| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 1 引言 | 第14-31页 |
| ·课题的提出 | 第14-15页 |
| ·AsA 研究进展 | 第15-24页 |
| ·高等植物中 AsA 的合成与代谢 | 第15-17页 |
| ·植物抗坏血酸的转运 | 第17-19页 |
| ·AsA 在植物体内的生理功能 | 第19-24页 |
| ·植物 AsA 合成代谢关键酶的研究进展 | 第24-31页 |
| ·GDP-甘露糖焦磷酸化酶(GMPase)的研究进展 | 第24-25页 |
| ·L-半乳糖-1，4-内酯脱氢酶(GalLDH)的研究进展 | 第25-28页 |
| ·脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)的研究进展 | 第28-29页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶(APX)的研究进展 | 第29-30页 |
| ·抗坏血酸氧化物酶(AAO)的研究进展 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-55页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·材料处理 | 第31页 |
| ·菌株与质粒 | 第31页 |
| ·酶及生化试剂 | 第31页 |
| ·PCR 引物 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-55页 |
| ·利用 TRIZOL 试剂盒提取 RNA | 第32-33页 |
| ·反转录cDNA 第一条链的合成 | 第33-34页 |
| ·目的基因全长cDNA 的分离 | 第34-40页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第40-43页 |
| ·GMPase 基因正义表达载体的构建 | 第43-45页 |
| ·农杆菌介导转化烟草 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草植株的 PCR 检测 | 第46-49页 |
| ·转反义基因烟草生理指标的测定 | 第49-50页 |
| ·GMPase 的原核表达及 Western 杂交 | 第50-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-72页 |
| ·GMPase 的分离及其特征 | 第55-59页 |
| ·GMPase 中间片段的分离 | 第55-56页 |
| ·GMPase 基因全长的克隆 | 第56页 |
| ·GMPase 基因序列分析 | 第56-59页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·番茄叶片 GDP-甘露糖焦磷酸化酶基因转化烟草及转基因植株的分子检测 | 第60-61页 |
| ·基因表达特性分析 | 第61-65页 |
| ·GMPase 基因在野生型番茄中的表达 | 第61-62页 |
| ·GMPase 基因在野生型和转反义基因烟草中的不同表达 | 第62-64页 |
| ·pET-GMPase 原核表达载体的构建和鉴定 | 第64页 |
| ·GMPase 蛋白的原核表达 | 第64-65页 |
| ·转反义基因烟草中的 AsA 含量 | 第65-66页 |
| ·温度胁迫下转反义基因烟草中 H_2O_2和脂质过氧化物增加 | 第66-68页 |
| ·温度胁迫对 WT 和转反义基因烟草 SOD、CAT 和 APX 活性的影响 | 第68-70页 |
| ·反义介导的 GMPase 缺失引起烟草表型差异 | 第70-72页 |
| 4 讨论 | 第72-77页 |
| ·GMPase 编码 GDP.甘露糖焦磷酸化酶 | 第72页 |
| ·反义介导的 GMPase 的缺失导致转反义基因烟草叶片中的 AsA 含量降低 | 第72-73页 |
| ·反义介导的 GMPase 的缺失显著降低转反义基因烟草的耐温度胁迫性能 | 第73-74页 |
| ·反义介导的 GMPase 的缺失影响烟草的开花 | 第74-77页 |
| 5 结论 | 第77-79页 |
| 6 下一步研究工作设想 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-91页 |
| 附录1 | 第91-93页 |
| 附录2 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
