中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
第一章 转基因蚕研究进展 | 第11-13页 |
第一节 转基因蚕研究中采用的报告基因 | 第13-49页 |
1.1 绿色荧光蛋白 | 第13-14页 |
1.2 荧光素酶 | 第14-16页 |
1.3 新霉素抗性基因 | 第16页 |
1.4 氯霉素乙酰转移酶 | 第16-17页 |
1.5 Lac-Z | 第17-18页 |
第二节 外源基因导入蚕的方法 | 第18-26页 |
2.1 显微注射法 | 第18-20页 |
2.2 精子介导的外源DNA导入法 | 第20-21页 |
2.3 基因枪法 | 第21-23页 |
2.4 电穿孔法 | 第23页 |
2.5 病毒介导法 | 第23-25页 |
2.6 脉冲场电泳法 | 第25-26页 |
第三节 外源基因向基因组的整合与表达 | 第26-38页 |
3.1 启动子 | 第26-29页 |
3.2 整合策略 | 第29-34页 |
3.3 影响表达的因素 | 第34-38页 |
第四节 整合、表达的检测和系统维持 | 第38-49页 |
4.1 检测 | 第38-39页 |
4.2 转基因蚕个体筛选及系统维持 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-49页 |
第二章 材料和方法 | 第49-66页 |
第一节 材料 | 第49-55页 |
第二节 方法 | 第55-66页 |
第三章 新霉素抗性转基因蚕 | 第66-80页 |
摘要 | 第66-68页 |
第一节 材料和方法 | 第68-70页 |
1.1 材料 | 第68页 |
1.2 方法 | 第68-70页 |
第二节 结果 | 第70-77页 |
2.1 质粒的构建 | 第70页 |
2.2 质粒pFN转染家蚕Bm-N细胞 | 第70页 |
2.3 G418抗性细胞的基因组DNA检测 | 第70页 |
2.4 用含新霉素人工饲料饲育筛选转基因蚁蚕 | 第70-75页 |
2.5 Neo~R基因在家蚕基因组中的整合检测 | 第75-77页 |
第三节 讨论 | 第77-80页 |
3.1 质粒的构建 | 第77页 |
3.2 实验用含新霉素的人工饲料 | 第77页 |
3.3 导入方法 | 第77页 |
3.4 以Neo~R为选择标记 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-80页 |
第四章 抗NPV核酶转基因蚕 | 第80-117页 |
摘要 | 第80-84页 |
第一节 材料和方法 | 第84-87页 |
1.1 材料 | 第84-85页 |
1.2 方法 | 第85-87页 |
第二节 结果 | 第87-111页 |
2.1 质粒的构建和导入 | 第87-89页 |
2.2 转基因蚕的筛选、继代 | 第89-99页 |
2.3 核酶在家蚕基因组的插入表达 | 第99-105页 |
2.4 转基因家蚕体内核酶的活性鉴定 | 第105-109页 |
2.5 转基因家蚕体内荧光素酶活性的检测 | 第109-111页 |
第三节 讨论 | 第111-117页 |
3.1 载体的构建 | 第111-112页 |
3.2 转基因蚕的筛选和继代 | 第112-113页 |
3.3 核酶在家蚕基因组的整合分析 | 第113-114页 |
3.4 核酶活性的检测 | 第114-115页 |
3.5 核酶对BmNPV的“基因治疗” | 第115页 |
3.6 结语 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-117页 |
第五章 利用同源重组将GFP导入家蚕、整合至Fib-L链 | 第117-134页 |
摘要 | 第117-119页 |
第一节 材料和方法 | 第119-122页 |
1.1 材料 | 第119页 |
1.2 方法 | 第119-122页 |
第二节 结果 | 第122-131页 |
2.1 构建同源重组质粒p2GFP3 | 第122-127页 |
2.2 转基因蚕的继代 | 第127页 |
2.3 同源重组的检测 | 第127-129页 |
2.4 蛋白质的鉴定 | 第129-130页 |
2.5 蛋白溶液中GFP的ELASA的鉴定 | 第130-131页 |
第三节 讨论 | 第131-134页 |
参考文献 | 第134页 |
第六章 小结 | 第134-140页 |
研究生期间发表论文 | 第140-141页 |
致谢 | 第141页 |