| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-19页 |
| ·鹿与鹿茸概述 | 第11-14页 |
| ·鹿 | 第11-12页 |
| ·鹿茸 | 第12-14页 |
| ·鹿茸的研究进展 | 第14-17页 |
| ·发生、再生机理方面 | 第14-15页 |
| ·化学成分方面 | 第15-17页 |
| ·研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| ·研究的内容和方法 | 第18-19页 |
| 第二章 RNA 的提取和文库的构建 | 第19-34页 |
| ·材料 | 第19-22页 |
| ·试验材料 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| ·主要溶液的配制 | 第20-22页 |
| ·方法 | 第22-30页 |
| ·细胞培养 | 第22-24页 |
| ·鹿茸间质区的选、取、消化 | 第22-23页 |
| ·鹿茸间质区的细胞的培养 | 第23-24页 |
| ·RNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·细胞的裂解 | 第24页 |
| ·水相分离 | 第24页 |
| ·沉淀RNA | 第24页 |
| ·洗涤RNA | 第24页 |
| ·重溶RNA | 第24页 |
| ·检测RNA | 第24-25页 |
| ·全长cDNA 文库的构建 | 第25-30页 |
| ·反转录合成第一链 | 第25-26页 |
| ·LD-PCR 合成第二链 | 第26页 |
| ·蛋白酶K 消化 | 第26页 |
| ·sfiⅠ酶切消化 | 第26-27页 |
| ·cDNA 片段的分级分离 | 第27-28页 |
| ·cDNA 与载体连接 | 第28页 |
| ·体外包装 | 第28页 |
| ·初级文库库容的测定 | 第28-29页 |
| ·初级文库的扩增 | 第29页 |
| ·文库的PCR 鉴定 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-34页 |
| ·RNA 结果 | 第30-31页 |
| ·cDNA 结果 | 第31页 |
| ·柱层析分级分离大片断cDNA 结果 | 第31-32页 |
| ·文库库容测定结果 | 第32-33页 |
| ·文库的检测PCR 检测 | 第33-34页 |
| 第三章 讨论 | 第34-39页 |
| ·构建 cDNA 文库的优势 | 第34页 |
| ·cDNA 文库的应用前景 | 第34-35页 |
| ·筛选与性状相关的重要基因 | 第34-35页 |
| ·为表达序列标签(EST)的开发提供材料 | 第35页 |
| ·为微卫星引物的开发提供平台 | 第35页 |
| ·结合 DNA 芯片技术对生物体的基因表达进行研究 | 第35页 |
| ·全长 cDNA 文库的构建策略 | 第35-37页 |
| ·提高RNA 代表性和完整性的措施 | 第37-38页 |
| ·严格防止RNase 污染,并设法抑制其活性 | 第37页 |
| ·保证RNA 的产量和纯度 | 第37-38页 |
| ·直接以活体细胞为材料 | 第38页 |
| ·结论 | 第38-39页 |
| 第四章 全文结论 | 第39-40页 |
| ·建立了鹿茸间充质细胞培养体系 | 第39页 |
| ·鹿茸间充质细胞RNA 的提取和全长文库的构建 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简历 | 第46页 |