中文摘要 | 第1-8页 |
第一章 前言 | 第8-14页 |
1. λ噬菌体基因组的结构、转录和表达 | 第8-9页 |
2. 研究意义及现状 | 第9-12页 |
3. 研究内容 | 第12页 |
4. 研究方法和技术路线 | 第12-14页 |
第二章 实验材料 | 第14-18页 |
1. 菌株及质粒 | 第14-15页 |
2. 工具酶与试剂 | 第15页 |
3. 主要溶液 | 第15-17页 |
4. 主要仪器 | 第17-18页 |
第三章 实验方法 | 第18-33页 |
第一部分 | 第18-29页 |
1. PCR引进携带突变片段方法构建boxA突变重组质粒 | 第18-23页 |
2. 引进诱变寡核苷酸方法构建boxA突变重组质粒 | 第23-25页 |
3. 体内同源重组 | 第25-26页 |
4. P1噬菌体转导方法将新的单碱基突变引入大肠杆菌染色体 | 第26-28页 |
5. LacZ、galK双报道基因显色分析 | 第28-29页 |
第二部分 | 第29-33页 |
1. 用R17蛋白的RNA结合位点替代N蛋白结合位点boxB | 第29页 |
2. 体内同源重组 | 第29页 |
3. 构建表达R17-N融合蛋白的重组质粒 | 第29-31页 |
4. LacZ、GalK双报道基因分析 | 第31-33页 |
第四章 实验结果 | 第33-51页 |
第一部分 | 第33-44页 |
1. pSH-A18,pSH-A22,pSH-A26,pSH-A30质粒的构建 | 第33-37页 |
2. pSH-A,pSH-A13质粒的构建 | 第37-39页 |
3. 构建携带各种boxA突变体及双报道基因的大肠杆菌新菌株 | 第39-41页 |
4. 构建NusB5突变的大肠杆菌新菌株 | 第41-42页 |
5. 突变导致N蛋白介导的抗转录终止功能丧失 | 第42-44页 |
第二部分 | 第44-51页 |
1. SHb-17菌株的构建 | 第45-46页 |
2. 表达R17-N融合蛋白质粒pSHR17-N的构建 | 第46-49页 |
3. 双报道基因分析系统是筛选RNA结合蛋白的简便方法 | 第49-51页 |
第五章 讨论 | 第51-55页 |
第六章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-65页 |
附录一 | 第65-72页 |
附录二 | 第72-75页 |
致谢 | 第75页 |