| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-24页 |
| 1 引言 | 第11-13页 |
| 2 国内外研究现状 | 第13-23页 |
| ·应力、应变对成骨细胞的影响 | 第13-17页 |
| ·1 应力、应变对细胞活性及结构的影响 | 第13-14页 |
| ·2 应力、应变对细胞功能状态的影响 | 第14-16页 |
| ·3 应力、应变对骨代谢激素及对细胞因子的调节 | 第16-17页 |
| ·应力、应变对骨组织影响的基础及作用机制 | 第17-19页 |
| ·1 细胞结构的张力完整性 | 第17-18页 |
| ·2 力学信号感受途径 | 第18页 |
| ·3 细胞信号转导机制 | 第18-19页 |
| ·蛋白质组学中的两种重要技术 | 第19-21页 |
| ·1 蛋白质组学研究中的核心技术-双向电泳 | 第19-20页 |
| ·2 蛋白质组学研究中的支撑技术-质谱技术 | 第20-21页 |
| ·组织工程中细胞的三维培养 | 第21-23页 |
| 3 研究内容及实验设计 | 第23-24页 |
| ·研究内容 | 第23页 |
| ·实验设计 | 第23-24页 |
| 第二章 四点弯曲细胞加载装置的调试与使用 | 第24-30页 |
| 1 四点弯曲单向应变加载装置工作原理 | 第24-28页 |
| ·四点弯曲单向应变加载装置的力学模型 | 第25页 |
| ·控制电路 | 第25-27页 |
| ·仪器的标定及消毒 | 第27-28页 |
| ·1 仪器的标定 | 第27页 |
| ·2 仪器的消毒 | 第27-28页 |
| 2 实验中应变大小及加载时间的选择 | 第28页 |
| 3 结果与讨论 | 第28-29页 |
| 4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 不同应变对成骨细胞增殖活性及功能状态的影响 | 第30-51页 |
| 1 材料与方法 | 第30页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·1 动物 | 第30页 |
| ·2 试剂 | 第30页 |
| ·3 仪器 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-35页 |
| ·1 成骨细胞的原代培养 | 第30-31页 |
| ·2 成骨细胞的纯化 | 第31页 |
| ·3 成骨细胞的鉴定 | 第31-33页 |
| ·4 c-fos的免疫组化染色 | 第33-34页 |
| ·5 细胞增殖测定 | 第34页 |
| ·6 ALP定量测定 | 第34-35页 |
| ·7 Ⅰ型胶原定量测定 | 第35页 |
| 2 结果 | 第35-43页 |
| ·成骨细胞培养 | 第35-37页 |
| ·成骨细胞的鉴定 | 第37-40页 |
| ·1 ALP钙-钴法染色 | 第37-38页 |
| ·2 Ⅰ型胶原免疫组化染色 | 第38-39页 |
| ·3 茜素红框化结节染色 | 第39-40页 |
| ·4 HE染色 | 第40页 |
| ·c-fos的免疫组化染色 | 第40-41页 |
| ·细胞增殖测定 | 第41页 |
| ·ALP定量测定 | 第41-43页 |
| ·Ⅰ型胶原定量测定 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-49页 |
| 4 本章小结 | 第49-51页 |
| 第四章 2-DE对应变作用下成骨细胞蛋白质组的初步研究 | 第51-67页 |
| 1 材料与方法 | 第51-55页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·1 动物 | 第51页 |
| ·2 试剂 | 第51页 |
| ·3 设备 | 第51-52页 |
| ·4 图像分析软件 | 第52页 |
| ·应变作用下成骨细胞蛋白质组2-DE谱图的制备和分析 | 第52-55页 |
| ·1 实验方法 | 第52-55页 |
| (1) 液体的配制 | 第52页 |
| (2) 蛋白质样品制备 | 第52-53页 |
| (3) 蛋白定量 | 第53页 |
| (4) 第一向固相pH梯度等电聚焦 | 第53-54页 |
| (5) 平衡 | 第54页 |
| (6) 第二向垂直平板SDS-PAGE | 第54页 |
| (7) 染色 | 第54页 |
| (8) 图像扫描与分析 | 第54-55页 |
| 2 结果 | 第55-59页 |
| ·蛋白分离提取的离心条件选择 | 第55页 |
| ·蛋白质提取率 | 第55页 |
| ·CHAPS的选择 | 第55-56页 |
| ·未加载和应变作用下成骨细胞蛋白质组谱图 | 第56-57页 |
| ·应变作用下成骨细胞蛋白质组的表达变化 | 第57-59页 |
| 3 讨论 | 第59-66页 |
| 4 本章小结 | 第66-67页 |
| 第五章 鼠成骨细胞的三维培养 | 第67-75页 |
| 1 材料与方法 | 第67-69页 |
| ·材料与方法 | 第67-68页 |
| ·1 动物 | 第67页 |
| ·2 支架材料 | 第67页 |
| ·3 试剂 | 第67页 |
| ·4 仪器 | 第67-68页 |
| ·实验方法 | 第68-69页 |
| ·1 细胞培养 | 第68页 |
| ·2 RCCS的准备 | 第68页 |
| ·3 CHA的准备 | 第68页 |
| ·4 细胞与材料的复合 | 第68页 |
| ·5 茜素红染色 | 第68页 |
| ·6 MTT比色法鉴定成骨细胞增殖情况 | 第68-69页 |
| ·7 ALP定量测定 | 第69页 |
| 2 结果 | 第69-71页 |
| ·茜素红染色 | 第69页 |
| ·MTT比色法鉴定成骨细胞增殖情况 | 第69-71页 |
| ·ALP定量测定 | 第71页 |
| 3 讨论 | 第71-74页 |
| 4 本章小结 | 第74-75页 |
| 第六章 总结及后续工作建议 | 第75-78页 |
| 1 总结 | 第75-77页 |
| 2 后续工作建议 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 综述 | 第86-91页 |
