| 英文缩写词表 | 第1-9页 |
| 综述 眼部的血管增生与抗血管增生的防治 | 第9-26页 |
| 一、血管增生 | 第9-14页 |
| 二、眼部的血管增生 | 第14-17页 |
| 三、眼部抗血管增生的防治 | 第17-26页 |
| 第一部分 人vasostatin 基因的克隆、表达和纯化 | 第26-63页 |
| 前言 | 第26-33页 |
| 材料和方法 | 第33-49页 |
| 一、实验材料 | 第33-35页 |
| 二、实验方法 | 第35-49页 |
| (一) 带有His 抗原标签的vasostatin 成熟肽cDNA 的扩增 | 第35-37页 |
| (二) 重组真核表达质粒pPIC9K-vasostatin 的构建及序列分析 | 第37-42页 |
| (三) 重组质粒pPIC9K-vasostatin 和空载体pPIC9K 的线性化及纯化 | 第42-43页 |
| (四) 酵母感受态细胞的制备 | 第43页 |
| (五) Licl 法外源基因的转化、筛选及鉴定 | 第43-45页 |
| (六) 目的蛋白的诱导表达、检测及纯化 | 第45-49页 |
| 结果 | 第49-59页 |
| 一、带有His 抗原标签的vasostatin 成熟肽cDNA 的扩增结果 | 第49页 |
| 二、重组真核表达质粒pPIC9K-vasostatin 的构建及序列分析 | 第49-57页 |
| 三、重组真核表达质粒pPIC9K-vasostatin和空载体pPIC9K的线性化及纯化 | 第57页 |
| 四、酵母菌落PCR 鉴定 | 第57-58页 |
| 五、诱导表达上清液样品的Western-Blot 检测 | 第58-59页 |
| 六、目的蛋白纯化后的考染结果 | 第59页 |
| 讨论 | 第59-62页 |
| 小结 | 第62-63页 |
| 第二部分 重组人vasostatin 抑制脐静脉血管内皮细胞的实验研究 | 第63-73页 |
| 前言 | 第63页 |
| 材料和方法 | 第63-66页 |
| 一、实验材料 | 第63-64页 |
| 二、实验方法 | 第64-66页 |
| (一) 人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)的复苏 | 第64页 |
| (二) 人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)的传代 | 第64-65页 |
| (三) MTT 法检测不同浓度的重组人vasostatin 蛋白对人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)生长状态的影响 | 第65页 |
| (四) 流式细胞仪检测 | 第65-66页 |
| 结果 | 第66-69页 |
| 一、重组人vasostatin蛋白对ECV304细胞生长状态的影响 | 第66-67页 |
| 二、MTT 法检测重组人vasostatin 蛋白对ECV304 细胞生长状态的影响 | 第67-68页 |
| 三、流式细胞仪检测结果 | 第68-69页 |
| 讨论 | 第69-72页 |
| 小结 | 第72-73页 |
| 第三部分重组人vasostatin 体内抑制视网膜新生血管的实验研究 | 第73-85页 |
| 前言 | 第73页 |
| 材料和方法 | 第73-77页 |
| 一、实验材料 | 第73-74页 |
| 二、实验方法 | 第74-77页 |
| (一) C578LL/6J 小鼠视网膜新生血管模型的制备、实验分组和处置 | 第74-75页 |
| (二) 应用视网膜铺片法、切片法、免疫组化、电镜等方法观察重组人vasostatin在体内抑制视网膜新生血管的作用 | 第75-77页 |
| 结果 | 第77-81页 |
| 一、各组3 周龄幼鼠视网膜血管铺片图 | 第77-78页 |
| 二、视网膜切片法结果 | 第78-80页 |
| 三、视网膜免疫组化结果 | 第80页 |
| 四、视网膜电镜检查结果 | 第80-81页 |
| 讨论 | 第81-84页 |
| 小结 | 第84-85页 |
| 全文结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-98页 |
| 附图 | 第98-102页 |
| 攻博期间发表的学术论文 | 第102-103页 |
| 中文摘要 | 第103-106页 |
| 英文摘要 | 第106-111页 |
| 致 谢 | 第111-112页 |
