1 引言 | 第1-18页 |
·新孢子虫病研究进展 | 第9-18页 |
·N. caninum分类地位 | 第9页 |
·N. caninum生活史及各阶段虫体形态 | 第9-10页 |
·动物感染N. caninum临床症状 | 第10-11页 |
·新孢子虫病诊断与检测方法 | 第11-13页 |
·奶牛新孢子虫病的流行现状 | 第13-14页 |
·动物感染N. caninum免疫学研究 | 第14-16页 |
·奶牛新孢子虫病病理组织学变 | 第16页 |
·奶牛新孢子虫病防治研究 | 第16页 |
·新孢子虫病在中国的研究 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-33页 |
·实验动物 | 第18页 |
·待检样品的采集及处理 | 第18页 |
·血样的采集及处理 | 第18页 |
·粪样的采集及保存 | 第18页 |
·流产胎儿病料的采集及处理 | 第18页 |
·奶牛布鲁氏菌病的血清学及细菌学调查 | 第18-21页 |
·主要材料 | 第18-19页 |
·血清学检测 | 第19-21页 |
·细菌学检测 | 第21页 |
·奶牛感染T. gondii血清学调查 | 第21-22页 |
·材料 | 第21页 |
·操作程序 | 第21-22页 |
·判定标准 | 第22页 |
·奶牛BVDV抗原检测 | 第22-23页 |
·双抗体夹心ELISA所用主要溶液 | 第22页 |
·双抗体夹心ELISA检测步骤 | 第22-23页 |
·奶牛新孢子虫病血清学调查 | 第23页 |
·主要试剂及溶液 | 第23页 |
·奶牛N. caninum抗体ELISA检测 | 第23页 |
·PCR法检测Neospora caninum DNA | 第23-32页 |
·血液提取DNA所需主要试剂 | 第23-24页 |
·聚合酶链式反应(PCR)所需主要试剂 | 第24页 |
·基因克隆主要试剂 | 第24页 |
·菌种与质粒载体 | 第24-25页 |
·主要溶液的配制 | 第25-26页 |
·引物的合成 | 第26-27页 |
·血液DNA的提取 | 第27-28页 |
·DNA浓度与纯度的检测 | 第28页 |
·PCR扩增反应 | 第28-29页 |
·PCR产物的电泳鉴定 | 第29页 |
·PCR产物的纯化及纯化产物的酶切鉴定 | 第29页 |
·Nc-5基因的克隆及测序 | 第29-31页 |
·PCR方法特异性试验 | 第31页 |
·PCR方法灵敏性试验 | 第31页 |
·PCR方法重复性试验 | 第31-32页 |
·PCR法检测河北地区奶牛感染新孢子虫的情况 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32-33页 |
3 结果 | 第33-40页 |
·奶牛布鲁氏菌病调查结果 | 第33-34页 |
·血清学检测结果 | 第33-34页 |
·细菌学检查结果 | 第34页 |
·奶牛感染T.gondii调查结果 | 第34-35页 |
·奶牛感染BVDV抗原检测结果 | 第35页 |
·奶牛新孢子虫病流行病学调查结果 | 第35-36页 |
·PCR方法检测NeosporacaninumDNA的结果 | 第36-38页 |
·总DNA提取结果 | 第36页 |
·PCR扩增结果 | 第36-37页 |
·PCR产物的纯化及纯化产物的酶切鉴定结果 | 第37页 |
·Nc-5基因的克隆及测序结果 | 第37-38页 |
·PCR方法特异性结果 | 第38页 |
·PCR方法敏感性扩增结果 | 第38页 |
·重复性试验结果 | 第38页 |
·PCR法检测河北省地区奶牛感染新孢子虫的情况 | 第38-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
·流产病因分析及防制对策 | 第40-41页 |
·牛布鲁氏杆菌病的情况 | 第40页 |
·牛病毒性腹泻-粘膜病的情况 | 第40页 |
·牛新孢子虫病的情况 | 第40-41页 |
·PCR诊断牛新孢子虫病的建立 | 第41-43页 |
·血液样品的保存和提取过程中对DNA质量的影响 | 第41页 |
·Nc-5基因克隆 | 第41-42页 |
·PCR方法特异性及敏感性分析 | 第42-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
在读期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
作者简历 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
附录 | 第54-57页 |