| 中文摘要一 | 第1-4页 |
| Abstract Ⅰ | 第4-6页 |
| 中文摘要二 | 第6-7页 |
| Abstract Ⅱ | 第7-11页 |
| 图表目录 | 第11-12页 |
| 主要符号表 | 第12-13页 |
| 第一部分 猪CD8a基因的克隆表达及多克隆抗体的制备 | 第13-45页 |
| 文献综述 | 第13-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 1 材料与方法 | 第19-25页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·质粒和菌株 | 第19页 |
| ·工具酶和试剂 | 第19页 |
| ·实验溶液的配制 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19-20页 |
| ·猪CD8a基因cDNA的提取 | 第20-21页 |
| ·猪CD8a基因的克隆 | 第21-22页 |
| ·猪CD8a基因原核表达质粒的构建 | 第22-23页 |
| ·猪CD8a基因的原核表达与鉴定 | 第23页 |
| ·猪GST-CD8a融合蛋白的大量提取与纯化 | 第23-24页 |
| ·鼠抗猪CD8a多克隆抗体的制备及鉴定 | 第24-25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-36页 |
| ·猪CD8a基因的克隆与鉴定 | 第25-29页 |
| ·脾脏淋巴细胞总RNA的抽提结果 | 第25页 |
| ·RT-PCR扩增猪CD8a基因 | 第25页 |
| ·猪CD8a基因RT-PCR产物的单酶切鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的菌液PCR鉴定 | 第26页 |
| ·重组质粒插入片段的序列测定 | 第26-28页 |
| ·猪CD8a的蛋白功能区的分析与比较 | 第28-29页 |
| ·猪CD8a基因的原核表达与鉴定 | 第29-32页 |
| ·猪CD8a基因PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·原核表达重组质粒的构建和鉴定 | 第30-31页 |
| ·SDS-PAGE检测诱导表达的融合蛋白 | 第31-32页 |
| ·融合蛋白的可溶性鉴定 | 第32页 |
| ·GST-CD8a融合蛋白的大量提取与纯化 | 第32-34页 |
| ·pGEX-4T-1-CD8a诱导表达的条件优化 | 第32-33页 |
| ·GST-CD8a融合蛋白的大量提取结果 | 第33-34页 |
| ·GST-CD8a融合蛋白的浓度测定 | 第34页 |
| ·鼠抗猪CD8a多克隆抗体效价测定及生物学活性测定 | 第34-36页 |
| ·琼脂免疫双向扩散测定结果 | 第34页 |
| ·ELISA测定多抗效价结果 | 第34-35页 |
| ·Western Blotting鉴定多抗特异性 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-41页 |
| ·研究T淋巴细胞免疫功能的意义 | 第36页 |
| ·关于猪CD8a的一级氨基酸结构的比较分析 | 第36-38页 |
| ·目标蛋白的分离及纯化 | 第38页 |
| ·影响抗体制备的因素分析 | 第38-41页 |
| 4 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 第二部分 鸽Ii链的克隆与鉴定 | 第45-70页 |
| 文献综述 | 第45-48页 |
| 引言 | 第48-50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-54页 |
| ·实验动物与质粒菌种 | 第50页 |
| ·主要工具酶及试剂 | 第50页 |
| ·主要溶液的配制 | 第50页 |
| ·实验仪器 | 第50页 |
| ·鸽Ii基因高保守区的扩增 | 第50-51页 |
| ·3′RACE扩增鸽Ii基因的3′端序列 | 第51页 |
| ·5′RACE扩增鸽Ii基因的5′端序列 | 第51-53页 |
| ·鸽Ii链全长序列的扩增 | 第53-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-61页 |
| ·鸽脾脏淋巴细胞总RNA的抽提结果 | 第54页 |
| ·鸽Ii基因高保守区的扩增 | 第54-55页 |
| ·3′RACE扩增鸽Ii基因结果 | 第55-56页 |
| ·5′RACE扩增鸽Ii基因结果 | 第56-57页 |
| ·鸽Ii链全长序列的扩增 | 第57-58页 |
| ·鸽Ii基因的序列测定分析 | 第58-59页 |
| ·鸽Ii基因氨基酸功能区分析 | 第59-60页 |
| ·鸽与其它动物Ii链氨基酸同源性分析 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-67页 |
| ·简并引物PCR技术及其在基因克隆中的应用 | 第61页 |
| ·RACE技术的优势与不足 | 第61-67页 |
| 4 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |