| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-30页 |
| 1．1 关于植株再生 | 第14-15页 |
| 1．1．1 器官发生途径 | 第14页 |
| 1．1．2 体细胞胚发生途径 | 第14-15页 |
| 1．2 月季植株再生的研究进展 | 第15-18页 |
| 1．2．1 月季器官发生途径的植株再生 | 第16-17页 |
| 1．2．2 月季体细胞胚发生途径的植株再生 | 第17-18页 |
| 1．3 关于植物遗传转化 | 第18-20页 |
| 1．3．1 农杆菌介导的植物遗传转化 | 第19-20页 |
| 1．4 月季遗传转化的研究进展 | 第20-22页 |
| 1．5 关于反义RNA技术 | 第22-24页 |
| 1．5．1 反义RNA | 第22页 |
| 1．5．2 反义RNA技术的原理 | 第22页 |
| 1．5．3 反义RNA技术的应用 | 第22-24页 |
| 1．6 月季衰老与乙烯关系的研究进展 | 第24-28页 |
| 1．6．1 月季自然衰老过程中乙烯合成的变化 | 第24-26页 |
| 1．6．2 外源乙烯对月季开花和衰老的影响 | 第26-27页 |
| 1．6．3 乙烯合成和作用抑制剂对月季开花和衰老的影响 | 第27-28页 |
| 1．7 本研究课题的目的和意义 | 第28-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-39页 |
| 2．1 月季微繁体系的建立 | 第30页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第30页 |
| 2．1．2 培养基 | 第30页 |
| 2．1．3 培养条件 | 第30页 |
| 2．1．4 试管苗的生根和移栽 | 第30页 |
| 2．2 月季不定芽直接再生体系的建立 | 第30-32页 |
| 2．2．1 基因型对植株再生的影响 | 第30页 |
| 2．2．2 外植体对植株再生的影响 | 第30-31页 |
| 2．2．3 叶位对植株再生的影响 | 第31页 |
| 2．2．4 暗培养天数对植株再生的影响 | 第31页 |
| 2．2．5 植物生长调节剂对植株再生的影响 | 第31-32页 |
| 2．3 月季间接再生体系的建立 | 第32-33页 |
| 2．3．1 小叶外植体愈伤组织的诱导 | 第32页 |
| 2．3．2 假珠芽的发生 | 第32页 |
| 2．3．3 可继代增殖愈伤组织的获得 | 第32页 |
| 2．3．4 愈伤组织的诱导分化 | 第32页 |
| 2．3．5 悬浮体系的建立 | 第32-33页 |
| 2．3．6 愈伤组织石蜡切片的制作 | 第33页 |
| 2．4 月季‘萨蔓莎’根癌农杆菌遗传转化体系的建立 | 第33-36页 |
| 2．4．1 植物材料 | 第33页 |
| 2．4．2 月季‘萨蔓莎’小叶对潮霉素的敏感性试验 | 第33页 |
| 2．4．3 月季‘萨蔓莎’愈伤组织对潮霉素的敏感性试验 | 第33页 |
| 2．4．4 根癌农杆菌菌株及质粒 | 第33-34页 |
| 2．4．5 根癌农杆菌的活化和工程菌液的制备 | 第34页 |
| 2．4．6 侵染和共培养 | 第34页 |
| 2．4．7 脱菌和选择培养 | 第34页 |
| 2．4．8 转化条件的优化 | 第34页 |
| 2．4．9 GUS基因瞬间表达的检测 | 第34-35页 |
| 2．4．10 试验培养基及各种试剂的配制 | 第35-36页 |
| 2．5 ACC氧化酶反义基因转化月季‘萨蔓莎’愈伤组织 | 第36-37页 |
| 2．5．1 植物材料、根癌农杆菌和质粒 | 第36-37页 |
| 2．5．2 转化和选择方法 | 第37页 |
| 2．6 抗性愈伤组织的PCR检测 | 第37-39页 |
| 2．6．1 愈伤组织DNA和质粒DNA的提取 | 第37-38页 |
| 2．6．2 PCR反应 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-61页 |
| 3．1 月季微繁体系的建立 | 第39-41页 |
| 3．1．1 腋芽的萌发 | 第39页 |
| 3．1．2 试管苗的增殖 | 第39页 |
| 3．1．3 试管苗的生根和移栽 | 第39-41页 |
| 3．2 月季不定芽直接再生体系的建立 | 第41-45页 |
| 3．2．1 基因型对不定芽诱导的影响 | 第41页 |
| 3．2．2 外植体对不定芽诱导的影响 | 第41-42页 |
| 3．2．3 叶位对不定芽诱导的影响 | 第42页 |
| 3．2．4 暗培养天数对不定芽诱导的影响 | 第42-45页 |
| 3．2．5 植物生长调节剂对植株再生的影响 | 第45页 |
| 3．3 月季‘萨蔓莎’间接再生体系的建立 | 第45-50页 |
| 3．3．1 小叶外植体愈伤组织的诱导 | 第45-46页 |
| 3．3．2 假珠芽的发生 | 第46-47页 |
| 3．3．3 可继代增殖愈伤组织的获得 | 第47-49页 |
| 3．3．4 愈伤组织的诱导分化 | 第49页 |
| 3．3．5 悬浮体系的初步建立 | 第49-50页 |
| 3．4 月季‘萨蔓莎’遗传转化体系的建立 | 第50-60页 |
| 3．4．1 叶片对潮霉素的敏感性分析 | 第50-51页 |
| 3．4．2 愈伤组织对潮霉素的敏感性分析 | 第51-53页 |
| 3．4．3 外植体对遗传转化的影响 | 第53-54页 |
| 3．4．4 共培养培养基中盐浓度对愈伤组织遗传转化的影响 | 第54页 |
| 3．4．5 侵染时间对愈伤组织遗传转化的影响 | 第54-55页 |
| 3．4．6 共培养时光照条件对愈伤组织遗传转化的影响 | 第55页 |
| 3．4．7 共培养培养基的pH值对愈伤组织遗传转化的影响 | 第55页 |
| 3．4．8 共培养培养基中AS浓度对愈伤组织遗传转化的影响 | 第55-56页 |
| 3．4．9 菌液浓度、共培养温度和时间对愈伤组织遗传转化的影响 | 第56-58页 |
| 3．4．10 抗性愈伤组织的获得 | 第58页 |
| 3．4．11 抗性愈伤组织的GUS检测和PCR检测 | 第58-60页 |
| 3．5 含ACC氧化酶反义基因愈伤增殖的获得 | 第60-61页 |
| 4 问题与讨论 | 第61-70页 |
| 4．1 月季‘萨蔓莎’两种植株再生系统的比较 | 第61-65页 |
| 4．1．1 再生频率 | 第61-62页 |
| 4．1．2 遗传稳定性 | 第62页 |
| 4．1．3 外植体来源 | 第62-63页 |
| 4．1．4 对选择抗生素的敏感性 | 第63页 |
| 4．1．5 对农杆菌侵染的敏感性 | 第63-65页 |
| 4．2 影响月季‘萨蔓莎’愈伤组织遗传转化的因素 | 第65-66页 |
| 4．3 GUS基因瞬间表达和稳定转化之间的关系 | 第66-67页 |
| 4．4 关于本研究中转化系统的转化效率 | 第67-68页 |
| 4．5 本研究的下一步工作 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 附录 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
