中文摘要 | 第1-13页 |
英文摘要 | 第13-16页 |
1 引言 | 第16-38页 |
·梅迪-维斯纳病概述 | 第16-23页 |
·病性 | 第16页 |
·历史与分布 | 第16-17页 |
·临床症状与病理变化 | 第17-19页 |
·致病机理 | 第19-21页 |
·诊断 | 第21页 |
·生态学 | 第21-22页 |
·免疫与防制 | 第22-23页 |
·MVV 及其疫苗研究进展 | 第23-27页 |
·MVV 概述 | 第23-24页 |
·MVV 的生物学特性 | 第24页 |
·MVV 的分子生物学 | 第24-26页 |
·MVV 保护性抗原基因及其疫苗研究进展 | 第26-27页 |
·核酸疫苗及免疫佐剂的研究进展 | 第27-37页 |
·核酸疫苗的概述 | 第27-29页 |
·免疫佐剂概述 | 第29-31页 |
·IL-2 的免疫佐剂作用 | 第31-33页 |
·脂质体的研究进展 | 第33-37页 |
·本项目研究的背景、内容及意义 | 第37-38页 |
2 材料与方法 | 第38-53页 |
·材料 | 第38-41页 |
·主要试剂 | 第38-39页 |
·主要仪器 | 第39页 |
·病毒和细胞 | 第39页 |
·菌株、载体与质粒 | 第39-40页 |
·实验动物 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-53页 |
·绵羊MVV 基因克隆及序列分析 | 第41-42页 |
·MVV 保护性抗原基因的克隆和序列分析 | 第42-44页 |
·MVV 核酸疫苗的构建及体外表达 | 第44-47页 |
·MVV 核酸疫苗对小鼠免疫效果的研究 | 第47-49页 |
·pcDNA-IL-2 的构建及体外表达 | 第49-51页 |
·山羊IL-2 对MVV 核酸疫苗的免疫佐剂研究 | 第51-53页 |
3 结果与分析 | 第53-81页 |
·MVV 的培养及鉴定 | 第53-54页 |
·MVV 对绵羊胎皮细胞及胎肺细胞的适应情况 | 第53页 |
·病毒粒子的电镜检测结果 | 第53-54页 |
·MVV 细胞抗原交叉实验 | 第54页 |
·MVV 各段基因的克隆和序列分析 | 第54-65页 |
·MVV 各片段PCR 扩增 | 第54-55页 |
·MVV 主要基因片段序列测定及同源性比较 | 第55-65页 |
·MVV 保护性抗原基因的克隆和序列分析 | 第65-70页 |
·MVV gag 基因的PCR 扩增 | 第65-66页 |
·pGEM T-gag 重组质粒的酶切鉴定 | 第66页 |
·gag 基因序列测定及分析 | 第66-70页 |
·MVV gag 编码蛋白的抗原性分析 | 第70页 |
·重组真核表达质粒的构建及体外表达检测 | 第70-73页 |
·pcDNA5/TO-gag 重组阳性克隆的鉴定 | 第70-71页 |
·ELISA 法对重组质粒表达的检测 | 第71-72页 |
·免疫组化法对重组质粒表达的检测 | 第72页 |
·RT-PCR 法对重组质粒表达的检测 | 第72页 |
·western-blot 法对重组质粒表达的检测 | 第72-73页 |
·MVV 核酸疫苗对小鼠的免疫效果研究 | 第73-75页 |
·MVV 抗体检测 | 第73-74页 |
·小鼠淋巴细胞转化实验 | 第74页 |
·小鼠淋巴细胞IL-4 和IFN-γ分泌水平检测 | 第74-75页 |
·山羊 IL-2 对MVV 核酸疫苗免疫效果影响的研究 | 第75-81页 |
·IL-2 基因PCR 扩增 | 第75-76页 |
·pMD18-T-IL-2 重组阳性克隆的鉴定 | 第76页 |
·IL-2 序列测定 | 第76-77页 |
·pcDNA5/TO-IL-2 重组阳性克隆的鉴定 | 第77页 |
·pcDNA5/TO-IL-2 转染COS-7 细胞的ELISA 检测 | 第77页 |
·pcDNA5/TO-IL-2 转染COS-7 细胞的RT-PCR 检测 | 第77-78页 |
·pcDNA5/TO-IL-2 作基因佐剂后MVV 抗体检测 | 第78页 |
·pcDNA5/TO-IL-2 对淋巴细胞转化实验的影响 | 第78-79页 |
·pcDNA5/TO-IL-2 作基因佐剂IL-4 和IFN-γ检测 | 第79-81页 |
4 讨论 | 第81-87页 |
·MVV 对绵羊细胞的感染及 MVV 的变异 | 第81页 |
·MVV 主要保护性基因的克隆 | 第81-82页 |
·重组质粒在真核细胞中的表达及检测 | 第82-83页 |
·MVV 核酸疫苗对小鼠免疫作用 | 第83-84页 |
·细胞免疫作用 | 第83-84页 |
·体液免疫作用 | 第84页 |
·佐剂对核酸疫苗的免疫效应 | 第84-87页 |
·脂质体的免疫佐剂效应 | 第85页 |
·IL-2 的基因佐剂效应 | 第85-87页 |
5 结论 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-98页 |
附录 | 第98-119页 |
攻读博士期间发表的学术论文 | 第119页 |