| 第一章 鸡传染性法氏囊病的研究进展 | 第1-23页 |
| 第二章 IBD的RT-PCR快速诊断方法的建立 | 第23-35页 |
| 前言 | 第23页 |
| 材料与方法 | 第23-27页 |
| 1 材料 | 第23-25页 |
| ·参考毒株/菌株 | 第23-24页 |
| ·病料 | 第24页 |
| ·IBD 标准抗原及阳性血清 | 第24页 |
| ·鸡胚 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·溶液配制 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·引物 | 第25页 |
| 2 方法 | 第25-27页 |
| ·病料处理 | 第25页 |
| ·病毒总RNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·对照菌（毒）株的DNA 或RNA 抽提 | 第26页 |
| ·RT-PCR 方法 | 第26页 |
| ·PCR 特异性试验 | 第26页 |
| ·PCR 敏感性测定 | 第26页 |
| ·应用RT-PCR 对病料进行检测 | 第26页 |
| ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| ·琼脂扩散试验（AGP） | 第26-27页 |
| ·AGP 阴性病料上清液的处理 | 第27页 |
| ·鸡体攻毒试验 | 第27页 |
| ·鸡胚成纤维细胞接种试验 | 第27页 |
| ·鸡胚接种试验 | 第27页 |
| 结果与分析 | 第27-33页 |
| 1 PCR 条件的优化 | 第27页 |
| 2 PCR 特异性试验 | 第27-28页 |
| 3 PCR 敏感性检测 | 第28-29页 |
| 4 临床病料的PCR 检测 | 第29页 |
| 5 琼脂扩散试验 | 第29页 |
| 6 鸡体攻毒试验 | 第29-30页 |
| 7 分离物引起鸡胚成纤维细胞的病变 | 第30页 |
| 8 鸡胚接种试验 | 第30-31页 |
| 9 临床病料的基本情况和RT-PCR 及AGP 检测病料结果 | 第31-33页 |
| 讨论 | 第33-35页 |
| 1 RT-PCR 诊断方法的快速﹑特异性 | 第33页 |
| 2 RT-PCR 诊断方法的敏感性 | 第33-34页 |
| 3 有关FY1 株的讨论 | 第34页 |
| 4 IBD 的危害性 | 第34-35页 |
| 第三章 安徽 IBDV 超强毒株的分离鉴定 | 第35-62页 |
| 前言 | 第35页 |
| 材料与方法 | 第35-46页 |
| 1 材料 | 第35-39页 |
| ·鸡胚及雏鸡 | 第35页 |
| ·供试病料 | 第35-36页 |
| ·受体菌﹑质粒载体 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要试剂的配制 | 第36-38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·引物 | 第38-39页 |
| 2 方法 | 第39-46页 |
| ·IBDV 安徽株的分离及致病性研究 | 第39-40页 |
| ·病料上清液的处理 | 第39页 |
| ·病毒的增殖 | 第39页 |
| ·电镜检查 | 第39页 |
| ·鸡体回归试验 | 第39-40页 |
| ·鸡胚半数致死量（ELD50）的测定 | 第40页 |
| ·分离株VP2 高变区的克隆与序列分析 | 第40-46页 |
| ·病毒总RNA 的提取 | 第40页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第41页 |
| ·PCR 产物的连接 | 第41-42页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第42页 |
| ·重组质粒的转化培养 | 第42页 |
| ·可疑重组质粒阳性菌的筛选及质粒快速提取 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第43-44页 |
| ·IBDV VP2 高变区的核苷酸序列测定 | 第44页 |
| ·分离株VP2 高变区序列测定结果的鉴定 | 第44页 |
| ·分离株VP2 高变区的核苷酸序列及所编码的氨基酸序列分析 | 第44-45页 |
| ·分离株VP2 高变区的核苷酸序列系统进化关系分析 | 第45-46页 |
| ·酶切位点及抗原位点分析 | 第46页 |
| 结果与分析 | 第46-59页 |
| 1 IBDV 安徽株的分离及致病性研究 | 第46-48页 |
| ·病毒的增殖 | 第46页 |
| ·分离株的形态观察 | 第46-47页 |
| ·分离株对鸡的致病性 | 第47-48页 |
| ·分离株ELD50 的测定 | 第48页 |
| 2 分离株VP2 高变区的克隆与序列分析 | 第48-59页 |
| ·分离株VP2 基因高变区的RT-PCR 扩增 | 第48-49页 |
| ·分离株VP2 基因高变区的克隆及其鉴定 | 第49页 |
| ·分离株VP2 高变区核苷酸序列测定结果 | 第49-52页 |
| ·分离株VP2 基因高变区序列测定结果的鉴定 | 第52页 |
| ·分离株VP2 高变区的主要氨基酸分析 | 第52-53页 |
| ·分离株与国内参考株VP2 高变区核苷酸及推导氨基酸序列的比较分析 | 第53-54页 |
| ·分离株与国外参考株VP2 高变区核苷酸及推导氨基酸序列的比较分析 | 第54-55页 |
| ·分离株VP2 高变区遗传变异的分析 | 第55-56页 |
| ·分离株主要酶切位点分析 | 第56-57页 |
| ·分离株及参考株VP2 高变区潜在抗原位点比较分析 | 第57-59页 |
| 讨论 | 第59-62页 |
| 1 病毒的增殖及病毒形态 | 第59页 |
| 2 分离株的致病性特点 | 第59页 |
| 3 安徽IBD 新的流行特点 | 第59-60页 |
| 4 有关VP2 高变区主要氨基酸的讨论 | 第60页 |
| 5 关于 VP2 高变区核苷酸同源性及系统发生树的讨论 | 第60-61页 |
| 6 有关 VP2 高变区特征性酶切位点 | 第61页 |
| 7 关于超强毒株引起鸡群免疫失败的分子机制 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简介 | 第78页 |
