| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-18页 |
| ·研究嗜热酶的意义 | 第8页 |
| ·嗜热酶的结构特点和稳定机制 | 第8-13页 |
| ·嗜热酶的结构特点 | 第8-9页 |
| ·嗜热酶的稳定机制 | 第9-13页 |
| ·酯酶的定向进化 | 第13-14页 |
| ·定向进化在酶制剂改造中的应用 | 第14-15页 |
| ·本文的研究背景和理论依据 | 第15-17页 |
| ·本研究课题的意义 | 第17-18页 |
| 2 试验材料和方法 | 第18-23页 |
| ·试验材料 | 第18-19页 |
| ·试验菌株 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·溶液配制 | 第18-19页 |
| ·试验方法 | 第19-23页 |
| ·突变体的构建 | 第19页 |
| ·目的蛋白的序列测定 | 第19页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第19-20页 |
| ·蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第20页 |
| ·酯酶活力测定 | 第20页 |
| ·突变菌体的表达和分离纯化 | 第20-22页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第22页 |
| ·pH 对酶活力的影响 | 第22页 |
| ·动力学测定 | 第22页 |
| ·不同底物的碳链长度对酶活力的影响 | 第22-23页 |
| ·荧光光谱的测定 | 第23页 |
| ·圆二色谱的测定 | 第23页 |
| ·酶的稳定性 | 第23页 |
| 3 试验结果与分析 | 第23-33页 |
| ·突变菌株的构建 | 第23-24页 |
| ·突变体酶的表达和构建 | 第24-26页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第24页 |
| ·酶的纯度分析 | 第24-25页 |
| ·APE1547 和突变体的特异性活力和相关酯酶活力 | 第25-26页 |
| ·突变体的基本酶学性质研究 | 第26-33页 |
| ·温度对野生型及突变体催化活性的影响 | 第26-27页 |
| ·pH 对酶活力的影响 | 第27页 |
| ·动力学常数测定 | 第27-28页 |
| ·不同底物的碳链长度对酶活力的影响 | 第28-29页 |
| ·野生型和突变体酶的三级结构变化 | 第29-30页 |
| ·圆二（CD）色谱 | 第30-32页 |
| ·突变体酶热稳定性 | 第32-33页 |
| 4 结果讨论 | 第33-43页 |
| ·突变菌株的构建 | 第33-36页 |
| ·突变体酶的表达和分离纯化 | 第36-37页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第36-37页 |
| ·酶的纯度分析 | 第37页 |
| ·突变体的基本酶学性质研究 | 第37-43页 |
| ·温度对野生型及突变体催化活性的影响 | 第38页 |
| ·pH 对酶的影响 | 第38页 |
| ·动力学常数测定 | 第38-39页 |
| ·不同底物的碳链长度对酶活力的影响 | 第39页 |
| ·野生型和突变体酶的三级结构变化 | 第39-41页 |
| ·圆二（CD）色谱 | 第41-42页 |
| ·突变体酶热稳定性的研究 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |