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烟夜蛾触角普通气味结合蛋白2cDNA的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达

致谢第1-7页
摘要第7-9页
1 文献综述第9-25页
   ·信息化合物第9-10页
     ·昆虫性信息素的性质与作用第9页
     ·植物挥发性化合物的性质与作用第9-10页
   ·昆虫的化学感受器第10-11页
   ·昆虫触角气味结合蛋白的研究进展第11-23页
     ·气味物质的分子结构第13-14页
     ·气味结合蛋白的分子结构第14-16页
     ·气味结合蛋白在触角中的分布第16-18页
     ·气味结合蛋白的生化特性第18-20页
     ·气味结合蛋白的表达时间及其代谢第20页
     ·气味结合蛋白的生理功能第20-22页
     ·气味结合蛋白的研究方法第22-23页
   ·气味嗅觉受体与气味降解酶第23-25页
2 引言第25-27页
3 材料和方法第27-41页
   ·研究内容和技术路线第27-29页
     ·研究内容第27页
     ·研究拟解决的关键问题第27页
     ·研究的技术路线第27-29页
       ·烟夜蛾GOBP2的cDNA克隆第27页
       ·烟夜蛾触角GOBP2基因在大肠杆菌中的表达第27-29页
   ·材料第29页
     ·供试昆虫第29页
     ·菌种及质粒第29页
     ·主要试剂及工具酶第29页
   ·方法第29-41页
     ·触角RNA提取第29-30页
       ·总RNA提取步骤第29-30页
       ·琼脂糖凝胶电泳第30页
     ·RT-PCR第30-32页
       ·引物设计第30-31页
       ·cDNA第一链的合成第31页
       ·PCR扩增第31-32页
       ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测第32页
     ·PCR产物纯化第32页
     ·质粒的连接第32-33页
     ·感受态细胞的制备和质粒的转化第33-34页
       ·感受态细胞的制备(CaCl_2法)第33页
       ·连接载体的转化第33-34页
     ·阳性克隆的筛选第34页
     ·质粒DNA的提取第34-35页
     ·连接质粒的酶切鉴定第35-36页
     ·序列测定和分析第36页
     ·重组表达质粒的构建第36-38页
       ·重组质粒pGEM/Hass-GOBP2的酶切和目的片段的回收第36-37页
       ·PET-30a(+)质粒的酶切和回收第37页
       ·目的片段和表达载体片段的连接第37页
       ·重组质粒的转化第37-38页
       ·阳性克隆的筛选第38页
     ·序列测定第38页
     ·重组质粒的表达与检测第38-41页
       ·重组质粒在E.coli BL21中的表达第38页
       ·表达产物的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测第38-39页
       ·Western-blot分析第39-41页
4 结果与分析第41-47页
   ·GOBP2基因的扩增和克隆第41-42页
   ·序列测定和分析第42-45页
   ·烟夜蛾触角普通气味结合蛋白2基因原核表达载体的构建第45页
   ·序列测定第45页
   ·烟夜蛾GOBP2基因在大肠杆菌中的表达第45-47页
5 结论与讨论第47-50页
   ·结论第47页
   ·讨论第47-50页
参考文献第50-59页
英文摘要第59-60页

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