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BtCry1A基因转化中嘉8号杨的研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第1章 文献综述第12-45页
 1 Bt杀虫晶体蛋白基因与转Bt基因抗虫植物研究进展第13-20页
   ·Bt杀虫晶体蛋白的结构与功能第13-14页
   ·Bt杀虫晶体蛋白基因第14-16页
   ·Bt杀虫晶体蛋白的作用机理第16-18页
   ·Bt杀虫晶体蛋白基因的修饰、改造第18-19页
   ·转Bt基因抗虫植物第19-20页
 2 转Bt基因杨树研究进展第20-29页
   ·杨树的组织培养第20-22页
   ·Bt基因转化杨树第22-26页
   ·转Bt基因抗虫杨树第26-29页
 3 转基因抗虫植物的鉴定第29-31页
   ·报告基因检测第29页
   ·分子检测第29-30页
   ·免疫测定第30页
   ·生物测试第30-31页
 4 本研究的目的及意义第31-33页
 5 本研究的技术路线第33-35页
 6 参考文献第35-45页
第2章 中嘉8号杨组培技术的研究第45-64页
 1 材料与方法第45-49页
   ·材料第45-47页
     ·植物材料第45-46页
     ·培养基第46页
     ·试剂第46-47页
   ·方法第47-49页
     ·启动培养第47页
     ·叶盘愈伤组织的诱导第47页
     ·激素对愈伤组织分化不定芽的影响第47-48页
     ·生根培养第48页
     ·生根苗移栽第48-49页
 2 结果与分析第49-61页
   ·不同外植体对愈伤组织诱导的影响第49-50页
   ·激素配比对叶盘诱导愈伤组织的影响第50-52页
   ·激素对愈伤组织分化不定芽的影响第52-56页
     ·生长素对愈伤组织分化不定芽的影响第52-53页
     ·细胞分裂素对愈伤组织分化不定芽的影响第53-54页
     ·生长素与细胞分裂素的配比第54-56页
   ·生根培养第56-59页
     ·激素配比对组培苗生根的影响第56-58页
     ·琼脂用量对组培苗生根的影响第58-59页
   ·生根苗移栽第59-61页
 3 讨论第61-62页
 4 小结第62页
 5 参考文献第62-64页
第3章 中嘉8号杨基因转化受体系统的研究第64-83页
 1 材料与方法第64-68页
   ·材料第64-65页
     ·外植体第64-65页
     ·试剂第65页
     ·菌株和质粒第65页
   ·培养基第65-66页
     ·农杆菌培养基第65页
     ·植物培养基第65-66页
   ·方法第66-68页
     ·中嘉8号杨叶片直接分化不定芽的研究第66-67页
     ·抑菌抗生素对农杆菌的抑制试验第67页
     ·中嘉8号杨抗生素敏感性试验第67-68页
 2 结果与分析第68-78页
   ·培养基无机氮含量对中嘉8号杨叶片分化不定芽的影响第68-69页
   ·生长素对中嘉8号杨叶片分化不定芽的影响第69-70页
   ·细胞分裂素对中嘉8号杨叶片分化不定芽的影响第70-72页
   ·中嘉8号杨叶片分化不定芽的最佳激素配比第72-73页
   ·抑菌性抗生素的抗菌作用第73-74页
   ·抗生素对中嘉8号杨叶片分化不定芽的影响第74页
   ·链霉素对中嘉8号杨叶片分化不定芽的促进作用第74-77页
   ·Km对中嘉8号杨不定芽生长的影响第77页
   ·Km对中嘉8号杨无根苗生根的影响第77-78页
 3 讨论第78-80页
 4 小结第80-81页
 5 参考文献第81-83页
第4章 BtCry1A基因转化中嘉8号杨及转化植株的获得第83-101页
 1 材料与方法第84-87页
   ·植物材料第84页
   ·试剂第84页
   ·培养基第84-85页
     ·农杆菌培养基第84页
     ·植物培养基第84-85页
   ·菌株和质粒第85-86页
   ·实验方法第86-87页
     ·外植体选择第86页
     ·农杆菌的活化和浸染菌液的制备第86页
     ·影响农杆菌转化中嘉8号杨效果的因素第86-87页
   ·Km~r植株的获得第87页
 2 结果与分析第87-95页
   ·预培养时间对产生Km~r芽的影响第87-88页
   ·菌液浓度对外植体产生Km~r芽的影响第88-89页
   ·浸染时间对外植体产生Km~r芽的影响第89-90页
   ·共培养时间对外植体产生Km~r芽的影响第90-91页
   ·AS添加方式对外植体产生Km~r芽的影响第91-93页
   ·AS浓度对外植体产生Km~r芽的影响第93-94页
   ·选择方式对外植体产生Km~r芽的影响第94-95页
   ·Km~r植株的获得第95页
 3 讨论第95-97页
 4 小结第97页
 5 参考文献第97-101页
第5章 中嘉8号杨转BtCry1A基因植株的检测及抗虫试验第101-124页
 1 材料与方法第101-107页
   ·材料第101-103页
     ·植物材料第101页
     ·昆虫细胞第101页
     ·质粒和菌株第101页
     ·引物第101-102页
     ·溶液与试剂第102页
     ·酶、试剂盒及药品第102页
     ·昆虫细胞培养基(Grace)第102-103页
     ·试虫第103页
     ·主要实验仪器第103页
   ·方法第103-107页
     ·中嘉8号杨Km~r植株的PCR检测第103-105页
     ·中嘉8号杨PCR阳性植株的ELISA检测第105页
     ·中嘉8号杨PCR阳性植株的聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳第105-106页
     ·中嘉8号杨PCR阳性植株的MTT法检测第106-107页
     ·中嘉8号杨PCR阳性植株的抗虫试验第107页
 2 结果与分析第107-119页
   ·Km~r植株的PCR分析第107-108页
   ·PCR阳性植株BtCry1A毒蛋白含量第108-109页
   ·PCR阳性植株的聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳第109-110页
   ·中嘉8号杨PCR阳性植株对昆虫细胞的毒力测定第110-113页
   ·中嘉8号杨PCR阳性植株的杀虫效果第113-119页
     ·植株对杨扇舟蛾幼虫生长量的影响第113页
     ·转基因植株对杨扇舟蛾幼虫发育的影响第113-115页
     ·杨扇舟蛾幼虫中肠组织病理变化的显微观察第115-116页
     ·转基因植株对杨扇舟蛾幼虫的抗虫效果第116-119页
 3 讨论第119-120页
 4 小结第120-121页
 5 参考文献第121-124页
第六章 总结与讨论第124-130页
 1.植物基因转化受体系统的选择第124-125页
 2.影响农杆菌基因转化效率的主要因素第125-126页
 3.MTT法检测转基因抗虫植物的应用前景第126-127页
 4.中嘉8号转BtCryⅠA基因抗虫植株的后续研究第127-128页
 5.参考文献第128-130页
本论文的创新点第130-131页
附录第131-132页
博士期间的科研成果第132-134页
致谢第134页

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