| 第一章 文献综述 | 第1-25页 |
| 一、 木聚糖的结构 | 第9-10页 |
| 二、 木聚糖酶(Xylanase)的分子生物学 | 第10-19页 |
| 1 木聚糖酶分子的结构区域 | 第11-12页 |
| 2 木聚糖酶的酶学生质 | 第12-13页 |
| 3 木聚糖酶基因的克隆 | 第13-15页 |
| 4 木聚糖酶基因在原核生物中的的表达 | 第15-17页 |
| 5 木聚糖酶基因在真核生物中的表达 | 第17-18页 |
| 6 木聚糖酶基因的改造 | 第18-19页 |
| 三、 木聚糖酶的应用 | 第19-21页 |
| 1 在饲料行业上的运用 | 第19页 |
| 2 在造纸工业上的运用 | 第19-20页 |
| 3 在食品和医药行业中的运用 | 第20页 |
| 4 在酿酒行业及其它领域中的应用 | 第20-21页 |
| 四、 巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第21-24页 |
| 1 毕赤酵母表达宿主菌 | 第22页 |
| 2 毕赤酵母表达载体 | 第22页 |
| 3 外源蛋白在毕赤酵母中的表达 | 第22-23页 |
| 4 毕赤酵母表达系统的优化 | 第23-24页 |
| ·目的基因特性的改造 | 第23页 |
| ·启动子的选择 | 第23页 |
| ·糖基化的消除 | 第23-24页 |
| ·提高产物的稳定性 | 第24页 |
| 五、 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第25-43页 |
| 材料 | 第25-27页 |
| 1 菌种和质粒 | 第25页 |
| 2 工具酶 | 第25页 |
| 3 试剂 | 第25-26页 |
| 4 培养基 | 第26-27页 |
| 5 主要仪器 | 第27页 |
| 方法 | 第27-34页 |
| 1 高效表达木聚糖酶基因的重组酵母的构建 | 第27-33页 |
| 2 发酵罐水平重组酵母的高细胞密度发酵 | 第33-34页 |
| 结果 | 第34-40页 |
| 1 表达重组子pPIC9α-xynB的构建 | 第34-37页 |
| 2 木聚糖酶基因xynB在毕赤酵母中的表达 | 第37-40页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第37页 |
| ·毕赤酵母受体菌株的选择 | 第37-38页 |
| ·木聚糖酶高效表达重组酵母的筛选 | 第38-39页 |
| ·重组酵母在3L发酵罐中的细胞高密度发酵 | 第39-40页 |
| 讨论 | 第40-42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 木聚糖酶酶学性质的比较及木聚糖酶解产物的分析 | 第43-61页 |
| 材料 | 第43页 |
| 1 实验材料 | 第43页 |
| 2 主要仪器 | 第43页 |
| 3 溶液和试剂 | 第43页 |
| 方法 | 第43-47页 |
| 1 木聚糖酶样品的制备 | 第43-44页 |
| ·木聚糖酶XYNBa的制备 | 第43页 |
| ·脱糖基化木聚糖酶XYNBb的制备 | 第43-44页 |
| 2 木聚糖酶最适PH和PH稳定性的测定 | 第44页 |
| 3 木聚糖酶最适反应温度和热稳定性的测定 | 第44页 |
| 4 金属离子和相关化学试剂对木聚糖酶活性的影响 | 第44页 |
| 5 木聚糖酶XYNBa及XYNBb反应初速度的测定 | 第44页 |
| 6 木聚糖酶XYNBa及XYNBb K_m值及V_(max)的测定 | 第44-45页 |
| 7 木聚糖酶比活性测定 | 第45页 |
| 8 纤维素酶活性测定 | 第45页 |
| 9 木聚糖酶抗胃蛋白酶及胰蛋白酶能力 | 第45页 |
| 10 木聚糖酶制剂耐热性研究 | 第45-46页 |
| ·干热处理对酶活的影响 | 第45页 |
| ·湿热处理对酶活的影响 | 第45-46页 |
| 11 木聚糖酶贮藏稳定性的研究 | 第46页 |
| 12 木聚糖的酸解 | 第46页 |
| 13 木聚糖定向酶解 | 第46页 |
| 14 酶解产物薄层层析 | 第46页 |
| 15 高压液相色谱测定样品中木寡糖的种类和含量 | 第46-47页 |
| 结果 | 第47-58页 |
| 1 木聚糖酶样品的制备 | 第47-48页 |
| ·木聚糖酶XYNBa的制备 | 第47页 |
| ·木聚糖酶XYNBbb的制备 | 第47-48页 |
| 2 最适pH和pH稳定性的比较 | 第48-49页 |
| 3 最适反应温度和热稳定性的比较 | 第49-50页 |
| 4 对金属离子和相关化学试剂稳定性的比较 | 第50-51页 |
| 5 木聚糖酶反应初速度的测定 | 第51页 |
| 6 木聚糖酶K_m值及V_(max)的比较 | 第51页 |
| 7 木聚糖酶比活性的比较 | 第51-53页 |
| 8 纤维素酶活性测定 | 第53页 |
| 9 木聚糖酶抗胃蛋白酶及胰蛋白酶能力 | 第53页 |
| 10 木聚糖酶制剂耐热性研究 | 第53-54页 |
| ·干热处理对酶活的影响 | 第53页 |
| ·湿热处理对酶活的影响 | 第53-54页 |
| 11 木聚糖酶贮藏稳定性的研究 | 第54页 |
| 12 XYNB、XYNBa、XYNBb酶学性质的比较 | 第54-55页 |
| 13 木聚糖水解效率的分析 | 第55-56页 |
| 14 木聚糖酶解终产物的成分分析 | 第56-58页 |
| 讨论 | 第58-60页 |
| 小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
