| 符号说明 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-15页 |
| 英文摘要 | 第15-22页 |
| 前言 | 第22-26页 |
| 第一部分 ：HBsAg及其与GM－CSF融合表达质粒的构建和鉴定 | 第26-46页 |
| 1． 实验材料 | 第26-28页 |
| 2． 实验方法 | 第28-38页 |
| 3． 实验结果 | 第38-44页 |
| 4． 讨论 | 第44-46页 |
| 第二部分 ：HBsAg及其与GM-CSF融合表达质粒在真核细胞中的表达 | 第46-57页 |
| 1． 实验材料 | 第46-47页 |
| 2． 实验方法 | 第47-52页 |
| （1） 质粒的大量提取 | 第47-48页 |
| （2） 重组质粒转染细胞（阳性脂质体介导的转染法 | 第48-49页 |
| （3） 检测重组质粒转染细胞中HBsAg的表达（ELISA检测法 | 第49页 |
| （4） 检测重组质粒转染细胞中GM-CSF的表达（免疫细胞化学方法 | 第49-50页 |
| （5） 鉴定融合表达蛋白的分子量（SDS－PAGE方法 | 第50-51页 |
| （6） 鉴定融合表达蛋白的抗原特异性（WesternBlot方法 | 第51-52页 |
| 3． 实验结果 | 第52-56页 |
| （1） 重组质粒转染细胞中HBsAg的表达 | 第52-53页 |
| （2） 重组质粒转染细胞中GM－CSF的表达 | 第53-55页 |
| （3） SDS－PAGE检测结果 | 第55页 |
| （4） WesternBlot检测结果 | 第55-56页 |
| 4． 讨论 | 第56-57页 |
| 第三部分 ：HBsAg及其与GM－CSF融合表达质粒DNA免疫BALB／C小鼠诱导特异性免疫应答 | 第57-66页 |
| 1． 实验材料 | 第57-58页 |
| 2． 实验方法 | 第58-60页 |
| （1） 质粒大量提取和定量 | 第58页 |
| （2） 质粒DNA免疫小鼠 | 第58-59页 |
| （3） 抗一HBs检测方法 | 第59页 |
| （4） 小鼠脾细胞的制备 | 第59页 |
| （5） 小鼠脾细胞HBsAg特异性CTL的检测（~51Cr检测法 | 第59-60页 |
| （6） 小鼠脾细胞IL-2、IFN－γ、IL－4分泌水平的检测 | 第60页 |
| 3． 实验结果 | 第60-64页 |
| （1） 质粒纯度和含量测定结果 | 第60-61页 |
| （2） 小鼠血清抗HBs检测结果 | 第61-62页 |
| （3） 小鼠HBsAg特异性CTL活性 | 第62-63页 |
| （4） 小鼠脾细胞体外诱导IL-2的分泌水平 | 第63-64页 |
| （5） 小鼠脾细胞体外诱导IFN－γ的分泌水平 | 第64页 |
| （6） 小鼠脾细胞体外诱导IL－4的分泌水平 | 第64页 |
| 4． 讨论 | 第64-66页 |
| 第四部分 ：HBsAg及其与GM-CSF融合表达质粒DNA免疫HBV转基因小鼠及其病毒清除作用 | 第66-79页 |
| 1． 实验材料 | 第66-67页 |
| 2． 实验方法 | 第67-70页 |
| （1） 质粒大量提取和定量 | 第67页 |
| （2） 质粒DNA免疫HBV转基因小鼠 | 第67页 |
| （3） 小鼠血清HBsAg检测方法 | 第67-68页 |
| （4） 小鼠脾细胞的制备 | 第68页 |
| （5） 小鼠脾细胞IL-2、IFN－γ、IL－4分泌水平的检测 | 第68-69页 |
| （6） 淋巴细胞增殖反应 | 第69页 |
| （7） 免疫组织化学方法检测肝细胞HBsAg的表达 | 第69-70页 |
| （8） 肝脏组织学检查 | 第70页 |
| 3． 实验结果 | 第70-77页 |
| （1） 质粒纯度和含量测定结果 | 第70-71页 |
| （2） 小鼠血清HBsAg检测结果 | 第71-72页 |
| （3） 小鼠脾细胞体外诱导IL-2的分泌水平 | 第72页 |
| （4） 小鼠脾细胞体外诱导IFN－γ的分泌水平 | 第72-73页 |
| （5） 小鼠脾细胞体外诱导IL－4的分泌水平 | 第73页 |
| （6） 小鼠淋巴细胞增殖反应 | 第73-74页 |
| （7） 小鼠肝细胞HBsAg表达水平 | 第74-76页 |
| （8） 小鼠肝脏组织学检查 | 第76-77页 |
| 4． 讨论 | 第77-79页 |
| 全文小结 | 第79-80页 |
| 本课题的创新点 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 文献综述1：GM－CSF增强DNA疫苗免疫效果的研究进展 | 第87-93页 |
| 文献综述2：乙型肝炎病毒转基因小鼠研究现状 | 第93-100页 |
| 文献综述3：DNA疫苗安全性研究现状 | 第100-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第108页 |
