| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 符号及缩略语 | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-22页 |
| 1 植物嘧啶核苷酸合成途径概述 | 第11-15页 |
| 2 植物嘧啶核苷酸合成途径的生物学功能 | 第15-17页 |
| 3 植物二氢乳清酸脱氢酶 | 第17-19页 |
| 4 研究展望 | 第19-22页 |
| 第二部分 研究报告 | 第22-68页 |
| 第一章 材料与方法 | 第23-37页 |
| 1 植物材料 | 第23页 |
| 2 菌株与质粒 | 第23页 |
| 3 酶与试剂 | 第23页 |
| 4 培养基和缓冲液的配制 | 第23-24页 |
| 5 植物材料的准备 | 第24页 |
| 6 水稻幼苗总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 7 RNA浓度定量与完整性检测 | 第25页 |
| 8 cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
| 9 PCR扩增 | 第26页 |
| 10 大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第26-27页 |
| 11 PCR产物的克隆 | 第27-28页 |
| 12 质粒DNA的抽提 | 第28-29页 |
| 13 质粒pBI121的脱磷酸化处理 | 第29页 |
| 14 农杆菌EHA105感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 15 阳性单克隆的质粒转化农杆菌感受态细胞 | 第29-30页 |
| 16 pBI121-OsDHODH1-GUS和pBI121-OsDHODH2-GUS瞬时表达载体的构建 | 第30页 |
| 17 pBI121-OsDHODH1-GUS和pBI121-OsDHODH2-GUS转化洋葱表皮细胞 | 第30-31页 |
| 18 半定量RT-PCR检测OsDHODH1和OsDHODH2的表达特性 | 第31-32页 |
| 19 原核表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 20 OsDHODH1和OsDHODH2蛋白的诱导表达及其酶活性测定 | 第33页 |
| 21 OsDHODH1和OsDHODH2的表达对大肠杆菌生长的影响 | 第33页 |
| 22 OsDHODH1和OsDHODH2的表达对大肠杆菌的耐逆性分析 | 第33-34页 |
| 23 pBI121-OsDHODH1植物表达载体的构建 | 第34页 |
| 24 农杆菌介导法转化烟草 | 第34-35页 |
| 25 序列测定 | 第35页 |
| 26 生物信息学分析 | 第35-37页 |
| 第二章 结果与分析 | 第37-64页 |
| 1 水稻OsDHODH1和OsDHODH2的克隆与序列分析 | 第37-44页 |
| 2 水稻OsDHODH1和OsDHODH2基因结构与染色体位置 | 第44-48页 |
| 3 DHODHs蛋白的系统发生分析 | 第48页 |
| 4 水稻OsDHODH1和OsDHODH2编码产物的亚细胞定位 | 第48-51页 |
| 5 水稻OsDHODH1和OsDHODH2的表达特性 | 第51-53页 |
| 6 水稻OsDHODH1与OsDHODH2的功能分析 | 第53-61页 |
| 7 水稻OsDHODH1转化烟草 | 第61-64页 |
| 第三章 讨论 | 第64-67页 |
| 第四章 全文结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录 | 第74-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表或待发表的研究论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
