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转核酶基因、反义和正义CMV-CP基因番茄的抗黄瓜花叶病毒(CMV)研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-11页
缩写词第11-13页
第一章 黄瓜花叶病毒及抗病毒基因工程研究进展第13-35页
 一、植物病毒及其分类第13-14页
  1. 病毒的主要特征第13页
  2. 植物病毒的分类及在生物研究中的作用第13-14页
 二、黄瓜花叶病毒(CMV)第14-17页
  1. CMV 的基本特征第15页
  2. CMV 的核酸组成第15-16页
  3. CMV 株系鉴定第16-17页
  4. CMV 对作物的为害第17页
 三、病毒病对植物光合作用的影响第17-18页
 四、抗病毒基因工程研究进展第18-30页
  1. 传统防治方法的局限性第18-19页
  2. 植物对病毒的天然抗病性第19-20页
  3. 病原物来源的抗病性(PDR)第20-21页
  4. 转录后基因沉默(PTGS)第21-24页
   ·基因沉默第21-22页
   ·PTGS 的分子机制第22-24页
   ·病毒对PTGS 的反抑制第24页
  5. 病毒诱导的基因沉默(VIGS)第24-25页
  6. 病毒基因来源的抗性策略实例第25-29页
   ·外壳蛋白基因策略第25-26页
   ·病毒非结构蛋白基因策略第26-27页
   ·反义 RNA 策略第27-28页
   ·双链RNA 策略第28-29页
   ·病毒卫星RNA 基因策略第29页
  7. 其他来源的抗病策略第29-30页
   ·抗体基因策略第29-30页
   ·与干扰素有关的基因策略第30页
 五、核酶技术及应用第30-34页
  1. 核酶的作用机理和结构特点第30-32页
  2. 人工构建核酶基因的方法第32页
  3. 核酶在生物学中的应用第32-34页
 六、本研究的目的和意义第34-35页
第二章 材料与方法第35-57页
 第一节 实验材料第35-39页
 第二节 实验方法第39-57页
第三章 结果与分析第57-83页
 一、CMV 株系988LJ 外壳蛋白基因的克隆第57-60页
 二、抗CMV-CP 基因锤头型核酶的构建第60-62页
 三、核酶活性的体外检测第62页
 四、植物表达载体的构建第62-66页
  1. 质粒构建过程第62-63页
  2. 植物表达载体的酶切鉴定第63页
  3. 根癌农杆菌的转化第63-66页
 五、番茄的遗传转化第66-70页
  1. 植株再生及特异性分化第66-68页
  2. Km 浓度使用量的确定第68-70页
 六、转基因番茄的生长第70-72页
 七、T_0代番茄种子的发芽试验第72页
 八、PCR 鉴定番茄和烟草转化体的基因第72-73页
 九、转基因番茄的 Southern 检测第73-74页
 十、转基因番茄植株抗 CMV 鉴定第74-78页
  1. 转基因番茄T_1 代抗CMV 检测第74页
  2. 转基因番茄T_2代抗CMV 检测第74-78页
 十一、CMV 侵染对番茄叶绿素含量的影响第78-79页
 十二、CMV 侵染对叶片荧光动力学参数的影响第79-80页
 十三、讨论第80-83页
  1. CMV 株系的鉴定和序列分析比较第80-81页
  2. 核酶基因载体的构建第81页
  3. 反义和正义CP 基因载体的构建第81页
  4. 番茄栽培品种的再生及转化系统的建立第81-82页
  5. 转基因番茄的分子鉴定第82页
  6. 转基因番茄后代抗CMV 鉴定第82页
  7. 转基因番茄受病毒侵染后的光合指标变化第82-83页
第四章 结论第83-84页
参考文献第84-97页
在读期间已发表和待发表的文章第97-98页
致谢第98页

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