| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-39页 |
| ·畜禽种质资源的现状与保存 | 第16-19页 |
| ·国内外畜禽种质资源概况 | 第16-18页 |
| ·畜禽种质资源保存技术 | 第18-19页 |
| ·鸡的基因组研究 | 第19-24页 |
| ·物理图谱 | 第20-21页 |
| ·遗传连锁图谱 | 第21-22页 |
| ·物理图谱和遗传连锁图谱的综合 | 第22页 |
| ·表达序列标签 | 第22页 |
| ·比较基因组 | 第22-24页 |
| ·细菌人工染色体(BAC)研究现状 | 第24-34页 |
| ·基因组文库概述 | 第24-25页 |
| ·BAC 的构建和发展 | 第25-30页 |
| ·BAC 基因组文库的应用 | 第30-34页 |
| ·BAC 文库的参数 | 第34页 |
| ·北京油鸡肉质风味基因研究现状 | 第34-38页 |
| ·北京油鸡ATIC 基因的研究进展 | 第34-36页 |
| ·北京油鸡L-FABP 基因的研究进展 | 第36-38页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第38-39页 |
| 第二章 北京油鸡细菌人工染色体文库的构建和鉴定 | 第39-59页 |
| ·实验材料 | 第39-42页 |
| ·主要药品和酶 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39-40页 |
| ·常规溶液及试剂配制 | 第40页 |
| ·实验动物 | 第40页 |
| ·菌株与克隆载体 | 第40页 |
| ·文库构建试剂 | 第40-42页 |
| ·实验方法 | 第42-49页 |
| ·基因组大片段制备 | 第42-44页 |
| ·BAC 质粒载体的制备 | 第44-47页 |
| ·电击感受态细胞的制备(DHl0B) | 第47页 |
| ·基因组DNA 和载体DNA 的连接 | 第47-48页 |
| ·电转化 | 第48页 |
| ·文库的保存管理 | 第48页 |
| ·文库插入片段长度的鉴定 | 第48-49页 |
| ·实验结果 | 第49-54页 |
| ·基因组大片段制备 | 第49-52页 |
| ·BAC 载体的制备 | 第52-53页 |
| ·连接与转化 | 第53页 |
| ·北京油鸡BAC 文库的鉴定 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-59页 |
| ·高分子量DNA 的制备技术 | 第55-56页 |
| ·BAC 载体制备技术 | 第56-57页 |
| ·载体与高分子量DNA 的连接 | 第57-58页 |
| ·电激转化技术 | 第58页 |
| ·BAC 文库的鉴定 | 第58-59页 |
| 第三章 北京油鸡和阿勒泰羊转基因靶细胞的制备与检测 | 第59-77页 |
| ·材料 | 第59-60页 |
| ·实验动物 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要溶液配制 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60-65页 |
| ·细胞培养 | 第60-61页 |
| ·细胞生物学特性检测 | 第61-64页 |
| ·脂质体介导荧光蛋白转染靶细胞 | 第64-65页 |
| ·实验结果 | 第65-75页 |
| ·北京油鸡和阿勒泰羊转基因靶细胞系的制备 | 第65-66页 |
| ·北京油鸡和阿勒泰羊转基因靶细胞系质量的检测 | 第66-72页 |
| ·脂质体介导荧光蛋白转染靶细胞 | 第72-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| ·细胞培养方法 | 第75页 |
| ·核型分析 | 第75页 |
| ·同工酶分析 | 第75-76页 |
| ·外源基因在细胞中的表达 | 第76-77页 |
| 第四章 北京油鸡ATIC 和L-FABP 基因的研究 | 第77-96页 |
| ·材料 | 第77-78页 |
| ·实验动物 | 第77页 |
| ·质粒与菌株 | 第77页 |
| ·主要试剂及配置 | 第77-78页 |
| ·实验方法 | 第78-83页 |
| ·总RNA 的抽提 | 第78-79页 |
| ·RT-PCR 扩增cDNA | 第79页 |
| ·L-FABP 目的片段的获取 | 第79页 |
| ·北京油鸡ATIC 基因在体内的表达研究 | 第79页 |
| ·目的基因的克隆 | 第79-81页 |
| ·北京油鸡ATIC 基因和L-FABP 基因真核表达载体的构建 | 第81页 |
| ·脂质体介导外源基因转染靶细胞 | 第81-82页 |
| ·G418 筛选抗性细胞 | 第82页 |
| ·克隆化阳性细胞株中荧光蛋白基因和目的基因的检测 | 第82页 |
| ·Western blot 检测靶细胞中重组蛋白的表达 | 第82-83页 |
| ·结果 | 第83-93页 |
| ·不同组织、器官总RNA 的提取 | 第83-84页 |
| ·北京油鸡ATIC 基因体内表达情况和L-FABP 基因片段的获取 | 第84-85页 |
| ·北京油鸡ATIC 和L-FABP 基因序列分析 | 第85-86页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第86-87页 |
| ·ATIC 基因和L-FABP 基因在靶细胞中的表达 | 第87-89页 |
| ·ATIC 基因和L-FABP 基因在靶细胞中的定位 | 第89-92页 |
| ·克隆化细胞株的筛选及鉴定 | 第92-93页 |
| ·Western blot 检测成靶细胞中重组融合蛋白的表达 | 第93页 |
| ·讨论 | 第93-96页 |
| ·ATIC 基因和L-FABP 基因 | 第93-94页 |
| ·影响转染的各种因素 | 第94页 |
| ·亚细胞定位 | 第94-95页 |
| ·阳性细胞株的建立与筛选 | 第95-96页 |
| 结论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-109页 |
| 附录 | 第109-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 作者简介 | 第115-116页 |
