柑橘鳞皮病毒的RT-PCR检测技术研究
| 第一章 文献综述 | 第1-20页 |
| ·柑桔鳞皮病的发生与概况 | 第10-12页 |
| ·柑桔鳞皮病的为害 | 第12页 |
| ·CPV的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·CPV的传播途径 | 第13-15页 |
| ·指示植物和交叉保护 | 第15页 |
| ·柑桔鳞皮病的防治 | 第15-16页 |
| ·CPV的检测方法 | 第16-19页 |
| ·CPV的常规检测方法 | 第17页 |
| ·CPV的免疫学检测方法 | 第17-18页 |
| ·分子杂交技术 | 第18页 |
| ·RT-PCR | 第18-19页 |
| ·总述 | 第19-20页 |
| 第二章 引言 | 第20-21页 |
| 第三章 材料和方法 | 第21-28页 |
| ·供试材料 | 第21-24页 |
| ·供试CPV毒源 | 第21页 |
| ·供试苗木 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第22页 |
| ·常用缓冲液和储备液 | 第22-24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·毒源的采集和保存 | 第24页 |
| ·总核酸提取 | 第24-25页 |
| ·CPV RNA的RT-PCR检测方法 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR扩增产物的序列分析 | 第26页 |
| ·CPV病原在不同部位全年分布的检测方法 | 第26-27页 |
| ·实际样品检测 | 第27页 |
| ·一步法RT-PCR的应用 | 第27-28页 |
| 第四章 结果与分析 | 第28-39页 |
| ·毒源的保存 | 第28页 |
| ·温室毒源的保存状况 | 第28页 |
| ·嫁接毒源的保存状况 | 第28页 |
| ·三种总核酸提取方法的比较 | 第28-30页 |
| ·总核酸的浓度和纯度 | 第28-29页 |
| ·CPV的CPG RT-PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·常规RT-PCR扩增条件和反应程序 | 第30-32页 |
| ·一步法RT-PCR扩增条件和反应程序 | 第32-33页 |
| ·两种一步法RT-PCR试剂盒的比较 | 第32页 |
| ·一步法RT-PCR反应条件的优化 | 第32-33页 |
| ·一步法RT-PCR的灵敏度测试 | 第33页 |
| ·一步法RT-PCR特异性分析 | 第33页 |
| ·扩增片段的序列测定及在数据库中相似性比对结果 | 第33-35页 |
| ·CPV在Dweet桔橙苗木上不同部位的全年分布 | 第35-36页 |
| ·CPV在Dweet桔橙苗木叶片中的分布 | 第36页 |
| ·CPV在Dweet桔橙苗木枝皮中的分布 | 第36页 |
| ·一步法RT-PCR的应用 | 第36-39页 |
| ·温室保存毒源的带毒检测 | 第36-37页 |
| ·不同柑桔品种的检测 | 第37页 |
| ·外地送检样品的检测 | 第37-39页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第39-43页 |
| ·结论 | 第39-40页 |
| ·三种CPV总核酸提取方法的比较 | 第39页 |
| ·常规RT-PCR和一步法RT-PCR的优化实验 | 第39页 |
| ·一步法RT-PCR的运用 | 第39-40页 |
| ·CPV在Dweet桔橙不同部位中的全年分布检测 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·CPV的症状、保存和防治 | 第40页 |
| ·三种CPV总核酸提取方法的比较 | 第40-41页 |
| ·CPV的检测 | 第41页 |
| ·CPV在Dweet桔橙苗木不同部位的全年分布 | 第41页 |
| ·应用价值及今后努力方向 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52-58页 |
| 1.PCR产物测序结果 | 第52-54页 |
| 2.PCR产物测序结果NCBI Blast比对 | 第54-58页 |
| 3.CPV基因组图 | 第58页 |
