| 摘要 | 第1-7页 |
| 关键词 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| Key words | 第10-11页 |
| 英文缩略符号表 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-22页 |
| ·磷脂与磷脂酶 | 第13-18页 |
| ·磷脂酶D(PLD)的发现及其基因的克隆 | 第14页 |
| ·PLD 的结构特点 | 第14-16页 |
| ·酶反应特点 | 第16页 |
| ·PLD 的生理作用 | 第16-17页 |
| ·PLD 基因在植物育种上的应用潜力 | 第17-18页 |
| ·外源DNA 导入技术研究 | 第18-22页 |
| ·外源基因转化方法 | 第19页 |
| ·外源DNA 转化体的验证 | 第19-21页 |
| ·分子水平的验证 | 第20页 |
| ·同工酶电泳技术 | 第20-21页 |
| ·转基因技术在小麦遗传育种中的应用及展望 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的意义 | 第22页 |
| 2. 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·研究材料 | 第22-24页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·农杆菌菌株和质粒 | 第22-23页 |
| ·实验试剂 | 第23-24页 |
| ·小麦DNA 提取 | 第23页 |
| ·质粒提取 | 第23-24页 |
| ·电泳缓冲液配制 | 第24页 |
| ·Southern杂交 | 第24页 |
| ·研究方法 | 第24-33页 |
| ·目的基因转化 | 第24-25页 |
| ·PLD?反义基因农杆菌的活化与培养 | 第24-25页 |
| ·小麦的穗茎注射法处理 | 第25页 |
| ·卡那霉素的有效筛选浓度 | 第25页 |
| ·转化株系的PCR 检测 | 第25-28页 |
| ·小麦DNA 提取 | 第25-26页 |
| ·质粒DNA 碱法提取 | 第26-27页 |
| ·特异PCR 扩增 | 第27-28页 |
| ·PCR 扩增结果的电泳检测 | 第28页 |
| ·PCR-Southern检测 | 第28-29页 |
| ·醇溶蛋白电泳 | 第29-30页 |
| ·HMW-GS 电泳 | 第30-32页 |
| ·样品提取 | 第30页 |
| ·凝胶电泳方法 | 第30-32页 |
| ·转基因植株的耐盐性鉴定 | 第32页 |
| ·水培实验 | 第32页 |
| ·土培实验 | 第32页 |
| ·材料种植与性状调查 | 第32-33页 |
| ·数据分析 | 第33页 |
| 3. 结果与分析 | 第33-45页 |
| ·反义PLD?基因转化后代的卡那霉素筛选 | 第33-34页 |
| ·反义PLD?基因转化体的特异PCR 扩增 | 第34-36页 |
| ·反义PLD?基因转化体的PCR-Southern杂交 | 第36页 |
| ·反义PLD?基因转化株系与受体在蛋白质水平上的差异 | 第36-39页 |
| ·醇溶蛋白 | 第36-37页 |
| ·HMW-GS 组成 | 第37-39页 |
| ·转基因株系的抗性表现 | 第39-41页 |
| ·耐盐性 | 第39-41页 |
| ·耐盐指数 | 第39-40页 |
| ·存活率 | 第40-41页 |
| ·白粉病抗性 | 第41页 |
| ·反义PLD?转基因株系的性状表现 | 第41-45页 |
| ·品质特性 | 第41-43页 |
| ·蛋白质特性 | 第41-42页 |
| ·淀粉特性 | 第42-43页 |
| ·农艺性状 | 第43-45页 |
| ·转基因株系的雄性不育性表现 | 第45页 |
| 4. 讨论 | 第45-48页 |
| ·穗茎注射法应用的可行性 | 第45-46页 |
| ·生物基因表达的反义调控 | 第46页 |
| ·转反义PLD?基因小麦检测方法的评价 | 第46-47页 |
| ·卡那霉素筛选 | 第46页 |
| ·特异PCR 扩增 | 第46页 |
| ·PCR-Southern杂交 | 第46-47页 |
| ·转基因小麦的耐盐筛选 | 第47页 |
| ·转基因株系品质性状的变化 | 第47页 |
| ·转基因株系农艺性状的变异 | 第47-48页 |
| ·转基因株系雄性不育性的出现 | 第48页 |
| ·磷脂酶作用机理的进一步探讨 | 第48页 |
| ·进一步的研究设想 | 第48页 |
| 5. 结论 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第61-62页 |