摘要 | 第1-8页 |
文献综述 | 第8-26页 |
1.转基因技术的发展现状 | 第8-10页 |
·农杆菌转化系统 | 第8-9页 |
·基因枪法 | 第9-10页 |
2.植物转基因技术存在的问题 | 第10-17页 |
·外植体脱分化途径的限制 | 第10-11页 |
·转基因沉默 | 第11-16页 |
·转基因植物选择标记的潜在危险 | 第16-17页 |
3.解决现有问题的策略 | 第17-26页 |
·建立不依赖于组织培养的基因转化方法 | 第17-18页 |
·克服转基因沉默的策略 | 第18-21页 |
·建立具有安全选择标记或无选择标记的技术体系 | 第21-26页 |
前言 | 第26-28页 |
材料与方法 | 第28-38页 |
1.实验材料 | 第28-29页 |
2.实验方法 | 第29-38页 |
·碱法提取质粒DNA | 第29-30页 |
·冻融法将质粒pBI121导入农杆菌LBA4404 | 第30-31页 |
·农杆菌转化烟草实验 | 第31-37页 |
·受体材料培养 | 第31页 |
·农杆菌的活化 | 第31页 |
·烟草抗卡那霉素敏感性试验 | 第31-32页 |
·羧苄青霉素抑制农杆菌实验 | 第32页 |
·农杆菌侵染转化 | 第32页 |
·转基因植物检测 | 第32-37页 |
·转基因植株Gus染色分析 | 第32-33页 |
·CTAB法提取植物总DNA | 第33-34页 |
·PCR扩增 | 第34页 |
·植物DNA大量提取法 | 第34-35页 |
·分子杂交 | 第35-37页 |
·农杆菌转化小麦实验 | 第37-38页 |
·受体材料培养 | 第37页 |
·农杆菌的活化 | 第37页 |
·农杆菌侵染转化 | 第37页 |
·转基因植物检测 | 第37-38页 |
·Gus瞬间表达活性测定 | 第37页 |
·PCR扩增 | 第37-38页 |
结果与分析 | 第38-45页 |
1.质粒pBI121导入农杆菌LBA4404结果 | 第38页 |
2.农杆菌转化烟草实验 | 第38-43页 |
·适宜抗生素筛选剂浓度的确定 | 第38-40页 |
·羧苄青霉素抑制农杆菌实验结果 | 第40页 |
·抗性植株再生与检测 | 第40-43页 |
3.农杆菌转化小麦实验 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
讨论 | 第46-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
致谢 | 第54页 |