致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
1 文献综述 | 第9-25页 |
·信息化合物 | 第9-10页 |
·昆虫性信息素的性质与作用 | 第9页 |
·植物挥发性化合物的性质与作用 | 第9-10页 |
·昆虫的化学感受器 | 第10-11页 |
·昆虫触角气味结合蛋白的研究进展 | 第11-23页 |
·气味物质的分子结构 | 第13-14页 |
·气味结合蛋白的分子结构 | 第14-16页 |
·气味结合蛋白在触角中的分布 | 第16-18页 |
·气味结合蛋白的生化特性 | 第18-20页 |
·气味结合蛋白的表达时间及其代谢 | 第20页 |
·气味结合蛋白的生理功能 | 第20-22页 |
·气味结合蛋白的研究方法 | 第22-23页 |
·气味嗅觉受体与气味降解酶 | 第23-25页 |
2 引言 | 第25-27页 |
3 材料和方法 | 第27-41页 |
·研究内容和技术路线 | 第27-29页 |
·研究内容 | 第27页 |
·研究拟解决的关键问题 | 第27页 |
·研究的技术路线 | 第27-29页 |
·烟夜蛾GOBP2的cDNA克隆 | 第27页 |
·烟夜蛾触角GOBP2基因在大肠杆菌中的表达 | 第27-29页 |
·材料 | 第29页 |
·供试昆虫 | 第29页 |
·菌种及质粒 | 第29页 |
·主要试剂及工具酶 | 第29页 |
·方法 | 第29-41页 |
·触角RNA提取 | 第29-30页 |
·总RNA提取步骤 | 第29-30页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
·RT-PCR | 第30-32页 |
·引物设计 | 第30-31页 |
·cDNA第一链的合成 | 第31页 |
·PCR扩增 | 第31-32页 |
·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第32页 |
·PCR产物纯化 | 第32页 |
·质粒的连接 | 第32-33页 |
·感受态细胞的制备和质粒的转化 | 第33-34页 |
·感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第33页 |
·连接载体的转化 | 第33-34页 |
·阳性克隆的筛选 | 第34页 |
·质粒DNA的提取 | 第34-35页 |
·连接质粒的酶切鉴定 | 第35-36页 |
·序列测定和分析 | 第36页 |
·重组表达质粒的构建 | 第36-38页 |
·重组质粒pGEM/Hass-GOBP2的酶切和目的片段的回收 | 第36-37页 |
·PET-30a(+)质粒的酶切和回收 | 第37页 |
·目的片段和表达载体片段的连接 | 第37页 |
·重组质粒的转化 | 第37-38页 |
·阳性克隆的筛选 | 第38页 |
·序列测定 | 第38页 |
·重组质粒的表达与检测 | 第38-41页 |
·重组质粒在E.coli BL21中的表达 | 第38页 |
·表达产物的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 | 第38-39页 |
·Western-blot分析 | 第39-41页 |
4 结果与分析 | 第41-47页 |
·GOBP2基因的扩增和克隆 | 第41-42页 |
·序列测定和分析 | 第42-45页 |
·烟夜蛾触角普通气味结合蛋白2基因原核表达载体的构建 | 第45页 |
·序列测定 | 第45页 |
·烟夜蛾GOBP2基因在大肠杆菌中的表达 | 第45-47页 |
5 结论与讨论 | 第47-50页 |
·结论 | 第47页 |
·讨论 | 第47-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
英文摘要 | 第59-60页 |