中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
英文缩略语 | 第14-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-36页 |
第一章 Na~+/H~+逆向转运蛋白及其与植物耐盐性的关系 | 第15-22页 |
1. Na~+的外排 | 第15-17页 |
2. Na~+在液泡内的区隔化 | 第17-19页 |
3.N a~+/H~+逆向转运蛋白的氨基酸序列相似性及功能保守性 | 第19-22页 |
第二章 农杆菌介导的油菜转基因研究进展 | 第22-32页 |
1. 根瘤农杆菌介导的基因转化机理 | 第23-25页 |
·Ti 质粒载体系统 | 第23页 |
·T–DNA 的转移及其相关基因 | 第23-25页 |
·T-DNA | 第23-24页 |
·Chv 基因、Cel 基因和Att 基因 | 第24页 |
·Vir 基因 | 第24-25页 |
2. 影响转化频率的主要因素 | 第25-28页 |
·植物的基因型 | 第25页 |
·外植体及其生理状态 | 第25-26页 |
·农杆菌菌株对转化效果的影响 | 第26-27页 |
·外植体与农杆菌共培养条件对转化效果的影响 | 第27-28页 |
·抗生素对转化的影响 | 第28页 |
3. 转基因植株的筛选 | 第28-29页 |
4. 芸苔属植物转基因的遗传与表达 | 第29页 |
5. 国内外主要研究现状 | 第29-31页 |
6. 存在的主要问题及展望 | 第31-32页 |
第三章 转基因植株鉴定 | 第32-36页 |
1. 外源基因整合的鉴定 | 第32-33页 |
2. 外源基因转录水平的鉴定 | 第33-34页 |
3. 外源基因表达蛋白的检测 | 第34页 |
4. 报告基因的酶法检测 | 第34-36页 |
第二部分 实验部分 | 第36-69页 |
第一章 影响甘蓝型油菜带柄子叶高频率再生植株的研究 | 第36-43页 |
1. 材料与方法 | 第36-38页 |
·供试材料 | 第36页 |
·种子的表面消毒与无菌苗获得 | 第36页 |
·培养基组成 | 第36-37页 |
·不同分化培养基的芽再生实验 | 第37页 |
·不同苗龄的外植体分化 | 第37页 |
·不同预培养处理的芽再生实验 | 第37页 |
·计算方法 | 第37-38页 |
2. 结果与分析 | 第38-41页 |
·不同浓度的生长调节剂对带柄子叶芽苗分化的影响 | 第38-39页 |
·龄对甘蓝型油菜带柄子叶分化的影响 | 第39页 |
·预培养对带柄子叶再生的影响 | 第39-40页 |
·AgNO_3对带柄子叶再生的影响 | 第40页 |
·再生芽的生根与驯化 | 第40-41页 |
3. 讨论 | 第41-43页 |
第二章 新疆甘蓝型油菜下胚轴的组织培养和植株再生研究 | 第43-55页 |
1. 材料与方法 | 第44-46页 |
·材料 | 第44页 |
·方法 | 第44-46页 |
·下胚轴组培体系的建立 | 第44-45页 |
·下胚轴组培过程中玻璃化问题的解决对策 | 第45-46页 |
·不同浓度的激素组合 | 第45页 |
·蔗糖浓度 | 第45页 |
·NH_4~+浓度 | 第45页 |
·不同的封口材料 | 第45页 |
·琼脂浓度 | 第45-46页 |
·诱芽率和玻璃化率的计算方法 | 第46页 |
2. 结果与分析 | 第46-53页 |
·下胚轴组培体系的建立 | 第46-50页 |
·不同浓度的生长调节剂对下胚轴芽苗分化的影响 | 第46-48页 |
·苗龄对甘蓝型油菜下胚轴分化的影响 | 第48页 |
·预培养对下胚轴再生的影响 | 第48-49页 |
·AgNO_3对下胚轴再生的影响 | 第49页 |
·再生芽的增殖、扶壮与生根 | 第49-50页 |
·下胚轴组培过程中玻璃化问题的解决对策 | 第50-53页 |
·不同激素处理对玻璃化的影响 | 第50-51页 |
·不同的蔗糖浓度对玻璃化的影响 | 第51页 |
·NH_4~+浓度对玻璃化的影响 | 第51-52页 |
·不同的封口材料对玻璃化的影响 | 第52页 |
·琼脂浓度对玻璃化的影响 | 第52-53页 |
3. 讨论 | 第53-55页 |
第三章 农杆菌介导 NHX 基因转化甘蓝型油菜的研究 | 第55-69页 |
1. 材料与方法 | 第55-69页 |
·材料 | 第55-56页 |
·方法 | 第56-61页 |
·无菌苗的获得 | 第56页 |
·卡那霉素临界值的确定 | 第56页 |
·农杆菌的培养 | 第56页 |
·菌液浓度及浸染时间的确定 | 第56-57页 |
·外植体最佳生理状况的选择 | 第57页 |
·确定乙酰丁香酮是否添加 | 第57页 |
·农杆菌对数生长期OD_(600)的确定 | 第57页 |
·再生植株的分子生物学检测 | 第57-61页 |
·PCR 检测 | 第57-61页 |
·阳性质粒pBIN438/SsNHX 的小量提取 | 第57页 |
·油菜基因组的提取 Michaels 法 | 第57-58页 |
·采用紫外分光光度计法对所提取的基因组DNA 定量 | 第58-61页 |
·斑点印迹杂交 | 第58-59页 |
·Southern 杂交 | 第59-61页 |
2. 结果与分析 | 第61-66页 |
·卡那霉素浓度对带柄子叶分化的影响 | 第61-62页 |
·菌液浓度与浸染时间对转化的影响 | 第62-63页 |
·外植体生理状况对转化的影响 | 第63页 |
·乙酰丁香酮(AS)对转化的影响 | 第63-64页 |
·对数期菌液浓度对卡那抗性绿苗得率的影响 | 第64-65页 |
·PCR、点杂交及 PCR-SOUTHERN 检测 | 第65-66页 |
3. 讨论 | 第66-69页 |
附录1:油菜再生体系流程及成苗图片 | 第69-73页 |
·带柄子叶组培再生体系图片 | 第69-70页 |
·下胚轴的组培再生体系图片 | 第70-71页 |
·转基因与非转基因油菜的炼苗、移栽 | 第71-73页 |
结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
个人简历 | 第86-87页 |