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鸭肠炎病毒部分基因组序列的克隆与分析

中文摘要第1-13页
英文摘要第13-17页
1. 引言第17-30页
   ·疱疹病毒分类第17页
   ·疱疹病毒形态结构第17页
   ·疱疹病毒基因组结构第17-18页
   ·疱疹病毒基因及其编码产物第18-20页
   ·鸭病毒性肠炎的国内外研究进展第20-26页
     ·鸭病毒性肠炎简介第20页
     ·鸭肠炎病毒简介第20-21页
     ·鸭肠炎病毒形态发生第21页
     ·鸭病毒性肠炎的诊断第21-24页
     ·鸭病毒性肠炎的防制第24-26页
     ·鸭肠炎病毒的分子生物学研究进展第26页
   ·鸭病毒性肠炎存在的问题与展望第26-27页
   ·研究目的和意义第27-28页
   ·研究内容和方法第28-30页
2. 材料与方法第30-37页
   ·实验材料第30-31页
     ·病毒、鸡胚和鸡胚成纤维细胞第30页
     ·载体与受体菌第30页
     ·酶类及主要生化试剂第30页
     ·引物第30页
     ·主要仪器设备第30-31页
   ·实验方法第31-37页
     ·鸭肠炎病毒的纯化第31-32页
     ·病毒的鉴定第32页
     ·PCR 检测病毒在鸡胚体内的分布第32-33页
     ·PCR 敏感性测定第33页
     ·Targeted gene walking PCR 扩增DEV Clone-03 未知基因第33页
     ·PCR 产物的克隆和序列测定第33页
     ·病毒基因的ORF 预测和序列分析第33-34页
     ·分段进行DEV Clone-03 UL6 基因的原核表达第34-37页
3. 结果与分析第37-75页
   ·DEV 的纯化、增殖与鉴定第37-39页
     ·DEV 引起的细胞和鸡胚病变第37页
     ·PCR 鉴定产物及电镜观察第37-38页
     ·引物P1/P2 PCR 扩增产物的核苷酸序列第38页
     ·引物P11/P12 PCR 扩增产物的核苷酸序列第38-39页
     ·PCR 检测病毒在鸡胚体内的分布第39页
     ·PCR 检测的敏感性第39页
   ·DEV Clone-03 基因的扩增第39-71页
     ·DEV Clone-03 UL1~UL7 基因区和UL25~UL30 基因区第39-41页
     ·UL1 基因序列分析第41-44页
     ·UL2 基因序列分析第44-46页
     ·UL3 基因序列分析第46-47页
     ·UL4 基因序列分析第47-48页
     ·UL5 基因序列分析第48-51页
     ·UL6 基因序列分析第51-52页
     ·UL7 基因序列分析第52-55页
     ·UL25 基因序列分析第55-58页
     ·UL26 基因序列分析第58-61页
     ·UL26.5 基因序列分析第61-62页
     ·UL27 基因序列分析第62-63页
     ·UL28 基因序列分析第63-65页
     ·UL29 基因序列分析第65-69页
     ·UL30 基因序列分析第69-71页
   ·DEV Clone-03 UL6 基因的分段表达第71-75页
     ·表达载体pET-UL6-1 的构建第71-72页
     ·表达载体pET-UL6-2 的构建第72页
     ·表达产物的SDS-PAGE 分析第72-73页
     ·Western-blot 鉴定免疫后血清效价第73-75页
4. 讨论第75-91页
   ·DEV 的蚀斑纯化、增殖和检测第75-76页
   ·DEV UL1~UL7 和UL25~UL30 基因的扩增和序列分析第76-89页
     ·Targeted gene walking PCR 方法扩增DEV 基因第76页
     ·DEV Clone-03 UL1~UL7 和UL25~UL30 基因的排列第76-77页
     ·DEV Clone-03 UL1~UL7 和UL25~UL30 基因的起始密码子第77页
     ·DEV Clone-03 UL1~UL7 和UL25~UL30 基因的特征第77-89页
   ·DEV Clone-03 UL6 基因的原核表达第89-90页
   ·实验创新第90-91页
5. 结论第91-92页
致谢第92-93页
参考文献第93-108页
攻读博士学位期间发表的学术论文第108页

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