| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-31页 |
| ·植物开花调控途径 | 第11-22页 |
| ·光周期促进途径 | 第12-17页 |
| ·春化促进途径 | 第17-18页 |
| ·自主促进途径 | 第18-19页 |
| ·GA 促进途径 | 第19-20页 |
| ·成花抑制途径 | 第20-21页 |
| ·开花途径整合因子 | 第21-22页 |
| ·CO 的结构及功能 | 第22-24页 |
| ·CO 的结构 | 第22-23页 |
| ·CO 的功能 | 第23-24页 |
| ·FT 的结构及功能 | 第24-26页 |
| ·FT 的结构 | 第24-25页 |
| ·FT 的功能 | 第25-26页 |
| ·CO /FT 调节元件 | 第26页 |
| ·开花物质 | 第26-28页 |
| ·开花物质假说 | 第26-27页 |
| ·开花刺激物质的分离 | 第27-28页 |
| ·菊花基因工程育种 | 第28-30页 |
| ·改变菊花形态的基因工程 | 第28页 |
| ·改变菊花花色的基因工程 | 第28-29页 |
| ·改变菊花抗性的基因工程 | 第29-30页 |
| ·改变菊花花期的基因工程 | 第30页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-50页 |
| ·试验材料 | 第31-34页 |
| ·植物材料与处理 | 第31-32页 |
| ·菌株与质粒 | 第32页 |
| ·试剂盒、酶、生化试剂及试验仪器 | 第32页 |
| ·PCR 引物 | 第32-33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·试验方法 | 第34-50页 |
| ·菊花叶片总RNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·菊花花发育CO 基因的克隆 | 第35-37页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第37页 |
| ·目的片段的回收 | 第37-38页 |
| ·连接反应 | 第38-39页 |
| ·转化 | 第39-40页 |
| ·重组子的PCR 及酶切鉴定 | 第40-42页 |
| ·测序及序列分析 | 第42-43页 |
| ·菊花短日照处理过程中CO 和FT 基因的表达分析 | 第43页 |
| ·正义表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第44-45页 |
| ·表达载体pROK3 的酶切反应及所得片段的回收 | 第45页 |
| ·连接反应 | 第45-46页 |
| ·热激法转化E.coli DH5a | 第46页 |
| ·重组质粒的筛选及菌液的保存 | 第46页 |
| ·重组质粒的鉴定方法 | 第46-47页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第47-48页 |
| ·根癌农杆菌菌落的PCR 检测 | 第48页 |
| ·外植体的准备 | 第48页 |
| ·侵染农杆菌的制备 | 第48页 |
| ·转化方法的优化 | 第48-50页 |
| ·菊花转化及植株再生 | 第50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-72页 |
| ·菊花总RNA 的提取 | 第50-51页 |
| ·菊花叶片CO 基因的克隆 | 第51-52页 |
| ·菊花叶片CO 基因中间片段的克隆 | 第51页 |
| ·菊花叶片CO 基因3′端的克隆 | 第51页 |
| ·菊花叶片CO 基因5′端的克隆 | 第51-52页 |
| ·菊花叶片CO 基因全长的克隆 | 第52页 |
| ·菊花FT 基因全长的克隆 | 第52页 |
| ·菊花叶片CO 全长基因的序列分析与功能预测 | 第52-60页 |
| ·序列开放阅读框分析 | 第52-53页 |
| ·氨基酸序列同源性比对分析 | 第53-54页 |
| ·疏水性分析 | 第54-55页 |
| ·跨膜结构预测 | 第55-57页 |
| ·卷曲螺旋预测 | 第57页 |
| ·信号肽预测 | 第57-58页 |
| ·二级结构预测 | 第58-59页 |
| ·同源性分析 | 第59-60页 |
| ·菊花FT 全长基因的序列分析与功能预测 | 第60-67页 |
| ·序列开放阅读框分析 | 第60-61页 |
| ·氨基酸序列同源性比对分析 | 第61页 |
| ·疏水性分析 | 第61-63页 |
| ·跨膜结构预测 | 第63-64页 |
| ·卷曲螺旋预测 | 第64页 |
| ·信号肽预测 | 第64-65页 |
| ·二级结构预测 | 第65-66页 |
| ·同源性分析 | 第66-67页 |
| ·CmCO 和CmFT 基因表达分析 | 第67-68页 |
| ·CmCO 和CmFT 基因在菊花不同花芽分化期表达分析 | 第67页 |
| ·CmCO 和CmFT 基因在菊花不同组织器官中的表达分析 | 第67-68页 |
| ·CmCO 正义载体的PCR 及酶切鉴定 | 第68页 |
| ·根癌农杆菌菌落的PCR 检测 | 第68-69页 |
| ·KM 选择压及Carb 抑菌浓度的确定 | 第69-71页 |
| ·菊花叶盘KM 选择压力的确定 | 第69页 |
| ·菊花生根KM 选择压力的确定 | 第69-70页 |
| ·菊花诱导愈伤组织及分化Carb 选择压力的确定 | 第70页 |
| ·Carb 抑菌浓度的确定 | 第70-71页 |
| ·转基因菊花植株的获得 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-77页 |
| ·关于菊花总RNA 的提取 | 第72页 |
| ·RT-PCR 反应条件的优化 | 第72-73页 |
| ·RACE 技术在基因克隆中的作用及引物设计原则 | 第73-74页 |
| ·菊花CO 基因结构特点 | 第74页 |
| ·菊花FT 基因结构特点 | 第74页 |
| ·菊花CO 和FT 基因的表达特性分析 | 第74-75页 |
| ·关于酶切和连接 | 第75-76页 |
| ·关于标记基因的切除 | 第76页 |
| ·根癌农杆菌的转化 | 第76页 |
| ·外植体的侵染 | 第76-77页 |
| ·褐化对菊花外植体分化的影响 | 第77页 |
| 5 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第90-91页 |
| 附件 | 第91页 |
