| 摘要 | 第1页 |
| 关键词 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| Key words | 第8-9页 |
| 1. 前言 | 第9-21页 |
| ·生物修复 | 第9页 |
| ·苯酚的生产和对生态环境及动植物的影响 | 第9-10页 |
| ·目前己分离的苯酚降解菌 | 第10-11页 |
| ·细菌鉴定的分子生物学方法 | 第11-13页 |
| ·苯酚的代谢途径以及在芳香族化合物代谢中的地位 | 第13-14页 |
| ·苯酚降解基因 | 第14-15页 |
| ·苯酚降解的基因表达调控 | 第15-16页 |
| ·基因克隆 | 第16-19页 |
| ·本工作的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2. 材料与方法 | 第21-36页 |
| ·材料 | 第21-26页 |
| ·样品来源 | 第21页 |
| ·菌株与质粒 | 第21-22页 |
| ·培养基与培养条件 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·培养条件 | 第23页 |
| ·常用溶液、缓冲液 | 第23-25页 |
| ·仪器 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-36页 |
| ·4-氨基安替比林法测定苯酚浓度 | 第26-27页 |
| ·JF-10总DNA抽提 | 第27-28页 |
| ·细菌16s rRNA基因序列扩增、序列测定和同源性比较 | 第28页 |
| ·细菌gyrB基因同源分析 | 第28-29页 |
| ·细菌苯酚经化酶基因序列扩增、序列测定和同源性比较 | 第29-30页 |
| ·BAC文库的构建过程 | 第30-34页 |
| ·外源的制备 | 第30-31页 |
| ·跑脉冲电泳 | 第31-32页 |
| ·透析袋回收 | 第32页 |
| ·载体的制备 | 第32-33页 |
| ·连接 | 第33页 |
| ·除盐 | 第33页 |
| ·大肠杆菌电转感受态制备 | 第33-34页 |
| ·电转化 | 第34页 |
| ·转化子验证 | 第34页 |
| ·高效苯酚降解菌的降解曲线 | 第34页 |
| ·菌株的生理生化鉴定 | 第34-35页 |
| ·质粒的快速检测步骤 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-54页 |
| ·高效苯酚降解菌的分离 | 第36-37页 |
| ·样品的采集 | 第36页 |
| ·菌株分离和筛选 | 第36-37页 |
| ·菌株特性 | 第37-42页 |
| ·苯酚降解菌对不同碳源的利用情况 | 第37页 |
| ·高效苯酚降解菌的降解曲线 | 第37-38页 |
| ·苯酚降解菌的抗生素抗性实验 | 第38页 |
| ·苯酚降解菌的降解特性 | 第38-42页 |
| ·苯酚降解受pH值的影响 | 第38-39页 |
| ·苯酚降解受重金属的影响 | 第39-41页 |
| ·苯酚降解受其它有机物的影响 | 第41-42页 |
| ·菌株鉴定结果 | 第42-46页 |
| ·菌株的生理生化鉴定 | 第42页 |
| ·菌株的16s rDNA序列鉴定结果 | 第42-45页 |
| ·菌株的gyrB序列分析结果 | 第45-46页 |
| ·苯酚降解基因的研究 | 第46-54页 |
| ·苯酚轻化酶基因大亚基部分片断的序列分析 | 第46-48页 |
| ·苯酚轻化酶基因定位与降解突变体的研究 | 第48-51页 |
| ·苯酚降解基因的定位与降解突变体的获得 | 第48-49页 |
| ·苯酚降解突变体的性状的研究 | 第49-51页 |
| ·BAC文库的构建 | 第51-54页 |
| ·外源片段的制备与回收 | 第51-52页 |
| ·载体的制备与回收 | 第52-53页 |
| ·连接与转化 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 5 参考文献 | 第57-63页 |
| 6 致谢 | 第63页 |