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L-异亮氨酸高产菌的选育及其发酵条件研究

第一章 绪论第1-32页
   ·引言第16页
   ·L-异亮氨酸结构及理化性质第16-17页
   ·L-异亮氨酸的用途第17页
     ·食品方面第17页
     ·医药方面第17页
   ·L-片亮氨酸生产方法及生产概况第17-18页
     ·L-异亮氨酸生产方法第17-18页
       ·添加前体物发酵法第17-18页
       ·直接发酵法第18页
     ·L-异亮氨酸生产概况第18页
   ·L-异亮氨酸的生物合成途径及调节机制第18-21页
     ·L-异亮氨酸的生物合成途径第18-19页
     ·L-异亮氨酸生物合成的代谢调节机制第19-20页
     ·L-异亮氨酸产生菌应具备的生化特征第20-21页
   ·L-异亮氨酸产生菌常规育种思路及育种实例第21-24页
     ·L-异亮氨酸产生菌常规育种思路第21-23页
       ·切断或减弱支路代谢第21页
       ·解除菌体自身反馈调节第21-22页
       ·增加前体物的合成第22-23页
       ·切断进一步代谢途径第23页
     ·L-异亮氨酸产生菌育种实例第23-24页
   ·代谢工程与L-异亮氨酸生产菌的构建第24-28页
     ·代谢工程对于氨基酸工程菌构建的具体思路第25-26页
     ·基于代谢工程思路构建L-异亮氨酸高产菌第26-28页
   ·L-异亮氨酸发酵条件控制第28-29页
     ·营养条件的控制第28页
       ·碳源和氮源的影响第28页
       ·无机盐的影响第28页
       ·生长因子的影响第28页
     ·环境条件的控制第28-29页
       ·温度、pH的影响第28-29页
       ·溶氧的影响第29页
   ·菌种保藏第29页
   ·论文立题背景及主要研究内容第29-30页
 参考文献第30-32页
第二章 L-异亮氨酸的测定方法第32-47页
   ·引言第32页
   ·实验材料第32-34页
     ·主要仪器第32-33页
     ·主要溶液第33-34页
       ·纸层析用溶液第33页
       ·化学比色法用溶液第33-34页
   ·实验方法第34-36页
     ·发酵液预处理第34页
     ·发酵液L-异亮氨酸的定性测定第34页
       ·纸层析法第34页
       ·薄层层析法第34页
     ·发酵液L-异亮氨酸的定量测定第34-35页
       ·纸层析-色斑洗脱比色法测定L-异亮氨酸含量第34-35页
       ·化学比色法测定L-异亮氨酸的含量第35页
       ·高速氨基酸分析仪测定L-异亮氨酸含量第35页
     ·研究技术路线第35-36页
   ·结果与讨论第36-45页
     ·发酵液氨基酸的定性测定第36-37页
       ·纸层析法第36页
       ·薄层层析法第36-37页
     ·L-异亮氨酸的定量测定第37-45页
       ·纸层析分离洗脱法第37-40页
       ·化学比色法测定L-异亮氨酸含量第40-43页
       ·高速氨基酸分析仪测定L-异亮氨酸的含量第43-45页
   ·本章小结第45页
 参考文献第45-47页
第三章 L-异亮氨酸产生菌的诱变育种第47-61页
   ·引言第47页
   ·实验材料第47-50页
     ·菌种第47页
     ·主要仪器第47-48页
     ·主要试剂第48-49页
     ·培养基第49-50页
     ·相关溶液第50页
   ·实验方法第50-53页
     ·菌体生长曲线的测定第50-51页
     ·诱变方法第51页
     ·营养缺陷突变株的筛选第51-52页
     ·抗性突变株的检出第52页
     ·初筛、复筛方法第52页
     ·分析方法第52-53页
   ·结果与讨论第53-60页
     ·出发菌株的选择及遗传标记鉴定第53-54页
     ·菌体生长曲线的绘制第54-55页
     ·DES诱变条件的选择第55页
     ·氨基酸缺陷型的选育第55-56页
     ·抗性菌株的选育第56-58页
       ·AEC抗性突变株的筛选第56-57页
       ·α-AB抗性突变株筛选第57-58页
     ·ISW330遗传稳定性测定第58-59页
     ·诱变育种机理分析第59-60页
   ·本章小结第60页
 参考文献第60-61页
第四章 L-异亮氨酸高产菌的原生质体融合育种第61-76页
   ·引言第61页
   ·实验材料第61-63页
     ·菌种第61页
     ·主要仪器第61页
     ·主要试剂第61-62页
     ·培养基第62页
     ·主要溶液第62-63页
   ·实验方法第63-64页
     ·菌体生长曲线的测定第63页
     ·原生质体形成第63页
     ·原生质体再生第63页
     ·原生质体形成率与再生率的计算第63页
     ·原生质体融合方法第63-64页
     ·目的融合子筛选方法第64页
     ·目的融合子摇管初筛第64页
     ·目的融合子摇瓶复筛第64页
     ·遗传稳定性测验第64页
     ·分析方法第64页
   ·结果与讨论第64-73页
     ·亲株生长曲线的测定第64-65页
     ·亲株原生质体的形成与再生第65-69页
       ·不同青霉素浓度处理的亲株对溶菌酶的敏感性第65-66页
       ·青霉素预处理时间第66页
       ·溶菌酶浓度的确定第66-67页
       ·酶解温度的确定第67-68页
       ·酶解时间的确定第68-69页
     ·原生质体融合第69-72页
       ·聚乙二醇(PEO)浓度与融合率的关系第69页
       ·PEG作用时间与融合率的关系第69-70页
       ·Ca~(2+)浓度与融合率的关系第70页
       ·融合温度与融合率的关系第70-71页
       ·pH与融合率的关系第71-72页
     ·融合子的检出和目的融合子的筛选第72页
     ·融合子摇管初筛第72页
     ·融合子摇瓶复筛第72页
     ·目的融合子遗传稳定性测验第72-73页
   ·本章小结第73-74页
 参考文献第74-76页
第五章 L-异亮氨酸摇瓶分批发酵条件的研究第76-93页
   ·引言第76页
   ·实验材料第76-77页
     ·菌种第76页
     ·主要仪器第76页
     ·主要试剂第76-77页
     ·培养基第77页
   ·实验方法第77-78页
     ·菌种活化第77页
     ·种子培养第77页
     ·发酵第77-78页
     ·种子生长曲线的测定第78页
     ·分析方法第78页
   ·结果与讨论第78-90页
     ·种子培养基的优化第78-81页
       ·不同碳氮源组合的对比第78-79页
       ·均匀设计优化种子培养基第79-81页
     ·种子培养条件的确定第81-83页
       ·种子培养基初始pH值的影响第81页
       ·种子培养温度的影响第81-82页
       ·种子培养基装液量试验第82-83页
       ·种子培养时间的确定第83页
     ·发酵培养基优化第83-86页
       ·不同碳源对L-异亮氨酸发酵的影响第83-84页
       ·不同氮源对L-异亮氨酸发酵的影响第84页
       ·发酵培养基的优化第84-86页
     ·发酵条件的优化第86-89页
       ·pH控制方式对发酵的影响第87页
       ·接种量对L-异亮氨酸发酵的影响第87-89页
       ·溶氧对产酸的影响第89页
     ·发酵过程曲线的绘制第89-90页
   ·本章小结第90-91页
 参考文献第91-93页
第六章 7L罐分批发酵动力学的研究第93-120页
   ·引言第93页
   ·实验材料第93-95页
     ·菌种第93页
     ·主要仪器第93页
     ·主要试剂第93-94页
     ·培养基第94页
     ·主要溶液第94-95页
   ·实验方法第95页
     ·种子培养方法第95页
     ·7L罐发酵培养方法第95页
     ·分批发酵动力学模型研究方法第95页
     ·分析方法第95页
   ·结果与讨论第95-105页
     ·溶氧对L-异亮氨酸发酵的影响第95-98页
       ·摇瓶溶氧系数的测定第96页
       ·7L发酵罐溶氧系数的测定第96页
       ·K_La值与发酵罐溶氧的关系第96-97页
       ·K_La值对发酵产酸的影响第97-98页
       ·不同K_La值时的发酵菌体生长曲线第98页
     ·分批发酵过程动力学模型第98-105页
       ·模型的建立第98-100页
       ·遗传算法求解动力学模型参数第100-101页
       ·模型拟合值与实验值的比较第101-103页
       ·模型的适用性研究第103-105页
   ·本章小结第105-106页
   ·附录第106-117页
 参考文献第117-120页
第七章 L-异亮氨酸补料分批发酵的研究第120-134页
   ·引言第120页
   ·实验材料第120-122页
     ·菌种第120-121页
     ·主要仪器第121页
     ·主要试剂第121页
     ·培养基第121-122页
   ·实验方法第122-123页
     ·种子培养第122页
     ·摇瓶补料发酵第122页
     ·7L罐补料分批发酵第122页
     ·分析方法第122页
     ·研究路线第122-123页
   ·结果与讨论第123-131页
     ·摇瓶补料分批发酵的研究第123-127页
       ·不同初糖浓度与L-异亮氨酸积累的关系第123-124页
       ·不同补糖方式对发酵的影响第124-125页
       ·初铵浓度不同与发酵过程一次补铵对发酵的影响第125-126页
       ·不同补铵方式对发酵的影响第126页
       ·全组分补料方式对发酵的影响第126-127页
     ·7L罐补料分批发酵的研究第127-129页
       ·葡萄糖流加方式对发酵的影响第127页
       ·补料分批培养中氮的供给对L-异亮氨酸发酵的影响第127-129页
     ·不同发酵方式的发酵试验结果比较第129-130页
     ·菌株SW0370L-异亮氨酸发酵的最大糖酸转化率第130-131页
   ·本章小结第131页
 参考文献第131-134页
第八章 全文总结与展望第134-138页
   ·全文总结第134-136页
   ·本论文创新点第136-137页
   ·展望第137-138页
致谢第138-139页
攻读博士期间发表论文第139-140页

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