| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 前言 | 第12-22页 |
| 1 抗菌肽简介 | 第12-13页 |
| 2 两栖类抗菌肽的研究概况 | 第13-20页 |
| ·两栖动物皮肤 | 第13页 |
| ·两栖动物抗菌肽发现和分离 | 第13-14页 |
| ·两栖类抗菌肽的种类 | 第14页 |
| ·两栖类抗菌肽的分子结构 | 第14页 |
| ·两栖类抗菌肽的生物学功能 | 第14-18页 |
| ·两栖类抗菌肽的应用 | 第18-19页 |
| ·两栖类抗菌肽的基因工程研究 | 第19-20页 |
| 3 本研究的内容和意义 | 第20-22页 |
| 第一部分 中国林蛙抗菌肽的分离纯化、结构鉴定及cDNA克隆 | 第22-46页 |
| 1 引言 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-32页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·方法 | 第24-32页 |
| ·中国林蛙皮肤分泌物的收集 | 第24-25页 |
| ·中国林蛙抗菌肽的分离纯化 | 第25页 |
| ·中国林蛙抗菌肽抑菌活性鉴定 | 第25页 |
| ·中国林蛙抗菌肽结构的鉴定 | 第25-26页 |
| ·引物的设计与合成 | 第26-27页 |
| ·中国林蛙皮肤总RNA的提取 | 第27页 |
| ·中国林蛙抗菌肽基因cDNA克隆 | 第27-28页 |
| ·PCR产物的回收 | 第28-29页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的转化 | 第30页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第31-32页 |
| ·生物信息学分析 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-44页 |
| ·中国林蛙抗菌肽的分离纯化 | 第32-33页 |
| ·中国林蛙抗菌肽抑菌活性的测定 | 第33-34页 |
| ·中国林蛙抗菌肽结构分析 | 第34-35页 |
| ·皮肤组织总RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·中国林蛙抗菌肽基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·重组克隆载体pMD-18T-CAMPs-3的PCR和酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·序列测定和生物信息学分析 | 第38-44页 |
| 4 讨论 | 第44-45页 |
| 5 小结 | 第45-46页 |
| 第二部分 抗菌肽基因原核表达载体的构建与筛选 | 第46-59页 |
| 1 引言 | 第46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-53页 |
| ·材料 | 第46-48页 |
| ·方法 | 第48-53页 |
| ·引物的设计与合成 | 第48页 |
| ·目的基因的扩增与回收 | 第48页 |
| ·chensirin-3成熟肽基因的TA克隆和序列测定 | 第48-49页 |
| ·融合表达质粒的构建 | 第49-52页 |
| ·GST-CAMP3重组蛋白的诱导表达 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-57页 |
| ·引物的设计及中国林蛙成熟肽基因chensirin-3扩增 | 第53页 |
| ·抗菌肽chensirin-3基因的T/A克隆 | 第53-55页 |
| ·原核融合蛋白表达载体的构建 | 第55-56页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 5 小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 缩略词英汉对照表 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
