| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-18页 |
| 1 耐药现状 | 第12-13页 |
| 2 耐药机制 | 第13-14页 |
| 3 耐药基因的检测 | 第14-18页 |
| 第一章 荧光置换探针实时PCR 单管检测拉米夫定多位点耐药突变 | 第18-42页 |
| 第一节 引言 | 第18-20页 |
| 第二节 材料与方法 | 第20-25页 |
| 第三节 结果 | 第25-32页 |
| ·基因组 DNA 模板的提取与定量 | 第25页 |
| ·拉米夫定抗HBV 耐药突变荧光置换探针实时PCR 体系的原理 | 第25-26页 |
| ·荧光置换探针实时PCR 体系的优化 | 第26-28页 |
| ·荧光置换探针实时PCR 体系的灵敏度实验 | 第28-29页 |
| ·荧光置换探针实时PCR 的杂合比例实验 | 第29-30页 |
| ·实时PCR 检测50 份已知为突变型的血清标本 | 第30-31页 |
| ·实时 PCR 检测 36 份 HBeAg 阳性的未经过拉米夫定治疗的临床标本 | 第31-32页 |
| 第四节 讨论 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-42页 |
| 第二章 荧光置换探针实时 PCR 检测结核杆菌耐利福平突变 | 第42-57页 |
| 第一节 引言 | 第42-43页 |
| 第二节 材料和方法 | 第43-47页 |
| 第三节 结果与分析 | 第47-51页 |
| ·痰标本中结核分枝杆菌基因组DNA 的提取与定量 | 第47-48页 |
| ·利福平抗结核分枝杆菌耐药突变荧光置换探针实时 PCR 体系的原理 | 第48页 |
| ·荧光置换探针的特异性考察——变温杂交反应 | 第48-49页 |
| ·荧光置换探针实时PCR 体系的灵敏度实验 | 第49页 |
| ·荧光置换探针实时PCR 体系的特异性实验 | 第49-50页 |
| ·荧光置换探针实时PCR 体系检测123 份痰标本 | 第50-51页 |
| 第三节 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 第三章 荧光置换探针多重实时 PCR 检测结核杆菌三种耐药突变 | 第57-77页 |
| 第一节 引言 | 第57-59页 |
| 第二节 材料和方法 | 第59-64页 |
| 第三节 结果与分析 | 第64-72页 |
| ·构建三种一线药物最常见的耐药突变位点的突变质粒 | 第64页 |
| ·荧光置换探针实时PCR 检测耐药的原理 | 第64-65页 |
| ·荧光置换探针实时PCR 的特异性实验 | 第65-67页 |
| ·荧光置换探针多重PCR 联合检测三种药物的耐药突变 | 第67-68页 |
| ·荧光置换探针多重PCR 体系灵敏度考察 | 第68-69页 |
| ·荧光置换探针多重PCR 体系实时检测8 份培养标本 | 第69-70页 |
| ·荧光置换探针多重PCR 体系实时检测118 份痰标本 | 第70-71页 |
| ·利用 ARMS 引物验证 118 份痰标本的耐药突变 | 第71-72页 |
| 第四节 讨论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 发表交流论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
