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鹿茸间充质细胞全长cDNA文库的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 引言第11-19页
   ·鹿与鹿茸概述第11-14页
     ·鹿第11-12页
     ·鹿茸第12-14页
   ·鹿茸的研究进展第14-17页
     ·发生、再生机理方面第14-15页
     ·化学成分方面第15-17页
   ·研究的目的和意义第17-18页
   ·研究的内容和方法第18-19页
第二章 RNA 的提取和文库的构建第19-34页
   ·材料第19-22页
     ·试验材料第19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要仪器第19-20页
     ·主要溶液的配制第20-22页
   ·方法第22-30页
     ·细胞培养第22-24页
       ·鹿茸间质区的选、取、消化第22-23页
       ·鹿茸间质区的细胞的培养第23-24页
     ·RNA 的提取第24-25页
       ·细胞的裂解第24页
       ·水相分离第24页
       ·沉淀RNA第24页
       ·洗涤RNA第24页
       ·重溶RNA第24页
       ·检测RNA第24-25页
     ·全长cDNA 文库的构建第25-30页
       ·反转录合成第一链第25-26页
       ·LD-PCR 合成第二链第26页
       ·蛋白酶K 消化第26页
       ·sfiⅠ酶切消化第26-27页
       ·cDNA 片段的分级分离第27-28页
       ·cDNA 与载体连接第28页
       ·体外包装第28页
       ·初级文库库容的测定第28-29页
       ·初级文库的扩增第29页
       ·文库的PCR 鉴定第29-30页
   ·结果第30-34页
     ·RNA 结果第30-31页
     ·cDNA 结果第31页
     ·柱层析分级分离大片断cDNA 结果第31-32页
     ·文库库容测定结果第32-33页
     ·文库的检测PCR 检测第33-34页
第三章 讨论第34-39页
   ·构建 cDNA 文库的优势第34页
   ·cDNA 文库的应用前景第34-35页
     ·筛选与性状相关的重要基因第34-35页
     ·为表达序列标签(EST)的开发提供材料第35页
     ·为微卫星引物的开发提供平台第35页
     ·结合 DNA 芯片技术对生物体的基因表达进行研究第35页
   ·全长 cDNA 文库的构建策略第35-37页
   ·提高RNA 代表性和完整性的措施第37-38页
     ·严格防止RNase 污染,并设法抑制其活性第37页
     ·保证RNA 的产量和纯度第37-38页
     ·直接以活体细胞为材料第38页
   ·结论第38-39页
第四章 全文结论第39-40页
   ·建立了鹿茸间充质细胞培养体系第39页
   ·鹿茸间充质细胞RNA 的提取和全长文库的构建第39-40页
参考文献第40-45页
致谢第45-46页
作者简历第46页

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