| 第一章 前言 | 第1-25页 |
| ·研究的目的和意义 | 第13-17页 |
| ·环境胁迫与植物的胁迫应答 | 第13页 |
| ·几种植物胁迫应答激素、转录因子和顺式作用元件在植物胁迫应答中的作用 | 第13-16页 |
| ·研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| ·乙烯和ERF转录因子在植物胁迫应答中的研究进展 | 第17-23页 |
| ·乙烯信号转导途径的研究进展 | 第17-19页 |
| ·ERF转录因子在植物胁迫应答中的研究进展 | 第19-21页 |
| ·乙烯和ERF转录因子在植物胁迫应答中的功能 | 第21-23页 |
| ·研究内容和方法 | 第23-25页 |
| ·研究内容和方法 | 第23-24页 |
| ·研究的技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 LeERF2在植物非生物胁迫应答中的功能分析 | 第25-50页 |
| 第一节 LeERF2在转基因烟草非生物胁迫应答中的功能 | 第25-31页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·实验试剂 | 第25页 |
| ·常用溶液配制 | 第25页 |
| ·培养基的配置 | 第25页 |
| ·一般试剂的配置 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·种子消毒和播种 | 第25-26页 |
| ·LoERF2转基因烟草在盐(NaCl)胁迫条件下萌发的实验方案 | 第26页 |
| ·LeERF2转基因烟草在渗透胁迫(Mannitol)条件下萌发的实验方案 | 第26页 |
| ·LeERF2转基因烟草在渗透胁迫(Glucose)条件下萌发的实验方案 | 第26页 |
| ·LeERF2转基因烟草幼苗在NACL胁迫下根生长的实验方案 | 第26页 |
| ·LeERF2转基因烟草成株低温胁迫实验方案 | 第26-27页 |
| ·结果分析 | 第27-31页 |
| ·LeERF2转基因烟草在盐(NaCl)胁迫条件下萌发的实验结果 | 第27页 |
| ·LeERF2转基因烟草在渗透胁迫(Mannitol)条件下萌发的实验结果 | 第27-28页 |
| ·LeERF2转基因烟草在渗透胁迫(Glucose)条件下萌发的实验结果 | 第28-29页 |
| ·LeERF2转基因烟草在NaCl胁迫下根生长实验实结果 | 第29页 |
| ·LeERF2转基因烟草低温胁迫实验的结果 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 第二节 LeERF2的原核表达及其DNA结合特性的分析 | 第31-44页 |
| ·材料与方法 | 第31页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·酶及试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·常用溶液配制 | 第31-33页 |
| ·培养基配制 | 第31-32页 |
| ·一般溶液的配制 | 第32页 |
| ·实验试剂配制 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-41页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第33页 |
| ·pET28a-LeERF2表达载体的示意图 | 第33页 |
| ·从质粒载体上扩增所需目的片段(50μL体系) | 第33-34页 |
| ·PCP产物的回收及酶切 | 第34-35页 |
| ·琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·连接反应 | 第36页 |
| ·重组子pET28a-LeERF2导入大肠杆菌DH10B | 第36页 |
| ·pET28a-LeERF2阳性克隆的鉴定 | 第36-37页 |
| ·将鉴定正确的pET28a-LeERF2质粒导入表达菌株BL21 | 第37页 |
| ·对pET28a-LeERF2的BL21转化克隆进行菌液PCR鉴定 | 第37页 |
| ·LeERF2蛋白的原核诱导表达及纯化 | 第37-39页 |
| ·LeERF2蛋白电泳迁移率实验 | 第39-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-44页 |
| ·pET28a-LeERF2阳性克隆的菌液PCR鉴定 | 第41页 |
| ·转化了pET28a-LeERF2的BL21克隆的菌液PCR鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·LeERF2融合蛋白的原核诱导表达及纯化鉴定 | 第42-43页 |
| ·LeERF2蛋白电泳迁移率(EMSA)实验结果 | 第43-44页 |
| 第三节 Northern杂交分析LeERF2对下游基因表达的调控作用 | 第44-50页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·实验试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·常用溶液配制 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·总RNA的提取 | 第45页 |
| ·甲醛凝胶电泳 | 第45-46页 |
| ·转膜 | 第46页 |
| ·Northern杂交 | 第46-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第三章 JERF2在植物非生物胁迫应答中的功能分析 | 第50-59页 |
| 第一节 JERF2在植物非生物胁迫应答中的功能 | 第50-56页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·实验试剂 | 第50页 |
| ·常用溶液配制 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·种子消毒和播种 | 第50页 |
| ·JERF2转基因烟草在盐(NaCl)胁迫条件下的萌发实验方案 | 第50-51页 |
| ·JERF2转基因烟草在渗透胁迫(Mannitol)条件下的萌发实验方案 | 第51页 |
| ·JERP2转基因烟草在ABA处理下的萌发实验 | 第51页 |
| ·JERF2转基因烟草植株渗透胁迫实验 | 第51页 |
| ·JERF2转基因烟草植株盐胁迫耐性实验方案 | 第51页 |
| ·JERF2转基因烟草三重反应实验方法 | 第51-52页 |
| ·实验结果与分析 | 第52-56页 |
| ·JERF2转基因烟草在盐(NaCl)胁迫条件下萌发的实验结果 | 第52页 |
| ·JERF2l转基因烟草在渗透协迫(MAnnitol)条件下的萌发实验结果 | 第52-53页 |
| ·JERF2转基因烟草在ABA处理下萌发实验的结果 | 第53页 |
| ·JERF2转基因烟草植株渗透胁迫实验结果 | 第53-54页 |
| ·JERF2转基因烟草耐盐性实验结果 | 第54-55页 |
| ·JERF2转基因烟草三重反应实验结果 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 第二节 Northern杂交分析JERF2对下游基因表达的调控作用 | 第56-59页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·实验试剂 | 第56页 |
| ·常用溶液配制 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-57页 |
| ·总RNA的提取 | 第56页 |
| ·转膜 | 第56页 |
| ·放射性探针的制备 | 第56页 |
| ·Northern杂交 | 第56-57页 |
| ·实验结果与分析 | 第57页 |
| ·小结 | 第57-59页 |
| 讨论 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |
