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小麦赤霉病菌血清学检测方法建立及在品种抗病性评价中的应用

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-16页
   ·小麦赤霉病第10-14页
   ·研究目的及意义第14页
   ·研究内容及技术路线第14-16页
     ·研究内容第14-15页
     ·技术路线第15-16页
2 试验材料第16-19页
   ·供试病原菌第16页
   ·供试小麦品种第16页
   ·试剂第16-18页
     ·所用培养基第16页
     ·蛋白提取用溶液及试剂第16-17页
     ·免疫用试剂第17页
     ·多克隆抗体纯化用试剂及溶液第17页
     ·间接 ELISA 检测用试剂及溶液第17页
     ·双抗夹心法检测用试剂及溶液第17-18页
   ·主要仪器第18-19页
3 试验方法第19-23页
   ·菌丝生长曲线的测定第19页
     ·孢子悬浮液的制备第19页
     ·菌丝生长曲线的制作第19页
   ·菌丝体胞内蛋白的提取及蛋白浓度的测定第19页
   ·多克隆抗体的制备第19-20页
     ·免疫方案第19页
     ·抗血清的提取第19-20页
     ·饱和硫酸铵法提纯抗血清第20页
     ·蛋白 A 柱层析纯化抗体第20页
   ·酶标记抗体工作浓度的确定及抗血清的选择第20页
   ·抗原、抗体最适浓度的选择第20页
   ·间接 ELISA 法测定抗体特性第20-21页
     ·间接 ELISA第20-21页
     ·抗体效价的测定第21页
     ·抗体灵敏度测定第21页
     ·抗体特异性测定第21页
   ·间接 ELISA 法测定小麦样品中的赤霉菌第21-22页
     ·小麦样品(麦粉)中赤霉病原菌的测定第21页
     ·小麦单粒中赤霉菌的测定第21-22页
   ·抗体的生物素标记第22页
   ·双抗体夹心 ELISA第22-23页
4 结果与分析第23-37页
   ·赤霉病菌菌丝生长曲线第23-24页
   ·赤霉病菌免疫原和抗体的制备第24页
   ·赤霉病菌抗体的纯化第24-25页
   ·抗体的选择及抗体、酶标抗体工作浓度的确定第25-27页
     ·抗体的选择第25页
     ·抗体和酶标记抗体最适工作浓度的选择第25-27页
   ·抗体性质的测定第27-29页
     ·抗体效价的确定第27页
     ·抗体特异性第27-28页
     ·ELISA 检测灵敏度的测定第28-29页
   ·赤霉病菌定量 ELISA 方法的建立第29-30页
   ·小麦品种赤霉病的目测结果及千粒重第30-32页
     ·目测调查不同小麦品种赤霉病的发病情况第30-31页
     ·小麦品种千粒重第31-32页
   ·应用间接 ELISA 分析和测定不同小麦品种的发病情况第32-34页
     ·麦粉中赤霉菌的定性和定量检测结果第32-33页
     ·不同小麦品种籽粒中赤霉菌的检测结果第33-34页
   ·双抗夹心法对不同小麦品种的测定结果第34-37页
     ·小麦籽粒中赤霉菌的检测结果第34-35页
     ·麦粉中赤霉菌的检测结果第35-36页
     ·市售面粉中镰刀菌的检测结果第36-37页
5 讨论第37-41页
   ·赤霉菌菌丝蛋白的提取及保存第37页
   ·多克隆抗体的制备第37-39页
     ·免疫动物的选择及免疫方法第37-38页
     ·抗血清的纯化第38页
     ·抗体的标记第38-39页
   ·小麦赤霉病菌 ELISA 检测法的初步建立第39页
   ·关于 ELISA 的操作第39-41页
6 结论第41-42页
参考文献第42-47页
附录第47-49页
作者简历第49-50页
在读期间发表的学术论文第50-51页
致谢第51-52页
附录第52-57页

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