| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第一章 新城疫病毒分子生物学研究进展 | 第12-34页 |
| 1 新城疫病毒基因组及编码蛋白 | 第13-25页 |
| ·新城疫病毒基因组结构 | 第13页 |
| ·新城疫病毒基因组编码蛋白的结构与功能 | 第13-25页 |
| ·血凝素-神经氨酸酶的结构与功能 | 第14-20页 |
| ·融合蛋白的结构与功能 | 第20-24页 |
| ·基质蛋白、磷蛋白、核蛋白和聚合酶的结构与功能 | 第24-25页 |
| 2 新城疫病毒致病的分子基础 | 第25-27页 |
| ·新城疫病毒的复制过程 | 第25页 |
| ·新城疫病毒的致病机理 | 第25-27页 |
| 3 新城疫病毒 F和 HN蛋白共表达研究进展 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-34页 |
| 第二章 新城疫病毒 HN蛋白抗原表位结构域基因原核表达及多克隆抗体的制备 | 第34-49页 |
| 1 材料与方法 | 第35-45页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·菌株、载体与试验动物 | 第35页 |
| ·分子生物学试剂 | 第35页 |
| ·普通化学试剂和免疫学试剂 | 第35页 |
| ·抗原结构域分析 | 第35-36页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-45页 |
| ·HNa和 HNb目的基因片段的PCR扩增 | 第37页 |
| ·扩增产物的纯化 | 第37-38页 |
| ·重组质粒pET32c-HNa和pET32c-HNb的构建 | 第38-40页 |
| ·重组质粒pET32c-HNa-L-b的构建 | 第40页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第40-43页 |
| ·表达蛋白的纯化及浓度测定 | 第43-45页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-47页 |
| ·目的基因的 PCR和重叠一延伸 PCR扩增 | 第45-46页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·目的基因表达产物的 SDS-PAGE和免疫印迹检测 | 第47页 |
| ·蛋白纯化及多克隆抗体的制备 | 第47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 新城疫病毒 HN及 F蛋白结构域基因真核表达重组质粒在 HeLa细胞中的表达 | 第49-59页 |
| 1 材料与方法 | 第49-53页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·质粒、菌株、细胞株 | 第49页 |
| ·基因克隆、操作试剂 | 第49-50页 |
| ·细胞培养、转染试剂与蛋白检测试剂 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-53页 |
| ·重组真核表达载体的构建及鉴定 | 第50-51页 |
| ·转染级超纯度真核表达质粒的制备 | 第51-52页 |
| ·脂质体介导重组质粒转染 HeLa细胞 | 第52-53页 |
| ·间接免疫荧光抗体法检测蛋白的表达 | 第53页 |
| 2 结果 | 第53-57页 |
| ·pcDNA3-HNa、pcDNA3-HNb和pcDNA3-HNa-L-b的构建及鉴定 | 第53-54页 |
| ·间接免疫荧光抗体检测外源基因在 HeLa细胞中的表达 | 第54-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 新城疫病毒 HN蛋白和 F蛋白结构域共表达对细胞融合的影响 | 第59-71页 |
| 1 材料与方法 | 第59-61页 |
| ·材料 | 第59-60页 |
| ·细胞株及一般试剂 | 第59-60页 |
| ·细胞培养、转染试剂与蛋白检测试剂 | 第60页 |
| ·方法 | 第60-61页 |
| ·转染级超纯度真核表达质粒的制备 | 第60页 |
| ·HeLa细胞传代 | 第60页 |
| ·pcDNA3-F与pcDNA3-HN、HNa和NHb共转染 HeLa细胞 | 第60-61页 |
| ·pcDNA3-Fa(c)与pcDNA3-HN、HNa和HNb共转染 HeLa细胞 | 第61页 |
| ·间接免疫荧光抗体法检测蛋白表达情况 | 第61页 |
| 2 结果 | 第61-68页 |
| ·不同组合共转染观察细胞融合 | 第61页 |
| ·间接免疫荧光检测结果 | 第61-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 结论与建议 | 第71-72页 |
| 附录 常用试剂及配制 | 第72-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
