| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 1.胰岛素样生长因子(IGFs)系统 | 第14-25页 |
| ·胰岛素样生长因子(IGFs)系统 | 第14-16页 |
| ·IGF-Ⅰ的生物学功能 | 第16-21页 |
| ·IGF-Ⅱ的生物学功能 | 第21-22页 |
| ·IGFBP的调节及生物学功能 | 第22-23页 |
| ·动物胚胎发育过程中IGFs的表达 | 第23-25页 |
| 2.IGF-Ⅰ与其它生长因子和激素的关系 | 第25-30页 |
| ·胰岛素与IGF的关系 | 第25-27页 |
| ·GH与IGF-Ⅰ的关系 | 第27-28页 |
| ·IGF-Ⅰ与IGFBP的关系 | 第28页 |
| ·IGF-Ⅰ与LH，FSH的关系 | 第28-30页 |
| 3.大熊猫的研究 | 第30-33页 |
| ·珍稀动物大熊猫介绍 | 第30页 |
| ·大熊猫的人工繁殖 | 第30-31页 |
| ·圈养大熊猫的繁育问题 | 第31页 |
| ·大熊猫幼仔的育活 | 第31页 |
| ·我国大熊猫的保护工作 | 第31-33页 |
| 4.本课题的立论依据及研究内容 | 第33-36页 |
| ·立论依据 | 第33-34页 |
| ·研究内容 | 第34-36页 |
| 第二章 大熊猫IGF-Ⅰ基因的克隆、原核表达、纯化及组织分布研究 | 第36-72页 |
| 前言 | 第36-38页 |
| 1.材料与方法 | 第38-53页 |
| ·实验材料和试剂 | 第38-42页 |
| ·大熊猫IGF-I基因的克隆 | 第42-46页 |
| ·克隆序列的GenBank登录 | 第46页 |
| ·GPIGF-I基因在大肠杆菌中的表达 | 第46-49页 |
| ·融合蛋白的免疫学活性检测 | 第49-50页 |
| ·免疫组织化学检测 | 第50-51页 |
| ·原位杂交分析 | 第51-52页 |
| ·光学显微镜拍照 | 第52页 |
| ·图像分析 | 第52-53页 |
| 2.结果与分析 | 第53-67页 |
| ·大熊猫IGF-I基因编码框GPIGF-I的克隆 | 第53-54页 |
| ·大熊猫GPIGF-I的测序分析 | 第54-56页 |
| ·大熊猫GPIGF-I的同源性比较分析 | 第56-61页 |
| ·重组表达载体pET-DsbA-GPIGF-I的构建 | 第61页 |
| ·重组质粒pET-DsbA-GPIGF-I的克隆和筛选 | 第61页 |
| ·pET-DsbA-GPIGF-I的表达分析 | 第61页 |
| ·重组表达蛋白的纯化 | 第61-63页 |
| ·重组表达蛋白的免疫原性Western印迹分析 | 第63页 |
| ·大熊猫不同组织免疫组化分析 | 第63页 |
| ·大熊猫不同组织的原位杂交分析 | 第63-65页 |
| ·IOD值的测量及统计学分析 | 第65-67页 |
| 3.讨论 | 第67-72页 |
| 第三章 小熊猫胰岛素样因子(IGF-I)基因的克隆和原核表达 | 第72-91页 |
| 前言 | 第72-73页 |
| 1.材料、试剂、仪器、方法 | 第73-74页 |
| 2.结果 | 第74-88页 |
| ·总RNA的提取 | 第74页 |
| ·PCR产物的扩增 | 第74页 |
| ·PCR签定 | 第74-75页 |
| ·小熊猫IGF-I基因编码区序列cDNA的测序 | 第75页 |
| ·序列分析 | 第75-76页 |
| ·同源性比较分析 | 第76-81页 |
| ·IGF-I基因在大熊猫、小熊猫及其它物种中的进化分析 | 第81-82页 |
| ·重组表达载体pET-DsbA-RPIGF-I的构建 | 第82页 |
| ·重组质粒pET-DsbA-RPIGF-I的克隆和筛选 | 第82页 |
| ·pET-DsbA-RPIGF-I的表达分析 | 第82-83页 |
| ·重组表达蛋白的纯化 | 第83-84页 |
| ·重组表达蛋白的免疫原性Western印迹分析 | 第84页 |
| ·小熊猫不同组织免疫组化分析 | 第84页 |
| ·小熊猫不同组织的原位杂交分析 | 第84-86页 |
| ·IOD值的测量及统计学分析 | 第86-88页 |
| 3.讨论 | 第88-91页 |
| 第四章 川金丝猴和东北虎IGF-I基因的克隆、分析与原核表达 | 第91-108页 |
| 前言 | 第91-92页 |
| 1.材料和材料、试剂、仪器、方法 | 第92-93页 |
| 2.结果与分析 | 第93-106页 |
| ·总RNA提取及RT-PCR的电泳结果 | 第93-94页 |
| ·重组克隆质粒的PCR鉴定 | 第94页 |
| ·川金丝猴和东北虎IGF-I基因编码区序列cDNA的测序 | 第94-95页 |
| ·序列分析 | 第95页 |
| ·川金丝猴IGF-I的序列 | 第95-96页 |
| ·东北虎的IGF-I的序列 | 第96-97页 |
| ·川金丝猴、东北虎的IGF-I与其它物种间的同源分析 | 第97-103页 |
| ·川金丝猴、东北虎与其它物种间的进化关系 | 第103-104页 |
| ·重组表达载体pET-DsbA-MIGF-I和pET-DsbA-TIGF-I的构建 | 第104页 |
| ·重组表达质粒的克隆和筛选 | 第104页 |
| ·pET-DsbA-MIGF-I和pET-DsbA-TIGF-I的表达分析 | 第104页 |
| ·重组表达蛋白的纯化 | 第104-106页 |
| ·重组表达蛋白的免疫原性Western印迹分析 | 第106页 |
| 3.讨论 | 第106-108页 |
| 全文参考文献 | 第108-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
