| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-43页 |
| 1 黄曲条跳甲及其生活史 | 第17-19页 |
| ·黄曲条跳甲及其生活史 | 第17-18页 |
| ·黄曲条跳甲的防治 | 第18-19页 |
| 2 精氨酸激酶及其基因 | 第19-22页 |
| ·精氨酸激酶 | 第19-21页 |
| ·精氨酸激酶基因 | 第21-22页 |
| 3 昆虫触角的化学感受蛋白 | 第22-27页 |
| ·气味结合蛋白 | 第22-24页 |
| ·气味受体 | 第24-26页 |
| ·气味降解酶 | 第26-27页 |
| 4 本项目使用的研究技术 | 第27-35页 |
| ·RNA干扰技术及其进展 | 第27-30页 |
| ·RNA干涉(RNA Interference,RNAi) | 第27-28页 |
| ·RNA干涉研究进展 | 第28-30页 |
| ·cDNA末端快速扩增技术研究进展 | 第30-35页 |
| ·RACE技术的原理 | 第31-32页 |
| ·RACE技术存在的问题与改良 | 第32-35页 |
| ·反转录反应 | 第33页 |
| ·加尾反应 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-43页 |
| 第二章 黄曲条跳甲精氨酸激酶基因的克隆与序列分析 | 第43-63页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第43-44页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·菌种 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| 2 试验方法 | 第44-51页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第44-45页 |
| ·连接反应产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第45页 |
| ·PCR鉴定目的基因及测序 | 第45页 |
| ·黄曲条跳甲mRNA的提取 | 第45-47页 |
| ·总RNA提取步骤 | 第45-46页 |
| ·mRNA的获取 | 第46-47页 |
| ·5′-RACE获得目的基因的5′-端 | 第47-49页 |
| ·引物设计与合成 | 第47页 |
| ·5′-RACE-Ready cDNA的合成 | 第47-48页 |
| ·5′-RACE的PCR | 第48-49页 |
| ·3′-RACE获得目的基因的3′-端 | 第49-50页 |
| ·引物设计与合成 | 第49页 |
| ·3′-RACE-Ready cDNA的合成 | 第49页 |
| ·3′-RACE的PCR | 第49-50页 |
| ·PsAK氨基酸序列比对及进化树的构建 | 第50页 |
| ·PsAK三维结构的构建与模拟 | 第50-51页 |
| ·常用的生物信息分析的相关软件及网站 | 第51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-59页 |
| ·PsAK基因全长cDNA的克隆与序列分析 | 第51-52页 |
| ·PsAK基因氨基酸序列比较与分析 | 第52-59页 |
| 4 讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 第三章 RNA干扰PsAK基因防治黄曲条跳甲 | 第63-81页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第64-65页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·菌种 | 第64页 |
| ·试剂 | 第64-65页 |
| ·主要仪器 | 第65页 |
| 2 试验方法 | 第65-70页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第65页 |
| ·连接反应产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第65页 |
| ·PCR鉴定目的基因及测序 | 第65-66页 |
| ·dsRNA的构建 | 第66-68页 |
| ·RNAi与生物分析 | 第68页 |
| ·RT-PCR分析 | 第68-70页 |
| ·精氨酸激酶酶活分析 | 第70页 |
| 3 结果与分析 | 第70-76页 |
| ·dsRNA的构建 | 第70页 |
| ·RNAi喂饲实验分析 | 第70-73页 |
| ·RT-PCR与精氨酸激酶酶活性分析 | 第73-76页 |
| 4 讨论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 第四章 黄曲条跳甲嗅觉受体基因的克隆及组织特异性表达 | 第81-100页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第82-83页 |
| ·材料 | 第82页 |
| ·菌种 | 第82页 |
| ·试剂 | 第82-83页 |
| ·主要仪器 | 第83页 |
| 2 试验方法 | 第83-88页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第83页 |
| ·连接反应产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第83页 |
| ·PCR鉴定目的基因及测序 | 第83页 |
| ·黄曲条跳甲触角mRNA的提取 | 第83-84页 |
| ·材料的获取 | 第83页 |
| ·总RNA提取步骤 | 第83页 |
| ·mRNA的获取 | 第83-84页 |
| ·RT-PCR获得目的基因的保守区域 | 第84-85页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第84页 |
| ·目的基因保守区域的RT-PCR | 第84-85页 |
| ·3′-RACE获得目的基因的5′-端 | 第85-86页 |
| ·引物设计与合成 | 第85页 |
| ·3′-RACE-Ready cDNA的合成 | 第85页 |
| ·3′-RACE的PCR | 第85-86页 |
| ·5′-RACE获得目的基因的5′-端 | 第86-87页 |
| ·引物设计与合成 | 第86页 |
| ·5′-RACE-Ready cDNA的合成 | 第86页 |
| ·5′-RACE的PCR | 第86-87页 |
| ·基因表达谱的半定量RT-PCR分析 | 第87页 |
| ·PsOrl氨基酸序列比对及进化树的构建 | 第87-88页 |
| ·常用的生物信息分析的相关软件及网站 | 第88页 |
| 3 结果与分析 | 第88-96页 |
| ·PsOrl基因全长cDNA的克隆与序列分析 | 第88-90页 |
| ·结构预测与模拟 | 第90-91页 |
| ·PsOrl基因氨基酸序列比较与分析 | 第91-94页 |
| ·比对与进化关系 | 第94-95页 |
| ·基因表达谱 | 第95-96页 |
| 4 讨论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-100页 |
| 第五章 RNAi沉默嗅觉受体损害黄曲条跳甲气味识别能力及对寄主植物的选择性行为 | 第100-117页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第100-102页 |
| ·材料 | 第101页 |
| ·菌种 | 第101页 |
| ·试剂 | 第101页 |
| ·主要仪器 | 第101-102页 |
| 2 试验方法 | 第102-105页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第102页 |
| ·连接反应产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第102页 |
| ·PCR鉴定目的基因及测序 | 第102页 |
| ·dsRNA的构建 | 第102-103页 |
| ·微显微注射跳甲的蛹 | 第103-104页 |
| ·化学趋向行为反应实验 | 第104页 |
| ·跳甲成虫对寄主植物的选择性行为 | 第104页 |
| ·RT-PCR分析 | 第104-105页 |
| 3 结果与分析 | 第105-113页 |
| ·dsRNA的构建 | 第105-106页 |
| ·化学趋向行为反应 | 第106-109页 |
| ·Psorl转录沉默效应的RT-PCR | 第109-110页 |
| ·黄曲条跳甲成虫对寄主植物的选择性行为 | 第110-113页 |
| 4 讨论 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
