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减毒沙门氏菌运载共表达质粒Stat3-siRNA与Endostatin对小鼠肝细胞原位癌模型的治疗作用及机理探讨

前言第1-6页
中文摘要第6-9页
Abstract第9-17页
引言第17-19页
第1章 文献回顾第19-51页
   ·肝癌的发生发展以及治疗进展第19-33页
     ·肝癌概述第19页
     ·肝癌的病因及发病机制第19-23页
     ·肝癌的信号传导通路第23-28页
     ·肝癌的治疗第28-33页
   ·细菌作为基因治疗载体的应用现状第33-38页
     ·细菌作为基因治疗载体的应用第34-35页
     ·细菌特异性靶向肿瘤的机制分析第35页
     ·细菌性载体基因转染的机制第35-36页
     ·沙门氏菌作为基因治疗载体的应用第36-37页
     ·沙门氏菌临床前与临床相关研究第37页
     ·沙门氏菌 phoP/phoQ 菌株的应用进展第37-38页
   ·STAT3 基因功能与应用概述第38-47页
     ·Stat3 的信号转导过程第38-39页
     ·Stat3 促肿瘤发生发展的机制第39-45页
     ·靶向 Stat3 的肿瘤治疗第45-47页
   ·ENDOTATIN 基因功能与应用概述第47-51页
     ·Endostatin 的生物学功能第47-48页
     ·应用 Endostatin 的肿瘤治疗研究第48-51页
第2章 材料和方法第51-73页
   ·实验材料和设备第51-56页
     ·实验材料第51-55页
     ·主要仪器与设备第55-56页
   ·实验方法第56-73页
     ·肝原位移植瘤模型的建立第56-57页
     ·减毒沙门氏菌携带各个重组质粒治疗第57-58页
     ·铺板法检测菌群分布第58页
     ·肿瘤细胞悬液的制备第58页
     ·肿瘤细胞细胞周期检测第58页
     ·流式细胞术检测肿瘤细胞早期凋亡(Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒)第58-59页
     ·TUNEL 法原位检测肿瘤细胞晚期凋亡第59-60页
     ·RT-PCR 和 real-time RT-PCR 方法检测肿瘤组织中 mRNA 的表达第60-63页
     ·Western blot 方法检测蛋白表达第63-65页
     ·免疫组化原位检测肿瘤组织蛋白的表达第65-66页
     ·小鼠脾细胞悬液制备第66页
     ·流式细胞仪检测脾脏中免疫细胞(NK 和 T 淋巴细胞)的表达水平第66-67页
     ·流式细胞仪检测脾脏中 CD4+CD25+Treg细胞中 Foxp3 的表达水平第67-68页
     ·检测小鼠脾脏指数第68页
     ·ConA 诱导的脾脏 T 淋巴细胞增殖反应能力的测定第68页
     ·NK 细胞杀伤活性的检测第68-69页
     ·ELISA 检测 Endostatin 和细胞因子(IFN-γ、TGF-β1 和 TNF-α)的水平第69-72页
     ·结果处理及统计学分析第72-73页
第3章 实验结果第73-89页
   ·减毒沙门氏菌使用剂量的优化和靶向性检测第73-75页
     ·沙门氏菌使用剂量的优化第73-74页
     ·沙门氏菌靶向性检测第74-75页
   ·联合基因治疗后肿瘤组织中靶基因的表达以及对荷瘤小鼠的影响第75-77页
     ·联合基因治疗对肝原位肿瘤的治疗效果第75-76页
     ·肿瘤组织中靶基因(Stat3 与 Endostatin)的表达情况第76-77页
   ·联合基因治疗抑瘤作用的机制研究第77-82页
     ·各组肿瘤组织 HE 染色的对比第77-78页
     ·各组肿瘤细胞增殖和凋亡的检测第78-80页
     ·各组肿瘤细胞细胞周期的检测第80页
     ·各组肿瘤组织中新生血管的检测第80-82页
   ·联合基因治疗对小鼠抗肿瘤免疫的影响第82-89页
     ·各组肿瘤组织中 T 淋巴细胞的浸润第82-83页
     ·各组脾指数分析第83-84页
     ·各组小鼠脾脏中 NK 细胞功能和数量变化第84-85页
     ·各组小鼠脾脏中 T 淋巴细胞的数量变化和细胞活性第85-86页
     ·各组小鼠脾脏中 Treg细胞的数量变化第86-87页
     ·各组小鼠血清中 IFN-γ和 TNF-α的含量第87-88页
     ·各组小鼠血清中 TGF-β的含量第88-89页
第4章 讨论第89-97页
第5章 结论第97-99页
参考文献第99-125页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第125-127页
致谢第127页

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