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外源基因在家蚕中的插入与表达研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
第一章 转基因蚕研究进展第11-13页
第一节 转基因蚕研究中采用的报告基因第13-49页
 1.1 绿色荧光蛋白第13-14页
 1.2 荧光素酶第14-16页
 1.3 新霉素抗性基因第16页
 1.4 氯霉素乙酰转移酶第16-17页
 1.5 Lac-Z第17-18页
 第二节 外源基因导入蚕的方法第18-26页
  2.1 显微注射法第18-20页
  2.2 精子介导的外源DNA导入法第20-21页
  2.3 基因枪法第21-23页
  2.4 电穿孔法第23页
  2.5 病毒介导法第23-25页
  2.6 脉冲场电泳法第25-26页
 第三节 外源基因向基因组的整合与表达第26-38页
  3.1 启动子第26-29页
  3.2 整合策略第29-34页
  3.3 影响表达的因素第34-38页
 第四节 整合、表达的检测和系统维持第38-49页
  4.1 检测第38-39页
  4.2 转基因蚕个体筛选及系统维持第39-40页
  参考文献第40-49页
第二章 材料和方法第49-66页
 第一节 材料第49-55页
 第二节 方法第55-66页
第三章 新霉素抗性转基因蚕第66-80页
 摘要第66-68页
 第一节 材料和方法第68-70页
  1.1 材料第68页
  1.2 方法第68-70页
 第二节 结果第70-77页
  2.1 质粒的构建第70页
  2.2 质粒pFN转染家蚕Bm-N细胞第70页
  2.3 G418抗性细胞的基因组DNA检测第70页
  2.4 用含新霉素人工饲料饲育筛选转基因蚁蚕第70-75页
  2.5 Neo~R基因在家蚕基因组中的整合检测第75-77页
 第三节 讨论第77-80页
  3.1 质粒的构建第77页
  3.2 实验用含新霉素的人工饲料第77页
  3.3 导入方法第77页
  3.4 以Neo~R为选择标记第77-78页
  参考文献第78-80页
第四章 抗NPV核酶转基因蚕第80-117页
 摘要第80-84页
 第一节 材料和方法第84-87页
  1.1 材料第84-85页
  1.2 方法第85-87页
 第二节 结果第87-111页
  2.1 质粒的构建和导入第87-89页
  2.2 转基因蚕的筛选、继代第89-99页
  2.3 核酶在家蚕基因组的插入表达第99-105页
  2.4 转基因家蚕体内核酶的活性鉴定第105-109页
  2.5 转基因家蚕体内荧光素酶活性的检测第109-111页
 第三节 讨论第111-117页
  3.1 载体的构建第111-112页
  3.2 转基因蚕的筛选和继代第112-113页
  3.3 核酶在家蚕基因组的整合分析第113-114页
  3.4 核酶活性的检测第114-115页
  3.5 核酶对BmNPV的“基因治疗”第115页
  3.6 结语第115-116页
  参考文献第116-117页
第五章 利用同源重组将GFP导入家蚕、整合至Fib-L链第117-134页
 摘要第117-119页
 第一节 材料和方法第119-122页
  1.1 材料第119页
  1.2 方法第119-122页
 第二节 结果第122-131页
  2.1 构建同源重组质粒p2GFP3第122-127页
  2.2 转基因蚕的继代第127页
  2.3 同源重组的检测第127-129页
  2.4 蛋白质的鉴定第129-130页
  2.5 蛋白溶液中GFP的ELASA的鉴定第130-131页
 第三节 讨论第131-134页
 参考文献第134页
第六章 小结第134-140页
研究生期间发表论文第140-141页
致谢第141页

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