| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-25页 |
| ·多杀菌素的历史 | 第9页 |
| ·多杀菌素的产生菌 | 第9-10页 |
| ·多杀菌素的化学结构 | 第10-12页 |
| ·多杀菌素的理化性质 | 第12-13页 |
| ·多杀菌素的生物活性 | 第13-16页 |
| ·多杀菌素的作用机理 | 第13-14页 |
| ·多杀菌素的活性谱 | 第14-15页 |
| ·多杀菌素的毒性 | 第15-16页 |
| ·多杀菌素的生物合成 | 第16-20页 |
| ·多杀菌素的生物合成基因 | 第16-18页 |
| ·多杀菌素的生物合成途径 | 第18-20页 |
| ·多杀菌素的育种 | 第20-22页 |
| ·常规育种 | 第20-21页 |
| ·经典诱变育种 | 第20-21页 |
| ·原生质体育种 | 第21页 |
| ·定向筛选育种 | 第21页 |
| ·分子育种 | 第21-22页 |
| ·基因组重排育种 | 第22-24页 |
| ·基因组重排简介 | 第22-23页 |
| ·基因组重排方法 | 第23-24页 |
| ·基因组重排应用 | 第24页 |
| ·目的和意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-34页 |
| ·材料 | 第25-29页 |
| ·供试菌株 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·斜面培养基 | 第25页 |
| ·种子培养基 | 第25页 |
| ·发酵培养基 | 第25页 |
| ·原生质体制备培养基 | 第25页 |
| ·原生质体再生培养基 | 第25-26页 |
| ·培养条件 | 第26-27页 |
| ·斜面菌种培养条件 | 第26页 |
| ·种子培养条件 | 第26页 |
| ·发酵培养条件 | 第26-27页 |
| ·原生质体制备培养条件 | 第27页 |
| ·原生质体再生培养条件 | 第27页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第27-28页 |
| ·试验中所用到的主要药品和试剂 | 第27-28页 |
| ·试验中所用到的主要试验仪器 | 第28页 |
| ·重要溶液和缓冲液 | 第28-29页 |
| ·微量元素液 | 第28页 |
| ·P缓冲液 | 第28页 |
| ·溶菌酶溶液 | 第28页 |
| ·Tris-HCL缓冲液 | 第28-29页 |
| ·结晶紫染液 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-34页 |
| ·分析方法 | 第29-30页 |
| ·初筛(TLC法) | 第29页 |
| ·复筛(HPLC法) | 第29页 |
| ·菌丝体干重(DCW)的测定 | 第29页 |
| ·pH值的测定 | 第29页 |
| ·正突变率的计算 | 第29-30页 |
| ·致死率的计算 | 第30页 |
| ·诱变处理方法 | 第30-31页 |
| ·微波诱变 | 第30页 |
| ·亚硝酸诱变 | 第30-31页 |
| ·菌落形态不同与产素关系分析 | 第31页 |
| ·原生质体的制备、计数、再生和融合 | 第31-32页 |
| ·制备方法 | 第31页 |
| ·原生质体的计数方法 | 第31-32页 |
| ·原生质体融合的方法 | 第32页 |
| ·融合率的计算 | 第32页 |
| ·基因组重排(Genome shuffling)的方法 | 第32-34页 |
| ·第1轮原生质体融合 | 第32-33页 |
| ·杂合再生子代菌丝体的培养 | 第33页 |
| ·杂合子代的原生质体制备和融合 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-52页 |
| ·原生质体制备 | 第34-40页 |
| ·菌龄对原生质体制备的影响 | 第34-35页 |
| ·菌丝体培养方式对原生质体制备的影响 | 第35-36页 |
| ·菌丝体培养基组分对原生质体制备的影响 | 第36-37页 |
| ·甘氨酸浓度对原生质体制备的影响 | 第36页 |
| ·培养基中蔗糖浓度对原生质体制备的影响 | 第36-37页 |
| ·溶菌酶浓度对原生质体制备的影响 | 第37-38页 |
| ·酶解时间对原生质体制备的影响 | 第38-39页 |
| ·酶解温度对原生质体制备的影响 | 第39-40页 |
| ·原生质体再生 | 第40-42页 |
| ·P缓冲液中缓冲剂对原生质体再生率的影响 | 第40页 |
| ·再生培养基组分对原生质体再生率的影响 | 第40-41页 |
| ·—70℃对原生质体存活率的影响 | 第41-42页 |
| ·原生质体融合 | 第42-43页 |
| ·40%PEG分子量对融合率的影响 | 第42页 |
| ·不同浓度PEG1000对融合率的影响 | 第42-43页 |
| ·原生质体诱变 | 第43-44页 |
| ·亚硝酸(HNO_2)诱变处理 | 第43-44页 |
| ·微波诱变处理 | 第44页 |
| ·菌株抗性与产素的相互关系 | 第44-46页 |
| ·链霉素(Streptomycin)抗性菌株选育 | 第44-46页 |
| ·庆大霉素(Gentamicin)抗性菌株选育 | 第46页 |
| ·抗性菌株的遗传稳定性 | 第46页 |
| ·菌落形态不同与产素关系分析 | 第46-47页 |
| ·基因组重排育种 | 第47-51页 |
| ·出发菌株的选择 | 第47-48页 |
| ·菌株效价与融合轮数的关系 | 第48-49页 |
| ·重组高产菌株的选育 | 第49页 |
| ·重排高产菌株的稳定性 | 第49-51页 |
| ·诱变和筛选流程图 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |