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中国野生葡萄再生体系研究及抗病相关基因(VpGLOX、VpPR17、VpHSF1)的克隆与功能分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
第一章 文献综述第15-23页
   ·葡萄的离体培养第15-16页
   ·葡萄的再生第16-18页
   ·植物的抗病性第18页
   ·乙二醛氧化酶基因相关研究第18-19页
   ·植物病程相关蛋白相关研究第19页
   ·植物热激转录因子的相关研究第19-21页
   ·本研究的目的和意义第21-23页
第二章 中国野生华东葡萄‘白河-35-1’茎尖培养体系的研究第23-31页
   ·材料与方法第23-25页
     ·无菌培养体系的建立第23页
     ·不同的激素处理对组培苗增殖的影响第23-24页
     ·MS 中不同无机盐浓度对组培苗生长及生根的影响第24页
     ·不同种生长素(IAA、IBA、NAA)对组培苗生长及生根的影响第24页
     ·不同的蔗糖浓度对组培苗生长及生根的影响第24页
     ·不同接种材料对组培苗生根及生长的影响第24页
     ·加入活性炭(Vc)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)对组培苗生长及生根的影响第24-25页
   ·结果与分析第25-29页
     ·不同取材时间及室内培养的材料对无菌培养体系建立的影响第25页
     ·不同浓度 BAP 对初代培养芽萌动及生长的影响第25页
     ·不同的激素处理对组培苗增殖的影响第25-26页
     ·MS 中不同无机盐浓度对组培养苗生根及生长的影响第26-27页
     ·不同类型生长素(IAA、IBA、NAA)对组培苗生长及生根的影响第27-28页
     ·不同的蔗糖浓度对组培苗生长及生根的影响第28页
     ·接种不同材料对组培苗生根及生长的影响第28页
     ·加入活性炭(AC)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)对组培苗生根及生长的影响第28-29页
     ·‘白河-35-1’茎尖培养体系建立第29页
   ·讨论第29-31页
第三章 中国华东葡萄‘白河-35-1’器官再生体系的研究第31-39页
   ·试验材料第31页
     ·材料第31页
     ·主要试剂第31页
     ·主要仪器第31页
   ·试验方法第31-33页
     ·外植体的接种方法第31页
     ·外植体的培养方法第31-32页
     ·不同外植体类型对再生的影响第32页
     ·不同基本培养基对叶片再生的影响第32页
     ·不同分裂素种类及浓度对叶片再生的影响第32页
     ·不同生长素对叶片再生的影响第32页
     ·不同的前期培养的外植体对再生的影响第32页
     ·不定芽生根诱导及移栽第32-33页
     ·叶状结构的石蜡切片制作及观察第33页
     ·结果调查与统计分析第33页
   ·结果与分析第33-37页
     ·外植体接种后形态变化第33页
     ·不同外植体类型对叶片再生的影响第33-34页
     ·不同基本培养基对叶片再生的影响第34页
     ·不同分裂素种类及浓度对叶片再生的影响第34-35页
     ·不同生长素对叶片再生的影响第35-36页
     ·不同的前期培养的外植体对再生的影响第36-37页
     ·叶状结构的石蜡切片观察第37页
   ·讨论第37-39页
第四章 中国野生葡萄胚状体途径再生研究第39-46页
   ·试验材料第39页
   ·主要试剂及仪器第39页
   ·试验方法第39-41页
     ·取材时间第39-40页
     ·外植体处理第40页
     ·愈伤组织的诱导第40页
     ·MSC 培养基中不同基本培养基对白河-35-2、宁强-6 雄蕊胚状体诱导的影响第40页
     ·MSC 培养基中不同凝固剂对‘白河-35-2’、‘宁强-6’雄蕊胚状体诱导的影响第40页
     ·体细胞胚的诱导第40-41页
     ·体细胞胚的萌发和成苗第41页
   ·结果与分析第41-44页
     ·不同种葡萄愈伤诱导率及胚状体诱导率差异第41-43页
     ·MSC 培养基中不同基本培养基对‘白河-35-2’、‘宁强-6’雄蕊胚状体诱导的影响第43-44页
     ·不同凝固剂对‘白河-35-2’、‘宁强-6’雄蕊胚状体诱导的影响第44页
   ·讨论第44-46页
第五章 中国野生葡萄‘白河-35-1’乙二醛氧化酶基因 VpGLOX 功能分析第46-63页
   ·材料与方法第46-51页
     ·材料第46-47页
     ·实验方法第47-51页
   ·结果与分析第51-61页
     ·干扰载体的构建第51-53页
     ·植物表达载体的构建第53-55页
     ·葡萄白粉菌接种后抗病和感病品种中 VpGLOX 的表达量变化情况第55页
     ·VpGLOX 转基因烟草的产生第55-57页
     ·VpGLOX 在烟草中过量表达增强了烟草疫病的抗性第57-58页
     ·VpGLOX 在烟草中过量表达对烟草叶片乙二醛氧化酶活性的影响第58-59页
     ·过量表达 VpGLOX 烟草干扰后对 VpGLOX 的表达影响第59-61页
 5. 3 讨论第61-63页
     ·葡萄接种白粉病后抗病和感病品种中 VpGLOX 表达的差异第61页
     ·在烟草中过量 VpGLOX 对植物抗病性的影响第61-62页
     ·关于 VpGLOX 的功能第62-63页
第六章 中国野生华东葡萄病程相关新基因 VpPR17 的克隆与功能分析第63-88页
   ·材料与方法第63-69页
     ·材料第63-64页
     ·试验方法第64-69页
   ·结果与分析第69-88页
     ·VpPR17 cDNA 全长序列的 PCR 扩增第69页
     ·VpPR17 编码蛋白的物理化学性质分析第69-77页
     ·原核表达载体以及植物表达载体的构建第77-81页
     ·VpPR17 亚细胞定位第81-82页
     ·接种后葡萄白粉菌抗病和感病品种中 VpPR17 的表达量变化情况第82-83页
     ·VpPR17 原核表达载体及表达产物的抑菌活性第83-85页
     ·‘白河-35-1’离体叶片 VpPR17 瞬时转化对霜霉病菌丝发生的影响第85页
     ·讨论第85-88页
第七章 中国野生华东葡萄热激转录因子 VpHsf1 的克隆与功能分析第88-102页
   ·材料与方法第88-91页
     ·材料第88-89页
     ·试验方法第89-91页
   ·结果与分析第91-100页
     ·VpHsf1 全长序列的克隆及序列分析第91-95页
     ·VpHsf1 核定位功能分析第95页
     ·VpHsf1 在葡萄热激、干旱处理以及病原菌诱导前后的表达分析第95-97页
     ·VpHsf1 转基因烟草的产生第97页
     ·VpHsf1 降低了烟草的耐热性但增加了烟草的获得耐热性第97-99页
     ·VpHsf1 在烟草中的过量表增加了烟草黑胫病的敏感性第99页
     ·VpHsf1 对烟草渗透胁迫的影响第99-100页
   ·讨论第100-102页
第八章 结论第102-104页
参考文献第104-114页
致谢第114-115页
作者简介第115页

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