79-81页 |
| ·JcGPAT1、JcGPAT2在酿酒酵母中的表达分析 | 第81-83页 |
| ·转基因酿酒酵母菌株生长曲线和油脂百分含量的测定 | 第83-86页 |
| 4 小结与讨论 | 第86-87页 |
| 第五章 植物表达载体的构建 | 第87-98页 |
| 1 实验材料 | 第87页 |
| ·菌株 | 第87页 |
| ·酶和试剂 | 第87页 |
| ·引物合成与测序 | 第87页 |
| 2 实验方法 | 第87-92页 |
| ·种子特异性表达载体pCAMBIA-Napin-Nos的构建 | 第87-89页 |
| ·构建的 JcGPAT1、JcGPAT2 种子特异性表达载体 | 第89-91页 |
| ·重组植物表达载体对农杆菌菌株的转化 | 第91-92页 |
| 3 结果与分析 | 第92-97页 |
| ·种子特异性表达载体的构建 | 第92-95页 |
| ·JcGPAT1/JcGPAT2种子特异性表达载体的构建 | 第95-96页 |
| ·根癌农杆菌的转化及检测 | 第96-97页 |
| 4 小结与讨论 | 第97-98页 |
| 第六章 总结与展望 | 第98-101页 |
| 1 主要工作总结 | 第98-99页 |
| 2 工作展望 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-108页 |
| 课题资助及论文发表情况 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
