| 目录 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-8页 |
| 英文摘要 | 第8-11页 |
| 1． 引言 | 第11-13页 |
| 2． 材料与仪器设备 | 第13-14页 |
| 2．1 噬菌体、细菌和酵母菌株 | 第13页 |
| 2．2 主要试剂 | 第13页 |
| 2．3 主要仪器与设备 | 第13-14页 |
| 3． 方法 | 第14-19页 |
| 3．1 金属螯合树脂金属离子的去除 | 第14页 |
| 3．2 随机肽库的生物淘洗与噬菌体克隆鉴定 | 第14-16页 |
| 3．2．1 随机肽库的梯度生物淘洗 | 第14页 |
| 3．2．2 随机肽库的区段生物淘洗 | 第14-15页 |
| 3．2．3 噬菌体单克隆 DNA序列的测定 | 第15页 |
| 3．2．4 噬菌体单克隆对金属离子结合能力的测定 | 第15页 |
| 3．2．5 12×His重组展示噬菌体的构建 | 第15-16页 |
| 3．2．6 噬菌体单克隆的 Western blotting检测 | 第16页 |
| 3．3 重组展示酵母的构建 | 第16-17页 |
| 3．4 重组酵母肽展示的鉴定 | 第17-18页 |
| 3．4．1 重组酵母展示肽的菌体 ELISA检测 | 第17-18页 |
| 3．4．2 重组酵母的 DTT处理与肽展示测定 | 第18页 |
| 3．5 展示酵母对金属的吸附试验 | 第18页 |
| 3．5．1 重金属处理下展示酵母生长曲线的制作 | 第18页 |
| 3．5．2 展示酵母对金属的吸附试验 | 第18页 |
| 3．6 金属离子的测定 | 第18-19页 |
| 4． 结果 | 第19-29页 |
| 4．1 分段筛选和梯度洗脱对噬菌体肽库淘洗的影响 | 第19-22页 |
| 4．1．1 不同浓度 ID洗脱对各轮各区段噬菌体 P/N值的影响 | 第19页 |
| 4．1．2 洗脱浓度对噬菌体克隆数的影响 | 第19页 |
| 4．1．3 各区段噬菌体在各 ID洗脱浓度下的相对富集 | 第19-20页 |
| 4．1．4 分段筛选噬菌体克隆的挑选、DNA测序和 P/N值测定 | 第20-22页 |
| 4．2 金属螯合树脂的噬菌体肽库直接淘洗和克隆鉴定 | 第22-24页 |
| 4．2．1 金属螯合树脂的噬菌体肽库直接淘洗和筛选 | 第22页 |
| 4．2．2 噬菌体克隆的挑选和DNA测序 | 第22-23页 |
| 4．2．3 高His含量噬菌体对6×His单抗的反应性 | 第23-24页 |
| 4．3 重组质粒的构建和酵母细胞表面展示 | 第24-26页 |
| 4．3．1 酵母重组质粒的构建和鉴定 | 第24-26页 |
| 4．3．2 诱导时间对酵母总蛋白含量的影响 | 第26页 |
| 4．3．3 重组酵母的细胞表面展示鉴定 | 第26页 |
| 4．3．4 诱导时间对酵母外源肽展示的影响 | 第26页 |
| 4．4 展示酵母对金属的结合试验 | 第26-29页 |
| 4．4．1 不同金属处理对展示酵母生长曲线的影响 | 第26-28页 |
| 4．4．2 不同金属离子和浓度对 E/7H和 E/Rd生物吸附的影响 | 第28页 |
| 4．4．3 展示酵母对Cd~(2+)和 Ni~(2+)的生物吸附作用 | 第28-29页 |
| 5． 讨论 | 第29-32页 |
| 6． 初步结论 | 第32-33页 |
| 7． 存在的问题和解决的途径 | 第33-35页 |
| 8． 参考文献 | 第35-39页 |
| 附录一 专业词汇和中英文对照 | 第39-41页 |
| 附录二 博士后期间完成的论文 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42页 |
