| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 符号说明及缩写词 | 第16-17页 |
| 第一章 研究背景综述 | 第17-39页 |
| ·微生物提高石油采收率 | 第17-22页 |
| ·石油的形成及组分 | 第17-19页 |
| ·MEOR技术的发展过程及其优势 | 第19页 |
| ·MEOR的作用机理和微生物学方法 | 第19-21页 |
| ·MEOR菌株的特点及来源 | 第21-22页 |
| ·微生物对石油烃类污染的生物修复 | 第22-26页 |
| ·烃类污染给自然界带来的危害 | 第23页 |
| ·微生物降解石油烃的机理 | 第23-25页 |
| ·烃类污染物生物修复的技术方法 | 第25页 |
| ·与石油烃降解有关的微生物 | 第25-26页 |
| ·鼠李糖脂生物表面活性剂及其在石油工业中的应用 | 第26-37页 |
| ·生物表面活性剂 | 第26-30页 |
| ·生物表面活性剂的优点 | 第27-28页 |
| ·生物表面活性剂的种类及微生物菌种来源 | 第28页 |
| ·生物表面活性剂的应用 | 第28-30页 |
| ·鼠李糖脂生物表面活性剂 | 第30-37页 |
| ·鼠李糖脂的化学结构 | 第30-31页 |
| ·鼠李糖脂的生物合成 | 第31-34页 |
| ·鼠李糖脂的生产 | 第34-35页 |
| ·鼠李糖脂的生理功能及其在石油工业中的应用 | 第35-37页 |
| ·本论文研究的目的和意义 | 第37-39页 |
| 第二章 产鼠李糖脂生物表面活性剂的兼性厌氧原油降解茵的筛选与鉴定 | 第39-51页 |
| ·材料与方法 | 第39-43页 |
| ·样品来源 | 第39页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·兼性厌氧原油降解菌株的分离筛选 | 第40-41页 |
| ·厌氧操作方法 | 第40页 |
| ·初筛 | 第40-41页 |
| ·复筛 | 第41页 |
| ·菌种鉴定 | 第41-42页 |
| ·培养特征与个体形态 | 第41页 |
| ·生理生化实验 | 第41页 |
| ·16S rDNA序列分析 | 第41-42页 |
| ·菌株MEOR性能研究 | 第42页 |
| ·原油降解 | 第42页 |
| ·原油降粘 | 第42页 |
| ·菌株作用后原油烃组分分析 | 第42页 |
| ·菌株生物表面活性代谢产物的鉴定 | 第42-43页 |
| ·TLC法糖脂定性分析 | 第42-43页 |
| ·TLC法糖定性分析 | 第43页 |
| ·Blue agar plates法定性鼠李糖脂 | 第43页 |
| ·红外光谱分析 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-49页 |
| ·兼性厌氧MEOR菌株的分离筛选 | 第43-44页 |
| ·菌株SH6的鉴定 | 第44-45页 |
| ·P.aeruginosa SH6性能研究 | 第45-47页 |
| ·P.aeruginosa SH6在葡萄糖培养基和LB培养基中的生长 | 第45-46页 |
| ·P.aeruginosa SH6在原油中的生长曲线及原油降解和降粘能力 | 第46-47页 |
| ·P.aeruginosa SH6的对原油饱合烃组分的利用 | 第47页 |
| ·P.aeruginosa SH6鼠李糖脂生物表面活性代谢产物的鉴定 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第三章 铜绿假单胞菌SH6鼠李糖脂理化性质及碳氮源对其产脂的影响 | 第51-71页 |
| ·材料与方法 | 第51-54页 |
| ·菌株 | 第51页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-54页 |
| ·鼠李糖脂代谢产物粗提样品理化性质的研究 | 第52-53页 |
| ·粗品糖脂的制备 | 第52页 |
| ·粗提糖脂样品的HPLC-MS分析 | 第52页 |
| ·临界胶束浓度(CMC)的测定 | 第52页 |
| ·鼠李糖脂稳定性研究 | 第52-53页 |
| ·鼠李糖脂粗提样品乳化性能研究 | 第53页 |
| ·碳氮源对P.aeruginosa SH6鼠李糖脂生产的影响 | 第53-54页 |
| ·培养方法 | 第53页 |
| ·菌体浓度测定 | 第53-54页 |
| ·鼠李糖脂含量的测定 | 第54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-70页 |
| ·P.aeruginosa SH6鼠李糖脂代谢产物的理化性质研究 | 第54-62页 |
| ·鼠李糖脂粗提样品的制备 | 第54页 |
| ·鼠李糖脂粗提样品组分分析 | 第54-56页 |
| ·P.aeruginosa SH6鼠李糖脂代谢产物粗提样品的理化性质的研究 | 第56-62页 |
| ·临界胶束浓度(critical micelle concentration,CMC)的测定 | 第56-57页 |
| ·鼠李糖脂对温度的稳定性 | 第57-58页 |
| ·鼠李糖脂对盐度的稳定性 | 第58-60页 |
| ·鼠李糖脂对酸碱的稳定性 | 第60页 |
| ·鼠李糖脂时间稳定性研究 | 第60-61页 |
| ·鼠李糖脂乳化性能研究 | 第61-62页 |
| ·碳、氮源对P.aeruginosa SH6鼠李糖脂产量的影响 | 第62-70页 |
| ·碳源的影响 | 第62-66页 |
| ·以甘油为碳源时鼠李糖脂发酵生产动态 | 第62-63页 |
| ·以葡萄糖为碳源时鼠李糖脂发酵生产动态 | 第63-64页 |
| ·多种单一碳源和复合碳源对鼠李糖脂产生的影响 | 第64-65页 |
| ·复合碳源中葡萄糖添加量对鼠李糖脂产生的影响 | 第65-66页 |
| ·氮源及碳氮比的影响 | 第66-68页 |
| ·碳氮源浓度的影响 | 第68-70页 |
| ·本章小结 | 第70-71页 |
| 第四章 鼠李糖基转移酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究 | 第71-90页 |
| ·材料与方法 | 第71-77页 |
| ·细菌菌株和质粒 | 第71页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第71页 |
| ·培养基 | 第71-73页 |
| ·实验方法 | 第73-77页 |
| ·基因供体菌染色体提取 | 第73页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第73-74页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第74页 |
| ·rhlAB的扩增 | 第74页 |
| ·rhlABRI的扩增 | 第74页 |
| ·重组质粒的构建 | 第74-76页 |
| ·目的基因与载体的限制性内切酶消化反应 | 第74-75页 |
| ·线状载体DNA的去磷酸化 | 第75页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第75页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第75-76页 |
| ·热激法转化 | 第76页 |
| ·转化子的验证 | 第76页 |
| ·鼠李糖基转移酶基因在大肠杆菌中的表达研究 | 第76-77页 |
| ·结果 | 第77-87页 |
| ·鼠李糖基转移酶基因rhlAB及rhlABRI的克隆与鉴定 | 第77-80页 |
| ·P.aeruginosa SH6染色体的提取 | 第77页 |
| ·鼠李糖基转移酶基因rhlAB及rhlABRI的扩增、克隆与鉴定 | 第77-80页 |
| ·引物设计 | 第77-78页 |
| ·鼠李糖基转移酶基因rhlAB及rhlABRI的克隆与鉴定 | 第78-80页 |
| ·含rhlAB的重组质粒pSAOR2的构建及E.coli的转化 | 第80-83页 |
| ·重组质粒pSAOR2的构建及转化E.coli DH5α | 第80-82页 |
| ·重组质粒pSAOR2转化E.coli SM10 | 第82-83页 |
| ·含rhlABRI的重组质粒pJDOR4的构建及E.coli的转化 | 第83-85页 |
| ·重组质粒pJDOR4的构建及转化E.coli DH5α | 第83-85页 |
| ·重组质粒pJDOR4转化E.coli SM10 | 第85页 |
| ·鼠李糖基转移酶基因在大肠杆菌中的表达研究 | 第85-87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·本章小结 | 第89-90页 |
| 第五章 鼠李糖基转移酶基因在采油微生物中的表达研究 | 第90-106页 |
| ·材料与方法 | 第90-94页 |
| ·菌株 | 第90页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第90-91页 |
| ·培养基 | 第91页 |
| ·实验方法 | 第91-94页 |
| ·受体菌的选择与菌种鉴定 | 第91页 |
| ·接合转移 | 第91-92页 |
| ·供体菌和受体菌的准备 | 第91-92页 |
| ·接合转移 | 第92页 |
| ·接合子的筛选 | 第92页 |
| ·电转化 | 第92-93页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第92页 |
| ·电转化 | 第92-93页 |
| ·接合子和转化子的筛选与鉴定 | 第93页 |
| ·重组质粒的提取 | 第93页 |
| ·重组质粒酶切验证 | 第93页 |
| ·PCR方法鉴定 | 第93页 |
| ·菌体PCR鉴定 | 第93页 |
| ·鼠李糖基转移酶基因在采油微生物中的表达研究 | 第93-94页 |
| ·结果 | 第94-104页 |
| ·受体菌选择 | 第94-96页 |
| ·鼠李糖基转移酶结构基因rhlAB在采油微生物中的表达研究 | 第96-99页 |
| ·鼠李糖基转移酶结构基因rhlAB转入采油微生物 | 第96-97页 |
| ·鼠李糖基转移酶结构基因rhlAB在采油微生物中的表达 | 第97-99页 |
| ·鼠李糖基转移酶rhlABRI操纵子在采油微生物中的表达研究 | 第99-104页 |
| ·鼠李糖基转移酶rhlABRI操纵子转入采油微生物 | 第99-102页 |
| ·鼠李糖基转移酶rhlABRI操纵子在采油微生物中的表达 | 第102-104页 |
| ·讨论 | 第104-105页 |
| ·本章小结 | 第105-106页 |
| 第六章 石蜡降解菌株的筛选、鉴定及降蜡性能的研究 | 第106-119页 |
| ·材料与方法 | 第106-109页 |
| ·样品来源与使用菌株 | 第106-107页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第107页 |
| ·培养基 | 第107页 |
| ·实验方法 | 第107-109页 |
| ·兼性厌氧石蜡降解菌株的分离筛选 | 第107-108页 |
| ·菌种鉴定 | 第108页 |
| ·菌株性能研究 | 第108-109页 |
| ·种子的准备及培养条件 | 第108页 |
| ·菌体生长测定 | 第108页 |
| ·降蜡率的测定 | 第108-109页 |
| ·菌株作用前后石蜡组分分析 | 第109页 |
| ·原油降解 | 第109页 |
| ·原油降粘 | 第109页 |
| ·结果与讨论 | 第109-118页 |
| ·兼性厌氧降蜡菌株的分离筛选及性能初步研究 | 第109-110页 |
| ·菌种鉴定 | 第110-112页 |
| ·G.amicalis LH3降蜡性能的研究 | 第112-118页 |
| ·好氧和厌氧条件下LH3的生长和对石蜡的利用 | 第112-115页 |
| ·盐度对生长及降蜡的影响 | 第115-116页 |
| ·温度对生长及降蜡情况的影响 | 第116-117页 |
| ·鼠李糖脂生物表面活性剂对生长及降蜡的影响 | 第117-118页 |
| ·G.amicalis LH3与其它MEOR菌株降蜡降油降粘效果比较 | 第118页 |
| ·本章节小结 | 第118-119页 |
| 全文总结与展望 | 第119-123页 |
| 参考文献 | 第123-136页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 附录 | 第138-162页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第162页 |
