| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-28页 |
| 1 转基因植物的研究及其产业化进展 | 第11-16页 |
| ·转基因植物的优越性 | 第11-12页 |
| ·植物的遗传转化方法 | 第12页 |
| ·转基因植物研究进展 | 第12-14页 |
| ·抗虫基因工程 | 第12-13页 |
| ·抗病基因工程 | 第13页 |
| ·抗逆基因工程 | 第13页 |
| ·品质性状的改良 | 第13-14页 |
| ·转基因生物反应器 | 第14页 |
| ·转基因植物产业化现状 | 第14-16页 |
| ·全球转基因植物产业化概况 | 第14-15页 |
| ·转基因植物带来的效益 | 第15-16页 |
| ·转基因植物领域中存在的问题 | 第16页 |
| 2 植物基因工程疫苗的研究进展 | 第16-23页 |
| ·转基因植物疫苗的表达系统 | 第17-19页 |
| ·稳定整合表达系统 | 第17-18页 |
| ·土壤农杆菌介导的遗传转化 | 第17-18页 |
| ·外源DNA直接导入法 | 第18页 |
| ·瞬时表达系统 | 第18-19页 |
| ·双链DNA植物病毒载体 | 第18-19页 |
| ·单链DNA植物病毒载体 | 第19页 |
| ·单链RNA植物病毒 | 第19页 |
| ·反转录病毒载体 | 第19页 |
| ·几种主要转基因植物疫苗的研究现状 | 第19-21页 |
| ·乙肝表面抗原 | 第20页 |
| ·耐热的大肠杆菌肠毒素B亚基 | 第20-21页 |
| ·霍乱病毒B亚基 | 第21页 |
| ·诺沃克病毒外壳蛋白 | 第21页 |
| ·麻疹病毒血凝素蛋白 | 第21页 |
| ·待解决的问题 | 第21-23页 |
| 3 乙肝表面抗原(HBSAg)分子生物学与乙肝疫苗的研究概况 | 第23-27页 |
| ·乙肝病毒(HBV)与乙肝表面抗原(HBsAg)分子生物学 | 第23-25页 |
| ·乙肝病毒(HBV)分子生物学 | 第23-24页 |
| ·乙肝表面抗原(HBSAg)分子生物学 | 第24-25页 |
| ·目前生产乙肝疫苗的主要生产系统 | 第25-27页 |
| ·酵母系统表达的乙肝疫菌 | 第25-26页 |
| ·哺乳动物细胞表达系统表达的乙肝疫苗 | 第26页 |
| ·重组痘苗系统表达的乙肝疫苗 | 第26-27页 |
| 4 本研究的目的、意义和研究内容 | 第27-28页 |
| ·研究目的及意义 | 第27页 |
| ·研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 试验材料与方法 | 第28-38页 |
| 1 试验材料 | 第28-30页 |
| ·血清 | 第28页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·质粒及菌株 | 第28页 |
| ·引物 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·细菌培养基 | 第28页 |
| ·植物培养基 | 第28-29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·溶液配方 | 第29-30页 |
| ·质粒提取溶液 | 第29页 |
| ·感受态细胞制备溶液 | 第29-30页 |
| 2 试验方法 | 第30-38页 |
| ·HBsAg基因的扩增: | 第30-31页 |
| ·乙肝患者血清检测 | 第30页 |
| ·HBV DNA提取 | 第30-31页 |
| ·HBsAg的扩增 | 第31页 |
| ·重组质粒pUC19-HBsAg的构建 | 第31-35页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第31页 |
| ·PCR产物和pUC19质粒的粘末端处理 | 第31-32页 |
| ·HBsAg基因与pUC19的连接 | 第32-33页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第33页 |
| ·阳性重组质粒pUC19-HBsAg的提取 | 第33-34页 |
| ·阳性重组质粒pUC19-HBsAg的鉴定 | 第34-35页 |
| ·阳性重组质粒pUC19-HBsAg的酶切鉴定 | 第34页 |
| ·阳性重组质粒pUC19-HBsAg的PCR鉴定 | 第34-35页 |
| ·阳性重组质粒pUC19-HBsAg的序列测定与分析 | 第35页 |
| ·pBI121-HBsAg基因植物表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·根癌农杆菌的转化 | 第36-37页 |
| ·农杆菌LBA4404感受态的制备 | 第36页 |
| ·冻融法转化农杆菌LBA4404 | 第36-37页 |
| ·农杆菌LBA4404阳性克隆的鉴定 | 第37页 |
| ·农杆菌LBA4404阳性克隆的酶切鉴定 | 第37页 |
| ·农杆菌LBA4404阳性克隆的PCR鉴定 | 第37页 |
| ·烟草的转化 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第38-47页 |
| ·乙肝患者血清检测 | 第38页 |
| ·HBsAg基因的扩增 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pUC19-HBsAg的构建 | 第39-43页 |
| ·HBsAg基因植物表达载体的构建 | 第43-46页 |
| ·烟草转化与再生 | 第46-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-49页 |
| ·关于引物中的Kozak序列 | 第47页 |
| ·HBsAg基因的测序结果 | 第47-48页 |
| ·HBsAg基因植物表达载体构建 | 第48-49页 |
| 第五章 小结与展望 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第49页 |
| ·展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
